拟南芥CDR6基因过表达载体构建及过量表达植株筛选鉴定

[目的]以拟南芥为材料克隆CDR6基因,构建CDR6基因的过量表达载体并筛选鉴定获得过表达植株.[方法]提取拟南芥mR-NA,反转录成cDNA,并以此为模板克隆CDR6基因CDS全长,通过限制性内切酶切割、T4 DNA连接酶连接,将CDR6基因CDS全长连接到带有35S强启动子的pXB094载体上;然后转化至Trans1-T1感受态细胞中,菌落PCR鉴定阳性单克隆并测序确认.将重组质粒转化至根瘤农杆菌GV3101菌株,通过浸花法侵染拟南芥野生型植株,通过抗性筛选和鉴定获得预期的转基因植株.[结果]菌落PCR鉴定和测序结果表明CDR6基因已成功构建至pXB094载体;通过抗性筛选并鉴定获得了过量表达阳性植株.[结论]筛选和鉴定获得的过量表达植株为研究CDR6基因的分子功能奠定了基础.     

长期饲喂含棉籽饼混合饲料引起牛慢性中毒

棉籽饼(粕)具有高热值和特殊的生物价值,其中含有油脂类、糖类、蛋白质及维生素类等营养成分,可作为家畜的蛋白质饲料来源,如在日粮中添加适量,可提高饲料效应。但长期过量饲喂棉籽饼饲料,尤其是未经脱毒或调制不当,易在家畜体内蓄积引起中毒。1临床症状自2004年3月份开始,青海     

蔬菜施肥过量引起的生理病害

菜农为了获得更高的产量,往往过量地投入有机肥和化肥,使土壤养分过量积累,特别是氮素和磷素的大量累积,土壤发生盐渍化,造成蔬菜发生生理障碍,使蔬菜品质和产量下降。为蔬菜生长创造良好的生态环境,按作物的需肥种类和需肥量,合理施肥,     

过量表达拟南芥GPX3基因提高玉米苗期抗旱性研究

通过农杆菌介导法将拟南芥抗旱基因AtGPX3导入玉米自交系郑58中,用PCR和RT-PCR法对转化玉米进行检测,在水分胁迫下对T₁代转基因玉米和非转基因玉米进行抗旱性分析。结果表明,共得到56株转化苗,检测获得9个株系的30株T₀代转基因阳性植株,抗性植株阳性率为53.6%。RT-PCR检测表明,T₁代有6个株系为稳定遗传阳性株系,并且AtGPX3基因在转基因玉米中表达量大幅度提高。耐旱性分析表明,非胁迫条件下,非转基因和转基因株系中游离脯氨酸（Pro）和丙二醛（MDA）的含量基本无显著差异。在干旱胁迫条件下,转基因玉米叶片的Pro含量高于非转基因玉米,比非转基因株系提高了46.2%;MDA含量低于非转基因玉米,比非转基因玉米下降了34%。通过导入AtGPX3基因,可以提高玉米苗期的耐旱性。     

青花菜转录因子基因BoiWRKY8及其与抗病性的关系

WRKY转录因子是植物特有的一类调控蛋白,在抵御生物和非生物逆境中起着重要作用。为初步明确该基因在抗病反应中的功能,本研究在分离青花菜BoiWRKY8基因的基础上,利用生物信息学方法进行序列分析,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)明确其在核盘菌、灰霉菌侵染下的表达模式,并对过量表达植株进行抗病性鉴定。结果表明,BoiWRKY8的基因组全长为3 170 bp,具2个内含子,长度分别为776和1 422 bp。编码区全长为972 bp,编码323个氨基酸,WRKY结构域由60个氨基酸组成,包括一个WRKYGQK序列和一个C₂H₂锌指结构C-X₄-C-X₂₃-H-X₁-H。系统发育分析结果表明,BoiWRKY8与芸薹属植物的同源序列聚为一组,支持率达100%,与野甘蓝的关系最近。qRT-PCR结果显示,BoiWRKY8受核盘菌和灰霉菌的诱导,在6和12 h时的表达量最大,为对照的3.18/2.68和3.22/2.90倍;BoiWRKY8过量表达植株对核盘菌、灰霉菌的抗性显著增强...     

