苹果生长素响应因子MdARF5的克隆与功能鉴定

【目的】分离苹果生长素响应因子MdARF5（Auxin Response Factor 5）,分析其对生长素的响应,鉴定其在调节花青苷合成过程中的作用,揭示MdARF5的生物学功能,为进一步研究生长素对花青苷的调节提供理论依据。【方法】以‘嘎拉’苹果（Malus×domestica ‘Royal Gala’）为材料,利用同源克隆技术,克隆得到一个ARF（Auxin Response Factor）转录因子,并将其命名为MdARF5。利用MEGA5.0软件构建多物种间系统进化树。通过农杆菌介导的遗传转化获得转基因苹果愈伤组织。比较野生型和转基因苹果愈伤组织花青苷积累的差异。利用烟草叶片瞬时转化试验,分析MdARF5对MdMYB1的转录调控。【结果】克隆获得苹果生长素响应因子MdARF5（序列号：MDP0000143749）,该基因CDS为2 691 bp,编码含有896个氨基酸的蛋白。系统进化树分析表明,苹果MdARF5与梨PbARF5同源性最高。基因表达分析显示,该基因响应生长素处理,并且与花青苷合成相关基因表现出相反的表达模式。在苹果愈伤组织中超表达MdARF5,其花青苷积累较野生型显著降低,表明MdARF5在调控花青苷积累过程中发挥重要作用。对苹果MdMYB1启动子序列进行分析,发现其序列包含一个MdARF5的结合位点。烟草瞬时表达试验显示,MdARF5能够抑制MdMYB1的表达。【结论】推测苹果MdARF5可能通过直接抑制MdMYB1的表达负调节花青苷的积累。     

6种杀菌剂对苹果轮纹病的毒力测定

采用生长速率法测定了6种杀菌剂对苹果轮纹病菌的毒力。结果表明,氟硅唑、戊唑醇、多菌灵对菌丝的抑制作用最为明显,氟硅唑在处理剂量为0.800μg/mL时,抑制率为96.04%;戊唑醇在处理剂量3.200μg/mL时,抑制率为96.21%;多菌灵在处理剂量0.320μg/mL时,抑制率为92.20%。氟硅唑和多菌灵对苹果轮纹病菌的毒力较强,EC50分别为0.038 52μg/mL和0.067 54μg/mL;其次为戊唑醇和吡唑醚菌酯,EC50分别为0.154 8μg/mL和1.504 23μg/mL;苯醚甲环唑和异菌脲EC50分别为4.357 08μg/mL和4.875 82μg/mL。苯醚甲环唑对苹果轮纹病菌的毒力最弱。     

运城市苹果主产区丰产果园土壤养分状况分析

为探明运城市苹果主产区果园土壤养分状况,以运城市不同县域、不同海拔、不同树龄的盛果期果园土壤为研究对象,测定0～40 cm土壤有机质、氮、磷、钾含量以及pH水平。结果表明,运城市主产果园氮含量总体偏低,磷、钾含量丰富,土壤偏碱性;不同县域、不同海拔高度、不同树龄的果园土壤养分状况之间存在显著差异,其中,临猗县果园氮、磷、钾含量显著低于万荣、芮城和平陆县域;海拔高度在700～850 m的果园氮含量显著高于700 m以下的果园,海拔高度在550～700 m的果园与树龄少于10 a的果园中有效磷平均值含量较高,不同海拔高度的速效钾含量差异不显著;不同县域及不同海拔主产果园土壤有机质含量存在差异,总体表现为平陆县有机质含量显著高于万荣、芮城和临猗县域,海拔高度在700～850 m的果园有机质含量显著高于700 m以下的果园,但平陆县及海拔高度在700～850 m果园的有机质含量平均值均未达到绿色食品产地土壤肥力分级Ⅱ级标准。运城市主产果园土壤管理过程中应注重有机肥的施用,提高土壤有机质含量,降低土壤pH值,平衡使用化肥。     

不同品种苹果果胶含量及结构差异分析

【目的】比较分析不同品种苹果原料果胶结构的差异性,为品种识别提供帮助,为苹果相关产品的加工以及苹果副产物的利用提供理论数据基础。【方法】以来自全国7个产区的14个品种20份苹果样品为研究对象,由每份苹果的细胞壁物质（alcohol-insoluble residue,AIR）提取3种类型果胶：水溶性果胶（water-soluble pectin,WSP）、螯合性果胶（CDTA-soluble pectin,CSP）及碱溶性果胶(Na₂CO₃-soluble pectin,NSP),研究分析果胶的半乳糖醛酸（galacturonic acid,GalA）含量、酯化度、重均分子量(weight-average molar mass,Mw)、中性糖含量以及结构官能团,并进行主成分分析以及热图分析。【结果】不同品种苹果样本间果胶特性存在一定差异性。3种类型果胶含量以NSP半乳糖醛酸含量最多,WSP次之,CSP含量最少,最富含果胶含量的苹果品种是‘澳洲青苹’（215.75 mg GalA·g^-1 AIR）,产自不同地区的‘富士’（栖霞、新疆、青岛‘烟6’、河北‘三优’）苹果的各果胶半乳糖醛酸含量有着较大的差异;‘秋锦’的WSP甲酯化度最高,CSP的甲酯化度偏高,且大多数为高酯化度果胶;WSP的乙酰化度均在3.5%以下;WSP的Mw在各品种苹果间差异性最为显著,辽宁‘华月’WSP的Mw最高;‘红将军’WSP的Mw/Mn高于其他品种,但其CSP的Mw/Mn低于其他品种;Mw/Mn在3种类型果胶间差异性较小;中性糖含量组成均以鼠李糖、阿拉伯糖、半乳糖3种单糖居多,岩藻糖、木糖、甘露糖呈微量状态,葡萄糖存在居多的原因可能是在果胶的提取过程中,有可溶性淀粉、糊精或低聚糖混杂;各果胶以同型聚半乳糖醛酸和鼠李聚半乳糖醛酸II型结构为主,且果胶侧链较多;主成分分析得出苹果样本间的主要差异性指标为WSP的半乳糖含量、阿拉伯糖含量、岩藻糖含量以及CSP的半乳糖含量、鼠李糖含量、中性糖比率（鼠李糖与半乳糖醛酸含量的比值）。【结论】不同品种苹果原料中3种类型果胶的含量及其结构存在一定的差异性,具有父本、母本等基因杂交关系的苹果品种的果胶结构特点间存在关联性,研究可为苹果育种与种植结构调整提供理论支持。     

