北半球高卢蜜环菌的遗传多样性与分子鉴定

从北美、欧洲和中国收集２３个高卢密环菌菌株，ＰＣＲ扩增其rDNA的ＩＧＳ和ＩＴＳ区域，用ＡluI,HaeIII,HinfI和ＴagI四种限制性内切酶进行酶切，同时结合随机扩增微卫生（ＲＡＭＳ）多态性，对北半球的高卢蜜环菌的遗传多样性进行了分析，结果发现了高卢蜜环菌的６种ＩＧＳ－ＲＦＬＰ图谱类型，其中gal(B)和gal(D)是国内外无报道的新的ＩＧＳ－ＲＦＬＰ型，ＲＦＬＰ系统树发现该种有明显的大陆之间的遗传分化，存在中国，欧洲，北美和亚洲４个亚群体，ＲＡＭＳ分析表明北半球高卢蜜环菌存在亚洲，欧洲，北美－中国和北美－欧洲和北美－欧洲等４个高卢蜜环菌发育系，而且不同大陆的高卢蜜环菌具有较近的亲缘关系，而相同大陆的却具有不同的起源，特别是北美的高卢蜜环菌两个发育系异源性很高，北美东部的发育系同欧洲的关系比较近，而北西部的同亚洲关系比较近，同时表明ＲＡＭＳ技术是分析菌物种内遗传多样性的优越方法。     

基于IGS序列的两株蜜环菌分子鉴定

以从猪苓[Polyporus umbellatus(Pers.)Fr.]菌核和榛蘑(Armillariella mellea)子实体中分离得到菌株bs和zm为试材,通过对其IGS区段进行分析并结合分离材料和培养菌丝的形态特征确定其分类学地位。结果表明:菌核和子实体的生境及形态学特征初步鉴定为蜜环菌;对2个菌株的分类学地位进行了分析确定,并利用引物5SA和CNL12扩增其IGS区域,进行BLAST比对分析,菌株bs和zm均为高炉蜜环菌,为辽宁省猪苓的伴生菌。     

黄绿蜜环菌有效成分的定性分析

采用水提取法、醇提取法和石油醚提取法对黄绿蜜环菌的化学成分进行了提取。结果表明:黄绿蜜环菌中含有较丰富的蛋白质、氨基酸、糖类、生物碱和少量有机酸、黄酮、强心苷、甾体三萜类、苷类、皂苷,而挥发油、香豆素萜类、鞣质、酚类极少。通过定性分析黄绿蜜环菌的有效成分,为充分利用其营养价值、药用价值和经济价值提供了重要的参考依据。     

Identification of Armillaria isolates from Bhutan based on DNA sequence comparisons

Armillaria root rot is a serious disease in fir and mixed conifer forests of Bhutan, Eastern Himalayas. The species causing this disease have, however, never been identified. The aim of this study was to identify field isolates collected at four localities in Bhutan. Identification was based on RFLP analysis of the IGS-1 region, comparisons of ITS and IGS-1 sequence data with those available on GenBank, cladistic analyses and sexual compatibility studies. Isolates were found to reside in two distinct RFLP groups. RFLP group 1 isolates from Pinus wallichiana at Yusipang had RFLP profiles and IGS-1 sequences similar to those of Armillaria mellea ssp. nipponica . Although ITS sequence data are not available for A. mellea ssp. nipponica , sequences from this DNA region were most similar to the closely related A. mellea from Asia. The RFLP profile and IGS-1 sequences for RFLP group 2 isolates from Abies densa at Changaphug, Tsuga dumosa at Chimithanka as well as Picea spinulosa and T. dumosa in the Phobjikha valley were similar to those published for Armillaria borealis , Armillaria cepistipes , Armillaria gemina and Armillaria ostoyae . Distance analysis based on IGS-1 and ITS sequence data indicated that these isolates are closely related to A. cepistipes , Armillaria gallica and Armillaria sinapina . The isolates were, however, sexually incompatible with tester strains of A. cepistipes , A. gallica and A. sinapina . Although closely related to these species, they appear to represent a distinct taxon that will be referred to as Bhutanese phylogenetic species I (BPS I) until basidiocarps are found and the species can be described.     

