斜纹夜蛾核型多角体病毒Ⅱ型(SpltMNPV Ⅱ)ORF117基因的结构和功能研究

为了研究斜纹夜蛾核型多角体病毒Ⅱ型(Splt MNPVⅡ)中ORF117基因(编码GP117蛋白)的结构和功能,根据其核苷酸序列和氨基酸序列进行了生物信息学分析,以此为基础对该基因的启动子活性和转录时相进行分析,表达纯化了GP117蛋白的部分序列以制备豚鼠来源多克隆抗体,并利用该抗体对ORF117基因的表达时相和GP117蛋白在细胞中的定位进行了分析。生物信息学分析表明该基因全长1 203 bp,编码400个氨基酸的蛋白质,预测分子量为45.5 k Da,等电点为5.06;启动子活性和转录时相分析结果表明ORF117是一个晚期表达的基因;原核表达抗原免疫制备的多克隆抗体效价可以达到1∶3 200,利用该抗体对其表达时相的分析进一步验证了ORF117为晚期表达基因,免疫荧光检测表明编码的蛋白多存在于细胞质中。     

高温胁迫及恢复对水稻叶绿素荧光动力学特性和保护酶活性的影响

[目的]研究高温胁迫对拔节期水稻（Oryza sativa L.）叶绿素荧光动力学参数及保护酶活性的影响。[方法]水稻品种为镇稻6号。试验设1、3、5 d高温胁迫处理和高温胁迫处理5 d后恢复2 d处理,另设1个常温对照。一天中高温胁迫温度设定为：10：00,36℃;11：00,38℃;12：00,39℃;13：00,40℃;14：00,38℃;15：00,35℃。[结果]与常温对照相比,高温胁迫下水稻叶绿素荧光主要参数F0变化不大;与常温对照相比,高温胁迫1、3、5 d处理Fv/Fm明显降低,但高温胁迫3、5 d处理Fv/Fm相比高温胁迫1 d处理升高,高温胁迫处理5 d后恢复2 d处理Fv/Fm与常温对照差异不大。与常温对照相比,高温胁迫1 d处理的过氧化物酶（POD）、过氧化氢酶（CAT）的活性明显增强,丙二醛（MDA）含量增加,但随着胁迫时间的延长其均逐渐降低,接近对照水平。[结论]夏季高温对水稻PSⅡ反应中心造成可逆性伤害,并在保护酶的作用下逐渐修复,适应性逐渐增强,常温恢复2 d后可接近正常水平。     

质粒DNA 免疫小鼠制备IGF-Ⅱ抗体的研究

[目的]用基因免疫法制备人类胰岛素样生长因子Ⅱ(IGF-Ⅱ)的抗体,从而检验基因免疫法的可行性。[方法]通过RT-PCR法克隆到IGF-Ⅱ基因,将其连接到pcDNA3.1A载体上,用含IGF-Ⅱ基因的质粒通过皮下、肌肉注射2种途径免疫小鼠,制备抗血清;用Western blot法检测抗体特异性和抗体效价,探索基因免疫法制备抗体的方法,并进一步观察免疫次数及途径对抗体产生的影响。[结果]基因免疫不同次数的小鼠体内均有抗体产生,且皮下、肌肉不同免疫途径的血清均显示阳性结果,其中皮下注射免疫抗体产生较早;抗体效价可达到1∶500,而且特异性较强。[结论]通过基因免疫法制备IGF-Ⅱ抗体是可行的,而且效果较好。     

由Cu(Ⅱ)促进的肌红蛋白选择性水解切割反应

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,研究了中性条件下[CuL(Cl)](C lO4)与马心肌红蛋白的选择性水解切割反应,L为2-[二(2-氨乙酸)氨基]乙醇.结果表明,[CuL(Cl)](ClO4)对马心肌红蛋白显示出较高的切割选择性和切割效率,且切割效率与浓度、介质条件、温度、温育时间有一定的相关性.     

Effect of ERK1/2/c-Fos signal pathway on angiotensin-(1-7) inhibiting proliferation of rat glomerular mesangial cell strain induced by angiotensin Ⅱ

AIM: To investigate the effect of ERK1/2/c-Fos signal pathway during angiotensin-(1-7) inhibiting proliferation of rat glomerular mesangial cell strain (GMCS) induced by angiotensin Ⅱ. METHODS: Rat glomerular mesangial cells (GMC) were co-cultured with angiotensin Ⅱ and different doses of angiotensin-(1-7). The numbers of GMC were evaluated by crystal violet staining. The amounts of p-ERK1/2 and c-Fos expressions were detected by Western blotting. RESULTS: Angiotensin- (1-7) showed its inhibitory effects on GMC number increasing induced by angiotensin Ⅱ as well as the amounts of p-ERK1/2 and c-Fos expressions in a concentration dependent manner. CONCLUSION: ERK/c-Fos signal pathway is involved in the inhibitory effects of angiotensin-(1-7) on angiotensin Ⅱ -induced GMC proliferation.     

