灰绿碱蓬多糖脱蛋白工艺研究

蛋白本身具有热敏感性,糖蛋白复合物在脱除蛋白质以后,多糖自身的生物活性会明显增加。本文测定了灰绿碱蓬根、茎、叶的基本营养成分,采用水提醇沉法提取了灰绿碱蓬多糖,并优化了多糖脱蛋白工艺比较了Savage法、(NH4)SO4沉淀法、TCA法和酶-Savage法这4种方法的脱蛋白效果。结果显示,灰绿碱蓬多糖的最佳脱蛋白方式为酶-Savage法,酶添加量为7%,Savage溶液处理一次,此条件下脱蛋白效果和多糖保留率均最好,蛋白质脱除率为80.71%,多糖保留率为67.27%。     

Comparison of kinetic properties of a hydrophilic form of acetylcholinesterase purified from strains susceptible and resistant to carbamate and organophosphorus insecticides of green rice leafhopper (Nephotettix cincticeps Uhler)

A hydrophilic form of acetylcholinesterase (AChE) was purified from N-methyl carbamate susceptible (SA) and highly N-methyl carbamate-resistant (N3D) strains of the green rice leafhopper (GRLH), Nephotettix cincticeps Uhler. Both of purified AChE from SA and N3D strains displayed the highest activities toward acetylthiocholine (ATCh) at pH 8.5. In the SA strain, the optimum concentrations for ATCh, propionylthiocholine (PTCh), and butyrylthiocholine (BTCh) were about 1 × 10⁻³, 2.5 × 10⁻³, and 1 × 10⁻³ M, respectively. However, in the N3D strain, substrate inhibition was not identified for ATCh, PTCh, and BTCh to 1 × 10⁻² M. The K_m value in the SA strain was 51.1, 39.1, and 41.6 μM and that in the N3D strain was 91.8, 88.1, and 85.2 μM for ATCh, PTCh, and BTCh, respectively. The K_m value in the N3D strain indicated about 1.80-, 2.25-, and 2.05-fold lower affinity than that of the SA strain for ATCh, PTCh, and BTCh, respectively. The V_max value in the SA strain was 70.2, 30.5, and 4.6 U/mg protein and that in the N3D strain was 123.0, 27.0, and 14.5 U/mg protein for ATCh, PTCh, and BTCh, respectively. The V_max value in the N3D strain was 1.75- and 3.15-fold higher for ATCh and BTCh than that in the N3D strain. However, it was 1.13-fold lower for PTCh. The increased activity of AChE in the N3D strain is due to the qualitatively modified enzyme with a higher catalytic efficiency. The bimolecular rate constant (k_i) for propoxur was 27.1 × 10⁴ and 0.51 × 10⁴ M⁻¹ min⁻¹ in the SA and N3D strain and that for monocrotophos was 0.031 × 10⁴ and 2.0 × 10⁴ M⁻¹ min⁻¹ in the SA and N3D strain. AChE from the N3D strain was 53-fold less sensitive than SA strain to inhibition by propoxur. In contrast, AChE from the N3D strain was 65-fold more sensitive to inhibition by monocrotophos than AChE from the SA strain. This indicated negatively correlated cross-insensitivity of AChE to propoxur and monocrotophos.     

黄芪多糖的超声波-闪式协同提取工艺优化及抗氧化活性研究

以黄芪为原料,采用超声波-闪式协同提取黄芪多糖。以黄芪多糖得率为评价指标,采用单因素试验和正交试验,确定最佳提取工艺。结果表明,超声波提取最佳工艺条件为：料液比1∶30（g/mL）,超声温度70 ℃,超声时间40 min,超声波功率500 W,在此条件下,黄芪多糖得率为7.11%;在对超声波提取工艺优化的基础上,协同闪式提取,最佳闪式提取工艺参数为：提取次数3 次,闪提时间100 s,提取电压160 V,在此条件下,黄芪多糖得率为11.03%;体外抗氧化活性试验结果表明：当黄芪多糖质量浓度为1.0 mg/mL 时,其对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）自由基和2,2-联氨-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸（2,2’-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid),ABTS）阳离子自由基的清除率分别为66.27%和58.27%。本研究获得了黄芪多糖的最佳提取方法,得到的黄芪多糖具有较强的抗氧化作用。该方法可为黄芪多糖的提取及开发应用提供参考。     

