金荞麦查尔酮合成酶基因CHS的克隆及序列分析

采用同源克隆的方法获得金荞麦查尔酮合成酶基因(CHS)的保守片段554 bp,进一步采用染色体步移法(genome-walking)和RT-PCR技术克隆到CHS基因的全长DNA序列和cDNA开放阅读框(ORF)序列.序列分析结果表明,金荞麦CHS基因DNA全长1 650 bp,含一个462 bp的内含子;其cDNA编码区全长1 188 bp,编码395个氨基酸,命名为FdCHS,NCBI登录号为GU169470.该氨基酸序列与同为蓼科的掌叶大黄、虎杖CHS的氨基酸序列同源率分别达到94%和93%,且含有CHS活性位点和底物结合口袋位点等保守位点.     

金荞麦叶保护酶与保护物质对增强UV-B辐射及干旱胁迫的响应

采用盆栽试验测定金荞麦在干旱和UV-B辐射胁迫下超氧化物歧化酶 （SOD） 活性、过氧化物酶 （POD）活性、总黄酮含量、游离脯氨酸和可溶性蛋白含量。试验结果显示在充足水分状况下,增强的UV\|B辐射提高了金荞麦叶SOD活性、总黄酮含量、游离脯氨酸含量;增强的UV-B辐射在处理前期和后期提高了金荞麦叶POD活性;增强的UV\|B辐射在处理前期增加了金荞麦叶可溶性蛋白含量。在干旱胁迫下,增强的UV-B辐射在处理中期提高了金荞麦叶SOD活性,而在处理前期和后期却降低了其SOD活性;增强的UV-B辐射在处理后期提高了金荞麦叶POD活性以及游离脯氨酸和可溶性蛋白含量。在干旱条件下,金荞麦通过酶系统和保护物质的调节减少胁迫带来的不利影响,增强试验设定强度的UV-B辐射在一定程度上有利于提高其对干旱的抗性。     

金荞麦超微粉对小鼠免疫功能的影响

本试验旨在研究金荞麦超微粉对小鼠免疫功能和生长发育的影响。将60只昆明小鼠随机等分为4组,高、中、低剂量组分别灌胃1.75、1.25、0.75 g/kg 体重金荞麦超微粉悬液,连续给药7 d;空白对照组灌胃等量的生理盐水。最后一次给药后间隔12 h,各组小鼠用鸡新城疫弱毒疫苗接种,随后在给药结束后的第7、14和21天取小鼠外周血用于分离淋巴细胞和血清,用CCK-8法测定外周血淋巴细胞增殖能力,微量血凝抑制试验评价血清中新城疫抗体水平,同时称量各组小鼠体重;给药结束后21 d测定小鼠腹腔巨噬细胞吞噬能力及脾脏指数。统计学分析结果显示,与对照组相比,中剂量金荞麦超微粉可极显著提高小鼠外周血淋巴细胞增殖能力、免疫抗体水平和体重(P<0.01),同时极显著提高腹腔巨噬细胞的吞噬能力和脾脏指数(P<0.01)。试验结果表明,金荞麦超微粉能显著提高机体的特异性免疫和非特异性免疫功能,促进机体的生长发育,为开发金荞麦超微粉成为新型天然植物药、饲料添加剂提供依据。     

苦荞全基因组SSR位点挖掘及遗传多样性分析

苦荞是一种重要的杂粮作物.利用GenBank数据库中苦荞的8条染色体基因组序列进行SSR标记挖掘,并基于Primer 3.0设计SSR引物,筛选多态性高的引物进行遗传多样性评价.共检测到51 485个SSR位点,平均发生频率为114.07 Mb-1,二核苷酸重复型最多(78.20％),其次为三核苷酸重复型(17.76％...     

苦荞种子中硒含量的基因型差异研究

[目的]筛选出硒含量较高的苦荞资源。[方法]以不同产地的35份苦荞资源为试材,测定了其籽粒中的硒含量。[结果]35份苦荞资源的硒含量变化幅度为0.009 9~0.120 8 mg/kg,平均值为0.040 6 mg/kg;不同产地苦荞的硒含量存在差异,以甘肃地区较高,贵州纳雍和陕西较低。[结论]为进一步研究硒含量在不同苦荞资源间的遗传变异规律提供了理论依据。     

金荞麦药酒对佐剂性关节炎大鼠氧自由基和免疫功能的影响

目的 研究金荞麦药酒对佐剂性关节炎模型大鼠的治疗效果,探讨其作用机制。方法 将大鼠随机分为正常组、模型组、阳性对照组（每天灌胃雷公藤多苷片混悬液0.03 g/kg）,低、中、高剂量金荞麦组（每天灌胃金荞麦药酒0.54、1.08、2.16 g/kg）。建立佐剂性关节炎模型12d后给药21d,观察大鼠左后足跖肿胀体积,检测血清肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）和足跖软组织TNF-α、前列腺素E2（PGE₂）、一氧化氮（NO）含量;流式细胞术分析脾脏淋巴细胞凋亡率,免疫组化法检测膝关节滑膜巨噬细胞密度。结果 与正常组比较,模型组足跖肿胀体积、血清TNF-α、MDA和足跖软组织TNF-α、PGE₂、NO水平、膝关节滑膜巨噬细胞密度明显升高（P<0.01）,血清SOD、脾脏淋巴细胞凋亡率明显降低（P<0.01）。与模型组比较,金荞麦可明显降低足跖肿胀体积、TNF-α、PGE₂、NO水平和膝关节滑膜巨噬细胞密度,升高脾脏淋巴细胞凋亡率（P<0.05或P<0.01）,但SOD、MDA无明显变化（P>0.05）。结论 金荞麦药酒治疗类风湿关节炎的机制可能与调节TNF-α、PGE₂、NO水平、膝关节滑膜巨噬细胞密度、脾脏淋巴细胞凋亡率有关。     

