Association Analysis Between Polymorphism of IGF1 Gene and Growth Traits in Rabbit

This study was aimed to analyze the association of insulin-like growth factor 1 (IGF1) gene polymorphisms with growth traits in rabbit. The technology of DNA pooling, PCR-SSCP and direct sequencing were used to detect the SNP of IGF1 gene. The results showed that T365C was detected in IGF1 gene exon 3 of rabbit. The SNP (C/T) was devised into three genotypes:TT, TC and CC. The relationships between genotypes and growth traits revealed that the birth weight and the weight at 28 days of age in New Zealand rabbit of TT genotype of T365C locus were significantly higher than TC and CC genotypes (P<0.05), the birth weight, the weight at 90 days of age and average daily gain form birth to 90 days of age in Belgian rabbit of TT genotype of T365C locus were significantly higher than TC and CC genotypes (P<0.05), there were no significant difference of the growth traits in other rabbit breeds (P>0.05).The consequence indicated that IGF1 gene was primarily deduced to be a potential major gene or linked to major gene effecting the growth traits of rabbit, and this SNP (T365C) might be a candidate molecular genetic markers to improve the growth traits of rabbit.     

鸡毒霉形体HS株pMGA多基因族序列分析

用限制性核酸内切酶对鸡毒霉形体(MG)HS株基因文库中经初步估测可能含有的4个鸡毒霉形体粘附蛋白(protein of Mycoplasma gallisepticum adhesin,pMGA)基因的MgW17重组质粒进行了不同组合的酶消化,根据消化片段的大小及酶切位点绘制了7.5kb外源片段的物理图谱;然后根据所得的物理图谱,选用Pst I和EcoR I将MgW17外源片段酶解成1.3、2.0、4.2 kb 3个部分,将它们分别亚克隆到SK(十)质粒上,得到了3个亚克隆子SGp100、SGp200、SGp300.使用核酸外切酶Ⅲ缺失法构建缺失子系列,经序列分析后得到MgW17外源片段的全部序列.序列全长7 434 bp,中间含有2个完整的pMGA基因和另2个不完整的pMGA基因的首部和尾部,分别将它们顺次命名为H-pMGA1.1、H-pMGA1.2、H-pMGA1.3和H pMGA1.4.2个完整的pMGA基因的阅读框长度分别为1 967 bp(1.2)和2039 bp(1.3);H-pMGA1.1首部不完整的阅读框的长度为720 bp,尾部不完整的H-pMGA1.4的长度为1 752 bp.将H-pMGA基因与已报道的MG.S6株、F株的pMGA基因进行了比较,探讨了pMGA基因在不同MG菌株中的相似性、基因启动子结构的差异、间隔区内GAA重复序列对转录调控的影响等.     

酵母培养物对隐性乳房炎奶牛免疫功能和抗氧化功能的影响

用CMT试剂进行隐性乳房炎检测,选取胎次、泌乳期、产奶量相近且隐性乳房炎检测为阳性的奶牛24头作为试验供体牛,随机分为3组,每组8头。其中试验Ⅰ组为对照组,试验Ⅱ组投喂益康XP[60g/（头·d）],试验Ⅲ组投喂麦可利[150g/（头·d）]。预饲期为15d,试验期为30d,共45d。分别在预饲期前1d,预饲期最后1d和试验期第30天采集各组牛的颈静脉血样和混合乳样,测定奶牛机体免疫功能、抗氧化功能。结果表明：①添加2种不同酵母培养物后,各试验组奶牛外周血淋巴细胞亚群CD8的比例均呈上升势态,使得CD4/CD8的比值下降,低于正常范围。这可能归因于效应＋＋＋性T细胞淋巴细胞（CTL）增多有关。②添加2种不同酵母培养物后,奶牛血清中IgG含量增加或保持稳定状态,但在整个试验期内各组奶牛血清IgG和IgA含量均低于正常范围,这可能与试验动物为隐性乳房炎患牛有关。③添加2种不同的酵母培养物均可显著降低隐性乳房炎奶牛血浆MDA含量,显著提高了血浆SOD、GSH-Px酶活力。MDA的减少提示机体脂质过氧化程度降低,SOD和GSH-Px酶活力提高,表明机体抗氧化能力增强,说明酵母培养物具有提高机体抗氧化酶活性的作用,能够有效清除自由基,减少活性氧对机体造成的损伤。     

鸽圆环病毒福建株全基因组序列分析

运用PCR技术从福建省某地发病信鸽组织中获得鸽圆环病毒（Pigeon circovirus,PICV）福建株（简称fj1株）全基因组序列,并对鸽圆环病毒福建株基因组核苷酸组成、结构及其遗传进行分析。结果表明,所获fj1株全基因大小2037 nt,包含有2个主要的开放阅读框（open reading frame,ORF）：ORF-V1（41～994nt）编码复制相关结构蛋白（the replicated-associated protein,Rep）,ORF-C1（1987～1166nt）编码核衣壳蛋白（the putative capsid protein,Cap）;在V1和C1的5＇端之间存在一个与圆环病毒滚环复制有关的高度保守的环状发夹结构。fj1株与GenBank登录所有鸽圆环病毒核苷酸同源性在84.5%～93.8%之间,与中国浙江鸽圆环病毒分离株zj1和zj2核苷酸同源性分别为88.7%和88.9%。从遗传进化上看,中国3株鸽圆环病毒均处在Cap蛋白起始密码子＂ATG＂分支,但分居不同亚群。     

