蛹虫草大米培养残基中虫草素提取方法的优化研究

[目的]优化蛹虫草大米培养残基中虫草素的提取方法。[方法]以蛹虫草大米培养残基为原料,根据虫草素的理化性质,采用不同提取溶剂、温度、时间和pH值,进行单因素试验设计,利用HPLC技术检测虫草素。[结果]结果表明,蛹虫草大米培养残基中虫草素含量为2．011—2．185g／kg。不同水浴时间和温度条件的提取值为1．316～1．968g／kg。培养基残基中虫草素含量与子实体的比较系数为99．1％～110．9％。不同pH值提取液提取虫草素分别提高2．15％-15．89％。残基中虫草素优化的水溶剂提取工艺条件为：时间60min、温度60℃、pH值2．0;高浓度虫草素在水溶液中可能会发生降解。[结论]该研究为蛹虫草固体培养基的深加工和再利用以及开发新的虫草素资源提供理论依据和技术指导。     

苹果褐腐病菌中草药抑菌剂的筛选及提取条件研究

[目的]为中草药抑菌剂的开发提供参考依据。[方法]采用菌丝生长速率法测定了19种中草药乙醇提取物对苹果褐腐病菌的抑制活性。[结果]不同中草药提取物对苹果褐腐病菌的抑制活性存在一定差异。在中草药提取物浓度为0.1 mg/ml时,19种中草药中,马兜铃提取物对苹果褐腐病菌菌丝生长的抑制效果最好,抑制率高达49.64%;其次是鸦胆子、射干和葛根,抑制率均在20%以上;其余中草药提取物对苹果褐腐病菌均未表现出明显的抑制作用,其抑制率均在20%以下。通过单因素试验优化了马兜铃的提取条件,即以50%乙醇为溶剂、料液比为1∶5、提取温度为30℃、提取时间为4 h。[结论]马兜铃体内的有效成分具有强烈的抑菌活性,具有开发潜力。     

土壤动物多样性的研究方法

随着对生态学的深入研究,人们认识到土壤动物的群落结构、功能以及在生态过程中积极的不可替代的作用,土壤动物逐渐成为生态学研究的热点之一。对土壤动物的取样方法、分离和提取方法、观察和分类方法以及多样性统计方法4个方面进行了综述,为土壤动物的研究提供方法基础。     

一种简易有效的提取真菌DNA化学改良方法

[目的]探索适合真菌基因组DNA提取的有效方法。[方法]以酵母茵（Hansenula sp.HS07A）和青霉菌（Penicillium sp.HS07）为供试菌株,分别采用煮沸裂解法、石英砂研磨法、研磨和反复研磨冻融法和化学改良法提取其基因组DNA,比较这4种方法的提取效果。[结果]化学改良法提取基因组DNA,除去了机械破壁过程,减少了机械力对DNA造成的破坏,运用阴离子去污剂SIB提取DNA安全、价廉,能有效、完整地提取高质量的基因组DNA,凝胶电泳条带清晰、无弥散,以此基因组DNA作为目的片段的PCR扩增模板,扩增效果优于改良前的方法,并且这种方法也适合多种真菌和细菌基因组DNA的提取。[结论]化学改良法是提取真菌基因组DNA的有效方法。     

不同提取方法对秦艽中龙胆苦苷提取率的影响

[目的]建立RP-HPLC法研究不同提取方法对秦艽中龙胆苦苷提取率的影响,为秦艽药材的合理开发利用提供理论依据。[方法]采用C18色谱柱（4．6mm×250mm,5μm）,以甲醇：0．3％H3PO4=30：70（V/V）为流动相,流速：1．0ml／min,柱温：30℃,检测波长：270nm。[结果]龙胆苦苷在0．9—2．1μg范围内呈良好的线性关系,r=0．9991,平均回收率为97．6％,RSD值为1．02％。[结论]动态热回流提取法的提取效率最高。     

蒲菜叶总黄酮提取工艺优化研究

通过正交试验,研究了蒲菜叶总黄酮水提法和醇提法,并优化了醇提法提取工艺。结果表明:蒲菜叶总黄酮提取以醇提法为宜,其最佳提取工艺条件是料液比1∶40、用70%乙醇作提取溶剂、回流提取3 h、连续提取3次。     

