百脉根细胞分裂素合成酶基因LjIPT2的克隆及其植物表达载体的构建

细胞分裂素在植物生长发育的许多方面行使重要功能,异戊二烯转移酶(IPT)是细胞分裂素合成的关键酶。利用生物信息学和RACE、TAIL技术从豆科模式植物百脉根中克隆到一个IPT基因,命名为LjIPT2。该基因全长为1 240 bp,含1 029 bp的完整开放阅读框,编码342个氨基酸。该序列已提交GenBank,登录号为DQ436463。LjIPT2基因的结构与拟南芥大部分细胞分裂素合成基因结构类似,其编码的蛋白与已鉴定出的IPT蛋白同源性较高。将LjIPT2插入到含有CaMV35S启动子的载体pCAMBIA1301上,构建了该基因的植物超表达载体35S:LjIPT2。该载体的构建为下一步研究百脉根LjIPT2基因的功能、探讨植物细胞分裂素的生物合成及其对植物生长发育的调控提供实验基础。     

藕带中多酚氧化酶的酶学性质研究

[目的]研究藕带中多酚氧化酶（PPO）的酶学性质。[方法]以邻苯二酚为底物,用分光光度法研究pH值、温度和抑制剂对藕带PPO活性的影响,并建立酶促褐变动力学方程。[结果]藕带PPO的最适pH值为6.0,最适温度为30℃;Km为0.0344mol/L,Vmax为172.41U/ml,70℃热保温60minPPO的活性基本丧失;抗坏血酸、柠檬酸、L-半胱氨酸和氯化亚锡均能抑制藕带PPO的活性,其中,L-半胱氨酸和氯化亚锡为最佳抑制剂,其次是柠檬酸和抗坏血酸,0.20g/LL-半胱氨酸和氯化亚锡均能有效抑制PPO的活性。[结论]该研究可为合理利用藕带资源和科学控制其深加工过程中的酶促褐变提供了参考依据。     

百脉根试管苗对NaCl的敏感性检测

各种植物对NaCl都具有一定的敏感性。本实验利用野生型百脉根组织培养再生苗为研究材料,在附加不同浓度NaCl的MS培养基上观察其生长及生根状态,确定百脉根试管苗对NaCl的临界耐受能力,目的是为筛选转耐盐基因百脉根抗盐性植株提供实验依据,同时也可以初步检测所克隆基因的耐盐效果。实验结果:NaCl浓度为0.7%以上的处理,试管苗叶片发白,长势弱,不生根或根停止伸长变褐;NaCl浓度为0.7%(不包括0.7%)以下的处理中,试管苗叶片绿色,长势旺盛,根系较多,与对照(NaCl浓度为0)试管苗状态接近。     

百脉根液泡膜H+-PPase基因LcVP1植物表达载体构建与转基因毛白杨的获得

为通过基因工程手段进行杨树耐盐性状的遗传改良,本文分析已克隆的百脉根液泡膜H+-PPase基因LcVP1的cDNA序列,根据其与植物表达中间载体pGN上的酶切位点设计一对带酶切位点的特异性引物,以测序质粒为模板,PCR扩增百脉根液泡膜H+-PPase基因开放阅读框片段。双酶切PCR回收产物和pGN载体,将目的片段定向连接构建成植物表达载体pGVP,并转入根癌农杆菌;在此基础上,利用根癌农杆菌介导的叶盘转化法,将百脉根液泡膜H+-PPase基因转入毛白杨基因组中。转基因杨树的获得,为获得耐盐性提高的杨树品系提供了基础。     

莲藕根状茎膨大机理及其影响因素的研究进展

本文主要从莲藕根状茎形态解剖学、形态建成及同化产物变化动态、内源激素对膨大过程的调控和重金属胁迫对根状茎膨大的影响四方面综述了近年来国内外在莲藕根状茎膨大机理方面的研究进展。针对该领域当前的研究现状,提出应加强莲藕根状茎膨大外界因素的研究,并指出了下一步亟需开展的工作。     

辐照处理对新鲜藕带的影响

以新鲜藕带为试材,通过辐照冷杀菌的方法对其进行处理。研究结果表明,辐照剂量在6kGy时,微生物达标,随着辐照剂量的增大,其褐变度加深,脆度变小。     

Copying and manipulating nature: Innovation for textile materials

This paper considers the potential impact of biological approaches such as bio-copying (biomimetics) and biomanipulating (e.g. genetic engineering) on future developments in the field of textiles and, in particular, fibres. If analytical tools for studying biological systems combined with those of materials science are further developed, and higher efficiency and reproducibility of genetic engineering technology can be achieved, the potential for the copying and manipulation of nature for textile innovations will be immense. The present state for both fields is described with examples such as touch and close fastener, structurally coloured fibres, the Lotus effect (for bio-copying), as well as herbicide tolerant cotton, insecticide resistant cotton (Bt cotton), cotton polyester bicomponent fibres, genetically engineered silkworm and silk protein, and spider fibres (for genetic engineering). Dedicated to Prof. Dr.-Ing. Dr. h.c. mult. H. Zahn on the occasion of his 85^th birthday     

百脉根AD-cDNA文库的构建及与结瘤因子受体NFR1相互作用蛋白的鉴定

以豆科植物百脉根为材料,构建了AD-cDNA表达文库。其库容量达到每3μg DNA 2×106酵母转化子,空载率为12.5%,平均片段长度为1.5 kb。以百脉根结瘤因子受体激酶基因1(nod factor receptor kinase,NFR1)蛋白激酶结构域的DNA片段(NFR1-PK)为诱饵,利用酵母双杂技术,筛选与NFR1相互作用的基因。结果在含X-gal的四缺选择性培养基上筛选到120个克隆。经质粒抽取、PCR鉴定、回转酵母验证得到80个阳性克隆。对26个确定阳性克隆的外源片段进行测序和同源性分析,通过NCBI数据库比对分析鉴定含有JAB1、AT-RICH结构域等4个与NFR1-PK相互作用的不同基因。通过半定量RT-PCR观察在百脉根中这些基因的表达情况,其结果可为进一步研究NFR1基因的功能和调控机制提供材料。     

籽莲施用多效唑效应初报

通过对籽莲施用多效唑简比试验。试验结果表明,籽莲施用多效唑后,节间长度缩短11.4%,叶柄和花柄高度分别降低3.2%和4.8%,粗度分别增加16.5%和13.0%,莲蓬折断率减少72.7%,同时叶片增厚、叶色浓绿、叶面积增大,蓬数增多9.4%,每蓬心皮数增多2.9%,粒质量增加1.2%,产量增幅8.8%。     

莲藕的活性成分研究进展

综述了莲藕的活性成分种类、莲藕活性成分的药用和食用开发利用价值及莲藕活性成分的提取方法3个方面的研究进展,并对其今后的研究进行了展望。