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21.
RT-PCR及RFLP分析技术对鸡传染性支气管炎病毒的诊断和S1基因分型的研究 总被引:4,自引:0,他引:4
本研究使用分别扩增整个S1糖蛋白基因 (引物A)和S1糖蛋白基因N_端高变区Ⅰ (引物B)的 2对引物对 3个IBV标准株M41、Connecticut、Arkansas及 5个地方分离株 (C60 ,D41A ,D41B ,A112 1,A1171)进行RT_PCR扩增。用引物A时 ,有 5个IBV毒株扩增到目的片段 (172 0bp) ;用引物B时 ,所有 8个IBV毒株均得到与预计大小相符的目的产物 (2 2 8bp)。对 172 0bp的PCR产物用限制性内切酶HaeⅢ进行酶切 ,结果得出 3个不同的RFLP图谱 ,其中M41、Connecticut、D41B具有相同的HaeⅢ酶切图谱。Arkansas和D41A则分别具有互不相同的图谱 ;对 2 2 8bp的PCR产物进行DdeⅠ、RsaⅠ限制性内切酶消化 ,根据它们的RFLP图谱 ,8个IBV毒株可分为 5个基因型。综合 2对引物的PCR产物的RFLP分析结果 ,8个IBV毒株可分为 7个基因型 ,分型的结果与传统的血清学方法吻合。本研究建立的方法和技术具有快速、简单、特异、灵敏等优点 ,为现场流行毒株的定型(基因型 /血清型 )及其S1基因变异的跟踪研究以及更有效防制传染性支气管炎奠定了基础。 相似文献
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猪肺炎支原体黏附因子基因R1R2区的克隆及表达 总被引:4,自引:0,他引:4
根据GenBank登录的猪肺炎支原体232株P97基因和J株黏附因子基因设计了1对引物,以我国猪肺炎支原体Z株(强毒株)基因组DNA为模板,通过PCR方法扩增了该株黏附因子基因的部分序列。经序列分析后,重新设计了1对带有EcoRI和HindⅢ酶切位点的引物,并经引物的定点突变,PCR扩增了Z株黏附因子的R1R2区。扩增产物经双酶切后克隆到表达载体pET-32(a) 中。该重组质粒经酶切鉴定后,将其具有正确阅读框架的重组质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,37℃下经IPTG诱导表达,得到相对分子质量约29000的融合蛋白,表达量约为11%。 相似文献
27.
数码育种是作者根据十几年的育种经验总结出的一套育种新方法。实践证明,应用该方法使育种目标更明确,育种路线更正确,选配组合更精确,育种路径更快捷,克服了选配组合的随机性和盲目性,能够在最短的时间内,以最少的投入,达到预期的育种目标。 相似文献
28.
利用雄性不育选育辣椒新品种农大082 总被引:1,自引:0,他引:1
农大082是以雄性不育系S200243A为母本,恢复系S200244C为父本配制而成的微辣型辣椒一代杂种。中早熟,从定植到始收30d(天)左右,果实羊角形,果纵径17—20cm,横径3-4cm,嫩果深绿色,成熟果红色,味微辣,果肉脆嫩,平均单果质量40—60g,667m^2产量3200-4600kg,抗TMV,耐CMV。已在北京、河北、四川、黑龙江等地示范推广逾400hm^2。 相似文献
29.
30.
Easley JR 《Veterinary clinical pathology / American Society for Veterinary Clinical Pathology》1986,15(1):12-15
The precision and stability of the ion exchange chromatography assay for canine glycosylated hemoglobin (HbA(1)) were examined. The coefficient of variation (CV) of within-run replicate assays was 1.3 to 2.6%; the CV of between-run duplicate assays was 3.1%. The mean HbA(1) content in 44 healthy dogs was 7.1% (SD = 1.1%, range = 5.1-9.7%). Paired aliquots of 12 blood samples were stored at 4 degrees C and 25 degrees C, and HbA(1) was measured on the day of collection and at 3, 5, and 7 days after collection. In the blood stored at 4 degrees C, no significant increase in the HbA(1) content was seen. No significant increase in HbA(1) content was found in the blood stored at 25 degrees C after 3 days, but dramatic increases were observed after 5 and 7 days of storage. No significant difference was observed in the HbA1 content in heart blood collected 18 hours after death from 9 dogs kept at 25 degrees C. The HbA(1) content was measured in 10 hospitalized diabetic dogs. Five of the dogs had received no insulin and all 5 had elevated HbA(1) values. The other 5 dogs had received insulin for 1 to 9 months; 2 of the 5 had increased HbA(1) content. The HbA(1) content was determined periodically for 9 months in one diabetic dog and it declined from 14% to 8.2%. 相似文献