高卢蜜环菌杂交菌株筛选初探

提出蜜环菌单孢亲本菌株及杂交菌株的筛选标准,从114个高卢蜜环菌菌株中选出15个欧洲、北美及中国的单孢亲本菌株,通过杂交,筛选出6个具有杂交优势的组合(A3E3、A3C1、A3C3、A3C4、A3C3和A1C3)。     

中国西南的蜜环菌属真菌

蜜环菌属Armillaria(Fr．：Fr．)Staude真菌分布广泛，具有多种经济价值，但是由于各个种的担子果外部形态变化多样，因此不易正确地识别。本文报道了我国西南的4种蜜环菌属真菌：黄小蜜环菌A．cepistipes Velen、蜜环菌A．mellea(Vahl：Fr)P．Kumm．、奥氏蜜环菌A．ostoyae(Romagn．)Herink及假蜜环菌A．tabescens(Scop．)Emel，对其进行了简要描述和显微绘图，并编制了检索表，以帮助读者准确识别上述真菌。     

蜜环菌群体遗传规律的初步研究

在长白山保护区天然针阔混交林和张广才岭地区红松人工林内,设立5个样地,采集蜜环菌样本331号.利用体细胞非亲和性的试验方法,鉴定出东北地区林木病原菌奥氏蜜环菌在林间的遗传体密度较低,是以菌索的形式存在,并为主要传播方式.在防治中应以切断病原菌的土壤传播为主要原则.     

蜜环菌培养影响因子的多因素分析

[目的]探讨蜜环菌人工培养方法。[方法]研究菌材营养和pH、光照、温度等环境条件下蜜环菌生长形态变化规律和生长量。[结果]pH 5.0浸泡液浸泡菌材、黑暗条件有利于蜜环菌生长;温度较高有利于气生菌丝生长,温度较低有利于菌索生长;用带有栎树、棉秸秆的混合材料作菌材培养蜜环菌,可实现发菌快、菌索多的目的。[结论]试验结果为提高蜜环菌人工培养技术水平提供了理论依据。     

蜜环菌液体深层发酵培养基的优选

蜜环菌(Armillaria mellea)是一种与传统中药天麻(Gastrodia elata Blume)共生的著名的药用真菌。在我国,天麻有广泛的治疗疾病的效果,但由于生产限制,不能完全满足临床用药的需要。试验用蜜环菌代替天麻,通过对蜜环菌液体深层发酵最适碳源、氮源的筛选,以及正交试验,确定了蜜环菌液体深层发酵的最适培养基配方为:马铃薯20%,葡萄糖1%,蔗糖1%,酵母浸粉2%,蚕蛹粉1%,磷酸二氢钾0.15%,硫酸镁0.075%,VB10.001%。经过此培养基的验证培养后,得到菌丝体的生物量平均为1.525g/100mL,菌体生长状态良好。     

野生天麻·栽培天麻的RAPD和AFLP标记遗传多态性分析

[目的]用RAPD和AFLP技术对采自主产区不同地域的2份野生天麻和7份栽培天麻进行多态性和聚类分析,研究天麻的遗传多样性及其原因。[方法]用酚-氯仿法提取的基因组DNA,经RAPD及AFLP程序扩增后分别用琼脂糖凝胶和PAGE电泳检测,使用NTSYSpc-2.10s软件的UPGMA方法对检测结果进行聚类。[结果]用RAPD和AFLP数据得到的聚类图相似,来自不同地方和不同海拔高度的样品在聚类图上得以区分。天麻与蜜环菌之间没有共同条带。[结论]包括海拔在内的地域隔阂,而非人工种植可能是产生天麻种内遗传多样性的重要原因;虽然天麻靠消化侵入其皮层内部的蜜环菌菌丝提供营养而进行发育,但是它们之间没有DNA的相互作用。