猪布鲁菌S2omp10基因缺失株的构建及特性

现有的布鲁菌减毒活疫苗存在一定毒力,且野强毒株和减毒活疫苗株间缺少可供鉴别的抗原,导致在血清学检测上自然感染与疫苗接种很难区分,限制了现有的减毒活疫苗的广泛应用.本文拟对布鲁菌的减毒活疫苗株S2进行遗传改造,克服上述缺陷.本研究利用同源重组的方法,得到了布鲁菌S2株omp10基因缺失株.分别用基因缺失株和疫苗株感染小鼠,比较基因缺失株小鼠体内的存活能力.结果成功构建了布鲁菌S2株omp10基因缺失株,动物试验结果表明,基因缺失株仍能在小鼠体内存活,具备作为减毒活疫苗的特性.与原始S2株比较,基因缺失株的感染力进一步减弱.表明omp10基因在布鲁菌的毒力及体内生存方面发挥了作用,为基因标记疫苗的研制奠定了基础.     

鸡促卵泡素及其受体基因在多个非繁殖组织中的表达研究

本研究利用PCR和免疫组化等方法,对FSHR和FSH基因在鸡多个非繁殖系统的组织器官中的mRNA和蛋白水平的表达以及相关性进行了分析.结果显示:在心脏、肝脏、肾脏、肺和十二指肠中FSHR mRNA和蛋白以及FSH蛋白水平具有相同的表达趋势,表达丰度从大到小依次为肝脏、心脏、肾脏、肺和十二指肠.而在脾脏、胃、腿肌和胸肌中未检测到FSHR mRNA和蛋白以及FSH蛋白水平的表达;在检测的9个组织中,均无FSHmRNA的表达.相关性分析结果表明,在肝脏、心脏、肾脏、肺和十二指肠中各组织器官质量与组织中的FSH蛋白水平具有显著或极显著的正相关(P＜0.05或P＜0.01);各组织中的FSHR mRNA和蛋白水平均与FSH蛋白水平存在显著或极显著正相关(P＜0.05或P＜0.01).本研究初步证明,机体其他部位表达分泌的促卵泡素,在多个非繁殖组织器官(肝脏、心脏、肾脏、肺和十二指肠)中通过调控促卵泡素受体基因的表达来影响北京油鸡不同组织的发育.     

牛卵泡抑素基因克隆及真核表达载体构建

[目的]克隆牛的卵泡抑素基因（Follistatin,FSTN）基因,构建真核表达载体。[方法]用Trizol法从牛的卵巢中提取总RNA,反转录成cDNA,用带有酶切位点牛FSTN的特异性引物扩增其完整编码区序列,连接到T载体、测序,序列无误后亚克隆入真核表达载体pIRES2-AcGFP1中,酶切及PCR鉴定载体。[结...     

猪链球菌9型荚膜多糖cps9G基因的原核表达

本研究旨在克隆表达猪链球菌9型荚膜多糖部分抗原表位。设计1对引物,采用PCR法以猪链球菌9型河南分离株PY-2的基因组DNA为模板扩增出cps9G全基因序列。用限制性核酸内切酶BamHⅠ、XhoⅠ进行双酶切后,将其定向克隆到pET32a（＋）中,构建重组表达质粒pET32a—cps9G,并将其转化至大肠杆菌BL21（DE3）感受态细胞中进行诱导表达,并优化表达条件。结果表明,经1．2mmol／L IPTG诱导4h后SDS-PAGE分析表明,重组菌株表达出了约50700的融合蛋白条带,与预期一致。Western-blotting分析表明,该融合蛋白具有特异的生物学活性。这为以后建立快速、简便、特异的免疫学检测方法及制备单克隆抗体提供了较好的抗原,同时为研制猪链球菌亚单位疫苗和诊断试剂盒奠定了基础。     

第18届欧洲家禽营养论坛在土耳其召开

10月31日～11月4日,世界家禽科学协会土耳其分部主办的第18届欧洲家禽营养论坛在土耳其切什梅召开,超过900名代表参加。论坛分5个专题进行研讨:早期营养与生长、饲料质量和食品安全、营养-基因互作、家禽饲料生产新技术、家禽营养与动物福利。邀     

奶山羊BLG基因敲除载体的构建

根据已知的BLG序列设计引物,通过PCR技术克隆同源臂序列,5′端同源臂2 264bp,包括外显子1,3′端同源臂4 461bp,包括全部的外显子3、4、5、6、7,分别连入克隆载体pMD18-T Simple载体中并测序。然后以含有正负筛选标记基因的ploxpⅡ载体为基础,将5′端和3′端同源臂片段先后连入其中,进行酶切、PCR鉴定。将构建好的基因敲除载体转化组成型表达Cre重组酶的大肠杆菌BM25.8,验证Loxp位点的活性。结果表明,构建了奶山羊BLG基因第2外显子缺失的基因敲除载体pBLG2T,且pBLG2T载体中的正选neo基因可以被Cre重组酶去除。为获得BLG 1条等位基因缺失型细胞株以及培育高产优质奶山羊新品种奠定基础。