根癌农杆菌介导的‘魏可’葡萄遗传转化体系的优化

以‘魏可’葡萄离体叶片为外植体,利用植物表达载体上含有卡那霉素抗性基因(nptⅡ)的根癌农杆菌LBA4404(pCAMBIA2301)对影响‘魏可’葡萄遗传转化效率的因素进行系统研究。结果表明,最佳农杆菌介导‘魏可’葡萄遗传转化体系为农杆菌侵染4 min,共培养3 d,卡那霉素质量浓度5 mg·L-1,羧苄青霉素质量浓度200 mg·L-1。采用此体系对‘魏可’葡萄进行转化,共获得9株抗性苗。利用GUS组织化学染色、PCR扩增的方法检测,结果表明,有4株通过了PCR检测,1株通过了RT-PCR检测,初步证明nptⅡ基因已经整合进入‘魏可’葡萄基因组中。将PCR产物回收,经测序验证nptⅡ基因完全整合进入‘魏可’葡萄基因组中。对CK及经PCR检测呈阳性的株系进行卡那霉素抗性鉴定,发现PCR呈阳性的株系均比CK抗Kan的能力明显增强。     

低聚壳寡糖植物生长调节剂对丹参生长及次生代谢产物的影响

[目的]研究低聚壳寡糖植物生长调节剂对丹参（Salvia miltiorrhiae Bge.）生长及次生代谢产物的影响。[方法]采用拌种加叶喷等方法施用不同浓度低聚壳寡糖植物生长调节剂,观察丹参生长情况及对次生代谢产物丹参酮IIA含量的累积变化情况。[结果]低聚壳寡糖植物生长调节剂较显著地促进了丹参酮IIA含量的提高。适宜浓度的低聚壳寡糖植物生长调节剂能促进丹参植株及根系的生长。[结论]该研究对揭示低聚壳寡糖植物生长调节剂对丹参活性成分的累积效应形成和积累机制,以完善中药材质量调控与药用植物栽培的理论和技术体系,建立优质丹参的规范化栽培技术,同时对促进中药材规范化的优良种植都具有重要的价值和意义。     

中国大白猪SⅡ_1系选育的遗传再评定

[目的]计算中国大白猪SⅡ1系各世代种猪的估计育种值,在进行第5世代选种选配的同时,对品系选育过程进行再评定。[方法]依据湖北省农科院畜牧所中国大白猪SⅡ1系的育种资料,应用NETPIG猪育种管理软件及SAS软件进行育种值估计及数据分析。[结果]选育各世代留种公猪的综合育种指数呈上升趋势,4世代留种公猪的平均父系指数为107.44,ADG、AGE、BF、NBT、NOBA、CLR和EMA的遗传趋势分别为0.776、-0.704、-0.087、0.115、0.055、0.062和0.027。[结论]中国大白猪SⅡ1系的选育过程,在主选性状上所采取的育种措施是行之有效的,在每个世代末有必要用BLUP法对种公猪进行遗传再评定及遗传与表型趋势分析。     

遮荫处理对5种鸢尾属植物的叶绿素荧光特性的影响

[目的]对鸢尾属植物的适宜栽植的光照强度提供理论参考。[方法]研究不同遮荫条件对5种鸢尾属植物叶绿素荧光特性的影响。[结果]随着遮荫强度的加大,Fv/Fm、Fv’/Fm、qP都有不同程度的提高。从方差分析来看,在各鸢尾属种类之间,Fv/Fm、qP差异在0.01水平显著;而遮荫处理对Fv/Fm、qP的影响不明显。[结论]5种鸢尾属植物利用光能的效率顺序为日本鸢尾、鸢尾、德国鸢尾、溪荪、马蔺。     

Study on Developmental Expression of ApoCⅡ Gene mRNA in Liver Tissues of Pigs

The aim of this study was to investigate the developmental patterns of ApoCⅡ gene mRNA in liver in Mashen and Large White pigs, and study the relationship between the expression level of ApoCⅡ and the lipid metabolism in pigs.The mRNA relative expressions of ApoCⅡ gene in liver at seven stages of 1,30,60,90,120,150,and 180-day old in Mashen and Large White pigs were determined by quantitative Real-time PCR.The results showed that the developmental trend of ApoCⅡ mRNA expression in liver between Mashen and Large White pigs was different.The ApoCⅡ mRNA abundance was decreased from birth to 60-day old,then increased at 90-day old,and decreased again after that in Mashen pig.However,the relative expression amount in Large White pig was gradually decreased from birth to 150-day old and increased again at 180-day old.Except for the ApoCⅡ mRNA expression amount at 1-day old,the differences of the expression amount at other stages in Mashen and Large White pigs were significant or extremely significant (P<0.05 or P<0.01).The ApoCⅡ mRNA expression in liver was affected by age and breed,and could play an important role in lipid metabolism in pigs.