荞麦属植物MAPK基因片段序列比较与进化关系研究

丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)是植物MAPK级联途径中的重要信号分子。为了研究荞麦属MAPK基因序列变异以及种间进化关系,对荞麦属8个野生种共25份材料的MAPK基因进行特征引物PCR扩增、测序和序列比较分析。结果发现,荞麦属植物种间MAPK基因PCR扩增片段序列较为保守,8个野生种共25份材料中多态位点为125个,不变位点为680个。其中,12份野生苦荞MAPK基因片段序列多态位点S仅为32个,说明荞麦属植物种内MAPK基因序列高度保守。聚类分析发现野生甜荞与左贡野荞被聚为一类。野生苦荞、毛野荞、大野荞、金荞麦、细柄野荞和硬枝万年荞被聚为一大类;其中,细柄野荞和硬枝万年荞被聚在一起,其次与金荞麦聚在一起;毛野荞与大野荞被聚在一起。研究结果可为荞麦属植物MAPK基因功能以及种间遗传多样性与进化关系研究提供理论依据。     

甜荞产量与农艺性状和生理生化性状的灰色关联度分析

以12个甜荞品种为试验材料,采用灰色关联度分析法,对甜荞的7个农艺性状和6个生理生化性状与产量的关联度进行评价分析,探讨甜荞主要农艺性状和生理生化性状指标对产量影响的主次关系。结果表明,农艺性状与产量的关联度由大到小依次为结实率（0.8666）、单株粒数（0.8221）、株高（0.7720）、茎粗（0.7140）、千粒重（0.7004）、开花总数（0.6975）、干重（0.6243）;生理生化性状与产量的关联度由大到小依次为：叶绿素含量（0.7171）、丙二醛（MDA）含量（0.7035）、脯氨酸（Pro）含量（0.6372）、过氧化物酶（POD）活性（0.6369）、超氧化物歧化酶（SOD）活性（0.6191）和过氧化氢酶（CAT）活性（0.6028）。研究结果表明：选择结实率高、单株粒数多、叶绿素含量和MDA含量高的品种是甜荞生产中获得高产的重要途径。     

干旱及增强UV-B胁迫对金荞麦光合色素的影响

[目的]研究干旱胁迫和增强UV-B辐射对金荞麦光合色素的影响,以期为金荞麦规范化种植提供理论依据。[方法]采用盆栽试验的方法,测定金荞麦在不同程度干旱胁迫和UV-B辐射处理下光合色素的含量,并计算光合色素比值。[结果]金荞麦叶绿素a含量、叶绿素b含量、总叶绿素含量、叶绿素a/叶绿素b、类胡萝卜素含量都随干旱程度的加重而降低,类胡萝卜素/叶绿素在处理中后期基本随干旱程度的加深而有升高的趋势,在后期达到显著水平;在水分充足的状况下,增强的UV-B辐射降低了叶绿素a、叶绿素b和总叶绿素含量,显著提高了类胡萝卜素含量和类胡萝卜素/叶绿素;在干旱胁迫下,增强的UV-B辐射提高了叶绿素b和总叶绿素含量。[结论]金荞麦光合色素对干旱胁迫敏感,且在一定程度上能指示反映叶片受伤害程度,并反映土壤干旱水平;增强的UV-B辐射能减小由干旱胁迫带来的金荞麦光合色素变化。     

金荞麦超微粉对肉鸡免疫功能、生长发育的影响

本试验为研究金荞麦超微粉对肉鸡免疫功能和生长发育的影响,将160只1日龄白羽肉鸡随机分为4组,7日龄时用新城疫活疫苗滴鼻（1头份/只）,同时颈部皮下注射新城疫-禽流感二联灭活疫苗（0.3 mL/只）,间隔12 h后各组分别饲喂含不同药物的饲料,自由采食。低、高剂量组分别在饲料中添加4.50‰、8.75‰金荞麦超微粉,连续给药7 d。阳性对照组在饲料中添加400 g/L黄芪多糖,连续给药7 d;空白对照组饲料中不添加任何药物。随后在给药结束后的第7、21和35天翅下静脉采血用于分离淋巴细胞和血清,用CCK-8法测定外周血淋巴细胞增殖能力;微量血凝抑制试验评价血清中抗体效价;同时称量各组肉鸡体重,屠宰后解剖,取脾脏、法氏囊和胸腺计算免疫器官指数。结果显示,与对照组相比,在给药结束后7、21和35 d,金荞麦超微粉高、低剂量组与黄芪多糖组料重比均不同程度降低（P>0.05）;此外给药组可提高肉鸡外周血淋巴细胞增殖能力、免疫抗体水平和肉鸡体重,其中给药结束后21 d,金荞麦超微粉高剂量组禽流感病毒和新城疫病毒抗体效价与对照组相比差异极显著（P<0.01）;同时还能提高脾脏和法氏囊的脏器系数,并具有量效关系。综上所述,金荞麦超微粉可以显著提高雏鸡的细胞免疫、体液免疫和非特异性免疫功能,并显著增加体重。表明金荞麦超微粉具有增强白羽肉鸡免疫力和促进生长发育的功效,为开发金荞麦超微粉为新型天然植物药、饲料添加剂提供了依据。