超声提取天麻中天麻素优化工艺研究

[目的]探索超声波提取天麻中天麻素的最佳工艺。[方法]以天麻素含量为指标,通过L9（34）正交试验对天麻素的提取工艺进行优选。[结果]天麻素的标准曲线回归方程为：Y=14.549X＋21.925,R2=0.999 8。在0.053 5-2.140 0μg范围内,天麻素的进样量与峰面积呈良好线性关系。甲醇体积分数在70%以下时,随着甲醇浓度的增加,天麻素的提取率逐渐增加;甲醇体积分数超过80%时,天麻素的提取率下降。超声波功率低于350 W时,随着超声波功率的增加提取率增大;功率超过350 W时,提取率降低。超声提取5-30 m in时,提取率逐渐增加;超声提取30-40 m in时,提取率减少。溶剂体积为50 m l时提取率最高。[结论]提取天麻中天麻素的最佳条件为：甲醇体积分数为70%、溶剂体积为50 m l、超声功率为300 W、超声提取温度为55℃、超声时间为30 m in。     

燕麦分离蛋白提取工艺研究

[目的]优化燕麦分离蛋白提取工艺。[方法]以河北省高寒作物研究所提供的燕麦为试材,采用国标中经典方法测定粉状燕麦的成分,用超临界二氧化碳萃取技术对粉状燕麦进行脱脂,通过正交试验研究了碱提酸沉法制取燕麦分离蛋白的最佳工艺条件。[结果]燕麦的水分、灰分、脂肪、蛋白质及淀粉含量分别为4．99％、1．93％、8．38％、12．21％和50．23％。正交试验结果表明,采用碱提酸沉法提取燕麦分离蛋白的最佳工艺条件为：浸提液料比为9,浸提pH值为10,浸提温度为50℃,浸提时间为90min;在该条件下燕麦分离蛋白提取率达60．37％。用SDS—PAGE法测定的燕麦蛋白的分子量范围在20～43kDa。[结论]用该工艺提取燕麦分离蛋白简便、准确且提取率高。     

正交试验优选麻叶千里光中硒元素提取工艺的研究

[目的]利用正交试验法对麻叶千里光中硒元素提取工艺进行分析研究。[方法]采用回流提取法、索氏提取法和微波-超声波协同提取法进行提取;利用石墨炉原子吸收法对麻叶千里光提取液中微量元素硒含量进行测定分析。[结果]采用微波-超声波提取法测得的硒含量最高,为22．03μg/g,提取最佳条件为250W、240s,料液比为1：20;索氏提取法提取测得硒含量为21．80μg／g,提取最佳条件为80℃、6h,料液比为1：45;回流提取法测得硒含量为21．65μg/g,提取最佳条件为90℃、3h,料液比为1：25。测定结果的相对标准偏差为0．29％～0．38％,加标回收率为98．25％～101．30％。[结论]微波一超声波协同提取法测麻叶千里光中硒含量优于回流提取法和索氏提取法。     

不同方法提取狗脊蕨叶片总RNA的比较分析

[目的]为构建狗脊蕨叶cDNA文库,保存珍贵基因资源,克隆和研究与有效成分合成相关的基因等提供技术参考。[方法]以狗脊蕨叶片为材料,采用CTAB法、一步法、酚-SDS法和RNA试剂盒提取分离法提取总RNA,通过比较分析确定最优方法。[结果]这4种方法都能提取出182、8 S的RNA,但CTAB法和试剂盒提取分离法的总RNA质量较高,CTAB法还提取出清晰的5S RNA。一步法和SDS法带型模糊,有降解现象。CTAB法提取的狗脊蕨叶片总RNA质量较好,28S1、8S和5S条带清晰,且无明显降解。CTAB提取法OD260/OD280的值在1.93~2.06,试验中其OD260/OD280值为2.012,接近2.0,纯度较高。一步法和SDS法OD260/OD280>2.0,试剂盒法OD260/OD280<2.0。[结论]CTAB法适合提取的狗脊蕨叶片总RNA,质量较好,可用于cDNA合成、文库构建等后续分子生物学试验。