苹果密闭园不同间伐方式对光照、光合和生长结果的影响

【目的】研究苹果密闭园的不同间伐方式对果园光照状况、叶片光合指标、果树生长和产量质量的影响,为密闭园的合理改造提供理论依据。【方法】以‘红富士’苹果郁闭园为试材,设计隔行间伐（A）、隔株间伐（B）和行内隔3去1间伐（C）3种处理和不间伐的对照（CK）,对它们的光照、光合、树体生长以及产量和质量的相关指标进行测定分析。【结果】3年的结果表明,除CK外,各处理的树冠覆盖率在3年间均有不同程度的增长,但仍表现为CK＞C＞B＞A;果园透光率和树冠内透光率表现为A＞B＞C＞CK;在生长季,各处理叶片的净光合速率、羧化效率和水分利用效率表现为A＞B＞C＞CK,各处理叶片的胞间CO2浓度结果与此相反;3处理每公顷的产量在间伐当年均明显低于CK的,但间伐第二年就可恢复,到间伐第三年处理A、B每公顷的产量则显著高于处理C和CK的;3年间各处理的平均单果重、着色指数、可溶性糖含量、滴定酸的含量、优质果率等质量指标均好于CK,具体表现为处理A、B的明显好于处理C和CK的。【结论】适宜的间伐方式除在短时间内产量有一定下降外,可从根本上改善果园光照状况、提高光合效率和果品质量。     

苹果茎沟病毒的RT-PCR检测及其在我国苹果产区的分布

为开发苹果茎沟病毒(Apple stem grooving virus,ASGV)田间样本RT-PCR检测方法以及揭示我国AS-GV的发生情况,本研究以染病的苹果组培苗为试材,对ASGV RT-PCR检测方法进行了优化并利用优化的检测体系对我国苹果产区ASGV的发生情况进行了检测。结果表明:引物ASGVS特异性最好,优化的RT-PCR检测体系能够在4,7和11月份检测果树树皮组织的带毒情况,灵敏度达到能够检测2.5×10-2μg新鲜样本,适于苹果ASGV田间样本检测。通过对我国苹果产区ASGV的检测发现,被检测的13个省(市/区)苹果上几乎都有ASGV发生,只有甘肃省泾川样本未检测到该病毒,采集的327个样本带毒率达73.7%。     

GA含量与其合成酶基因在‘长富2号’苹果及其短枝型芽变品种之间的比较分析

【目的】研究苹果枝条节间长度与内源激素赤霉素（GA）水平及GA合成关键酶基因序列和表达之间的关系,为进一步探索苹果短枝型芽变形成机理及选育新的短枝型苹果品种奠定基础。【方法】以‘长富2号’苹果及其短枝型芽变‘龙富短枝’的枝条和叶片为试材,通过对花后4个时期GA含量的测定及GA合成途径中关键基因的克隆及表达,研究枝条生长过程中GA与枝条节间长度的关系。【结果】在花后80 d,GA含量在非短枝型苹果及其短枝型芽变中差异显著,短枝型芽变品种中GA含量低于非短枝型品种。序列分析表明,GA合成关键酶基因GA20-氧化酶（GA20ox）和贝壳杉烯氧化酶（KO）的cDNA序列在‘龙富短枝’和‘长富2号’中完全一致,无碱基的突变、插入或缺失现象发生。实时荧光定量PCR分析表明,在花后20 d和80 d,GA20ox和 KO的相对表达量在‘龙富短枝’和‘长富2号’之间差异显著,短枝型芽变品种中的相对表达量显著低于非短枝型苹果。【结论】GA含量差异和GA合成关键酶基因差异表达与短枝型苹果枝条节间长度相关联,低GA含量和GA合成关键酶基因的下调表达抑制了苹果枝条的伸长。     

粉红女士苹果优质高效栽培技术

分析了粉红女士苹果的品种特性及适栽区域,详细介绍了其优质高效栽培技术,包括新园建设、整形修剪、花果管理、肥水管理、病虫害防治等内容,以供参考。     

陕西苹果花期冻害温度预报方法研究

基于T639数值模式建立了陕西花期冻害温度预报模型,将冻害温度预报精细到乡镇;实现了基于ECMWF数值模式及温度产品的苹果花期冻害的自动预警,结果可为实际生产中苹果花期防灾减灾工作提供参考。     

浅谈天水花牛苹果优果管理技术

天水是国内知名的花牛苹果生产基地,所产花牛苹果曾多次在全国果品展览会上获得殊荣。本文介绍了花牛苹果优果管理技术,以期指导果农生产,提高花牛苹果果品质量和市场竞争力。