甘肃沙枣多糖提取工艺研究

采用热水浸提、醇沉法提取沙枣多糖,对沙枣多糖提取工艺进行了研究。选择料液比、浸提温度和浸提时间作为单因素进行梯度实验,确定其提取备件范围,再通过正交试验进一步确定沙枣多糖最佳提取工艺条件。结果表明,沙枣多糖的最佳提取工艺为：浸提温度为85℃、固液比为1：60、浸提时间为2h,在此条件下提取得甘肃沙枣多糖含量为4．98％。     

酵母细胞壁多糖在动物生产中的应用

酵母细胞壁多糖(YCP)作为一种天然绿色的添加剂,具有促进动物生长发育、提高动物生产性能、保护动物肠道健康和增强动物免疫力等诸多功能,可以有效替代抗生素在动物饲料中广泛使用.本文就YCP的组成结构以及在动物生产中的应用进行综述,为其进一步的研究和利用提供理论依据.     

茗荷水溶性多糖提取及抗氧化性能测定

采用单因素试验和厶(34)正交试验设计,研究了不同的料液比、提取时间和提取温度对茗荷多糖提取率的影响.并采用邻苯三酚自氧化法测定茗荷多糖对超氧阴离子自由基(O2-.)清除活性,Fenton体系测定茗荷多糖对羟基自由基(·OH)的清除作用.茗荷多糖提取的最佳工艺条件为以1:30的科液比,在90℃水浴条件下.提取时间为4h;茗荷多糖对超氧阴离子自由基和羟基自由基有较强的清除作用.     

中草药和芦荟多糖对肉鸡cAMP/cGMP与免疫功能的影响

研究了内仔鸡日粮中添加中草药添加剂和芦荟多糖对环核苷酸含量与免疫功能的影响.结果表明,中草药添加荆和芦荟多糖均能显著(P＜0.05)增加内鸡体重和肝脏重量,提高血浆和肝脏的cAMP和cGMP水平,以及血浆和肝脏的cAMP/cGMP比值.中草药添加剂加芦荟多糖提高了肉仔鸡对新城疫疫苗(NDV)的抗体水平,二免后,中草药添加荆加芦荟多糖既显著提高了内仔鸡对新城疫疫苗(NDV)的抗体水平(P＜0.05),同时还增强了肉仔鸡对NDV的免疫应答.表明中草药添加剂和芦荟多糖能提高内仔鸡的体液免疫功能,日粮中添加中草药添加荆加芦荟多糖比单独使用中草药添加剂或者芦荟多糖的效果要好,充分体现了不同的化学成分形成的协同免疫效应.     

病原微生物荚膜多糖的生物学功能

荚膜多糖(capsular polysaccharide,CPS)是一种广泛存在于细菌、支原体、部分真菌等菌体表面的碳水化合物.同时,荚膜多糖有助于菌体抵抗干燥和低温等不利环境,并通过在菌体表面形成物理屏障阻碍宿主补体的杀伤与吞噬作用.在长期多种应激-压力环境下,病原菌已进化出多种免疫逃避机制并促进宿主感染;在非病原微...     

皱纹盘鲍脏器多糖的分离纯化及鉴定

利用碱性蛋白酶从皱纹盘鲍脏器中提取多糖,采用胃蛋白酶和Sevag相结合的方法脱除蛋白质;经Sephadex G-100凝胶柱层析和DEAE-cellu lose 52离子交换层析分离纯化得到AHP-2;AHP-2经高效液相色谱和比旋光度法鉴定其为均一性多糖;紫外扫描无蛋白质的特征吸收峰;红外光谱分析,AHP-2具有典型的多糖吸收峰和硫酸基吸收峰;凝胶色谱法测定其分子量为10 000~15 000;化学组成分析表明,AHP-2是硫酸酯多糖,硫酸根含量11.55%;气相色谱测定单糖组成为鼠李糖、岩藻糖、木糖、半乳糖和葡萄糖,其摩尔比Rha∶Fuc∶Xyl∶Gal∶G lu=6.7∶2.0∶3.9∶7.4∶1.0。     

虾夷扇贝内脏多糖的提取及清除羟基自由基作用的研究

通过正交试验确定最佳提取条件为:温度50℃,pH 8.0,加酶量0.25%,料液比1∶45,提取时间2.5 h;最佳条件下提取的虾夷扇贝内脏多糖具有清除羟基自由基的能力。试验结果表明,6.5 mg/m l虾夷扇贝内脏多糖对羟基自由基的清除率可达84.75%。