利用SSH技术鉴定香蕉体细胞胚发生相关基因

本研究以野生蕉胚性悬浮系为材料,将胚性细胞增殖培养基上的香焦胚性悬浮系作为对照,体胚诱导培养基上的培养材料为处理,利用抑制性消减杂交(suppression subtractive hybridization,SSH)技术,构建野生蕉胚性悬浮系激素诱导的胚胎发育差异表达cDNA文库,随机挑选阳性克隆并进行生物信息学分析...     

大豆体细胞胚胎发生及植株再生

以野生大豆（ＧｌｙｃｉｎｅｓｏｊａｓｉｅｂｅｔＺｕｃｃ）三个品系、半野生大豆（Ｇｌｙｃｉｎｅｇｒａｃｉｌｉｓｓｋｖ）１个品系、栽培大豆（ＧｌｙｃｉｎｅｍａｘＬＭｅｒｒｉｌ）４个品系为材料，进行组织培养．探讨了大豆体细胞组织再生植株的主要影响因素，并以器官分化和体细胞胚两种不同方式再生完整大豆植株。     

鸡躯体和内脏初级传入纤维在脊髓和延髓的共同投射

采用ＣＢ—ＨＲＰ跨神经节追踪技术，我们发现鸡躯体和内脏的初级传入投射在脊髓质的一些板层和延髓的一些核团内有重叠区。１腓肠肌外头与卵巢的初级传入在Ｔ６～Ｌ３及Ｓ３～Ｓ５脊髓节段的Ｉ、Ⅴ层有明显的投射重叠区；与睾丸的初级传入在Ｔ６～Ｌ２及Ｓ３～Ｓ５髓节的Ｉ、Ⅴ层有明显的投射重叠；与泄殖腔的初级传入在Ｔ７～Ｌ２及Ｓ３～Ｓ５髓节的Ｉ、Ⅴ层亦有明显的重叠投射。２跗部皮肤与泄殖腔的在Ｌ２及Ｓ３髓节的Ｉ、Ⅳ层，与卵巢的在Ｌ２～Ｌ３髓节的Ｉ、Ⅳ层，与睾丸的在Ｌ３及Ｓ３髓节的Ｉ、Ⅳ层均有轻度的投射重叠区。３挠神经与腺胃及胸腺的在延髓的楔束外核和弧束核的内侧亚核有重叠投射区，４挠神经与卵巢、睾丸的在孤束核的内侧亚核有重叠；推测鸡的躯体和内脏的初级传入在这些区域可能有汇聚。     

铜对牛卵母细胞体外成熟及体外受精胚胎发育的影响

研究了氯化铜对牛卵母细胞体外成熟及体外受精胚胎发育潜力的影响。培养液中铜的浓度以原子吸收光谱法测定。培养液中铜的浓度为0(对照组)、0.46和0.68 mg·L-1。结果表明,试验组在卵母细胞成熟和受精卵发育至2细胞率与对照组差异不显著(P>0.05),但试验组较对照组显著提高了桑椹胚和囊胚的发育率(P<0.05)。在卵母细胞体外成熟培养的0~22 h、受精卵培养的0~48 h、48~96 h、96~144 h和144~192 h,0.46 mg·L-1试验组培养液中铜浓度分别下降了4.3%、8.7%、26.0%、28.3%和30.4%,0.68 mg·L-1试验组培养液中铜浓度分别下降了2.9%、7.4%、23.5%、25.0%和27.9%。培养液中铜对牛早期胚胎培养至桑椹胚和囊胚有重要的作用,早期胚胎发育48 h后对培养液中微量元素铜的需求明显增加。     

山羊同步发情和超排后取卵时间的研究

间隔９～１４ｄ分２次进行ＰＧＦ＿（２α）处理，以调整母羊的性周期。处理后的同步率分别为４７．６４％和６５．８８％。用ＰＭＳＧ或ＦＳＨ对４１９只母羊进行超排，总有效率７５．８１％，有效羊平均每只获卵７．６４枚。超排母羊发情后２０～３０ｈ回收的卵母细胞，可用率８５．９３％。用于山羊细胞核移植中的受体卵母细胞，适宜的回收时间为超排母羊发情后（２７±１）ｈ。在进行山羊原代细胞核移植时，以８～１６细胞期、桑椹期至囊胚期的分裂球或内细胞团细胞作供核的胚胎，适宜的获取时间为超排母羊发情交配后９６～１４４ｈ。     