过量表达甘菊CBF1基因提高拟南芥抗旱耐盐能力

CBF是一类植物特异性、具有多种功能的转录因子。本研究将从甘菊(Chrysanthemum lavandulifolium)中分离的ClCBF1基因构建到植物表达载体pBI121上,并采用农杆菌介导的花序浸染法对拟南芥(Arabidopsis thaliana)进行遗传转化,共获得4个转基因株系经过抗性筛选和RT-PCR验证,对其中表达量较高的3个转基因株系进行研究,结果表明:在150mmol·L~(-1)甘露醇培养基中转基因拟南芥的种子萌发率和根长平均为野生型的2.0倍和1.2倍,在150mmol·L~(-1) NaCl培养基中转基因拟南芥种子萌发率和根长平均为野生型的1.1倍和1.4倍;在干旱和盐胁迫条件下,转基因拟南芥幼苗的成活率高于野生型,并且超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化物酶(POD)活性显著高于野生型(P0.05),丙二醛(MDA)含量及相对电导率显著低于野生型植株(P0.05)。说明ClCBF1基因在拟南芥受到干旱和盐胁迫过程中发挥一定作用。     

三峡库区农户过量施肥负效应认知实证分析

近年来,农业生产中过量施肥问题越来越严重,研究农户对过量施肥负效应的认知对控制化肥施用量具有重要意义.本文采用结构方程模型(SEM),基于三峡库区南沱镇的调查问卷数据,实证分析了农户对过量施肥负效应认知的影响因素.结果表明:当地农户文化程度普遍不高,基本处于初中文化水平;农户比较关心先进农业信息技术,但是当地政府和农技部门对先进农业信息技术的宣传和推广力度不够.家庭特征和环境意识对过量施肥负面效应的认知有一定影响,但是影响不是很大,农技培训对过量施肥负面效应的认知的影响分析具有统计学意义.因此,加强农业技术培训,定期开展农业技术信息宣传对控制农户施肥量具有积极作用.     

大蒜肥害发生的原因及预防措施

山东省金乡县是全国闻名的“中国大蒜之乡”,常年种植大蒜4万多hm2,生产蒜薹15万多t、蒜头80多万t。大蒜根系为弦状须根,几乎没有根毛,入土浅,根群小,吸肥力弱,但需肥量大,是一种喜肥耐肥作物。只有供给充足的肥料,才能满足其高产优质的需要。但若施肥过量或施用方法不当,也会发生肥害。不仅在播种至出苗期会发生底肥肥害,在生育过程中也会发生追肥肥害。现将大蒜肥害发生的原因及预防措施介绍如下。     

过量磷对菜心植株生长和产量及品质的影响

采用营养液水培法,研究过量磷对菜心(Brassica parachinensis)植株生长、产量和品质的影响.结果表明:与正常磷浓度处理(1 mmol/L H2PO4-)比较,3～7mmol/L H2P04-处理植株生物量和产量均显著降低,5和7 mmol/L H2PO4-处理植株根冠比显著增加;随着磷浓度的增加,菜薹表皮花色苷含量和菜薹可溶性糖含量逐渐增加,菜薹硝酸盐含量逐渐降低,三者与营养液磷浓度均呈显著线性关系.     

果树单株精准施肥新法初探

施肥是果树生产中最重要的技术环节之一,但人们却经常忽视,施肥既盲目又随意．错误地认为只要多施肥,果树就能多结果、结好果。事实并非如此,施肥过量不仅会引起树疯长,而且难成花、难坐果、产量低、质量差。同时病虫害加重、污染环境、浪费资源、提高成本等。