提高N6培养基钙浓度对玉米幼胚培养的影响

筛选试验结果表明 ,将 N6 培养基 Ca2 + 浓度从 1.13mmol/ L提高到 5 m mol/ L ,对玉米幼胚胚性愈伤组织的诱导、继代和分化具有促进作用。在一次继代过程中 ,Ca2 +浓度为 5 m mol/ L 的培养基上培养的胚性愈伤组织相对生长量比 1.13m mol/ L 的原培养基增加 0 .8倍。 Ca2 +浓度提高以后 ,在培养基中再添加钙调蛋白 (Ca M)抑制剂盐酸氯丙嗪 (CPZ) ,可抑制 Ca2 +的促进作用 ,说明钙增加后对玉米胚性愈伤组织诱导和继代的促进作用受Ca2 + / Ca M信息系统控制。用改进后的 N6 培养基 ,可提高生产上大面积推广的玉米自交系胚性愈伤组织的诱导率和继代生长量     

胰岛素和葡萄糖对水牛体外受精早期胚胎发育的影响

探讨了不同浓度的胰岛素和葡萄糖对水牛体外受精早期胚胎体外发育的影响。结果表明,添加胰岛素浓度为5μg/mL时,水牛早期胚胎的囊胚发育率、囊胚细胞数及冷冻-解冻后胚胎的孵化率都显著高于对照组及其他浓度组(P<0.05);加入葡萄糖的浓度大于6 mm o l/L时显著影响水牛早期胚胎发育到囊胚及孵化囊胚的阶段(P<0.05);联合添加胰岛素和葡萄糖时能显著提高水牛早期胚胎的孵化囊胚率、总囊胚率和囊胚细胞数(P<0.05)。实验证实,浓度为5μg/mL胰岛素能促进水牛体外受精早期胚胎的发育;在TCM-199中单独添加葡萄糖是不必要的,联合添加葡萄糖和胰岛素能促进水牛体外受精早期胚胎的发育。     

应用超声波破碎苏云金芽孢杆菌试验

用超声波对一定浓度的苏云金芽孢杆菌的营养细胞和芽孢进行破碎试验,结果表明:在试验条件下,超声波破碎达到95%以上的破碎率所需时间为30~50min,尤其是菌液浓度为每毫升50亿,用Φ10变幅杆破碎,40min破碎率可达99.9%。而细菌的芽孢,无论是采用幅杆Φ6或Φ10,其破碎效果不明显。     

显微注射胚胎干细胞对长爪沙鼠胚胎发育的影响

将不同数量的成系的小鼠胚胎干细胞(ES细胞)显微注射注入长爪沙鼠(Merionesunguiculatus)的不同胚期的胚胎中,研究其对胚胎发育的影响,以期初步探索嵌合胚胎制作的条件。试验结果表明,显微注射2～5、6～10和11～15个ES细胞数量之间对早囊/囊胚期胚胎的成活率和孵化率的影响均不显著,但显微注射11～15个ES细胞的成活率和孵化率较低,分别为82.14%和64.29%;显微注射2～5个ES细胞的成活率和孵化率均较高,分别为90.90%和78.79%。显微注射11～15个ES细胞和未经显微注射的胚胎成活率分别为95.12%和82.14%,差异极显著(P<0.01);孵化率分别为90.48%和64.29%,差异极显著(P<0.01)。不经显微注射的桑椹/囊胚、经显微注射的8～16-细胞期胚胎和早囊/囊胚,其成活率分别为94.92%、91.53%和87.50%,差异均不显著(P>0.05);从孵化率来看,未经显微注射的桑椹/囊胚和经显微注射的8～16-细胞期胚胎其孵化率分别为89.83%和61.02%,差异极显著(P<0.01)。