橘园土壤中嘧菌酯的残留消解动态分析

为了了解嘧菌酯在柑橘园土壤中的消解动态规律,采用气相色谱-电子捕获检测法,对贵州、湖南、浙江3地的橘园土壤中嘧菌酯残留进行了检测,并建立了嘧菌酯在土壤样品中的残留检测体系.结果表明,在试验检测条件下,嘧菌酯的最小检出量为1×10-11 g,相对保留时间为4.86 min;添加回收率为98.3％～105.4％,变异系数为5.0％～7.2％,标准偏差为5.15％～7.15％,均能达到我国农药残留检测的要求;湖南、浙江、贵州柑橘园土壤中嘧菌酯的消解半衰期分别为14.0、13.2、11.6d.这表明在自然条件下,嘧菌酯在土壤中消解较快,不会造成土壤中累积性残留污染.     

纤维素降解菌的筛选及其酶学性质研究

从霉变甘蔗叶中分离到1株纤维素降解菌,对其部分重要培养条件和酶学性质进行了研究,结果表明:该降解菌最适培养条件为碳源羧甲基纤维素钠(CMC-Na)、碳源浓度2.0%、氮源酵母粉、培养温度20℃、培养p H 6.5,培养时间96 h。该降解菌所产滤纸酶和CMC酶的酶活性最适温度为40℃,最适p H为5.5。     

布鲁菌缺失疫苗株M5-ΔznuA和M5-Δbp26-ΔznuA的构建及毒力和免疫原性的评估

【目的】利用分子生物学技术,通过同源重组的方法构建了新型的羊种布鲁菌Brucella melitensis减毒活疫苗株,为布鲁菌的防治提供新的选择.【方法】以羊种布鲁菌减毒活疫苗M5株及缺失bp26基因的M5-Δbp26缺失突变株为亲本株,利用电击转化法,将含有znuA基因上下游同源臂的自杀质粒转入到亲本株中,通过同源重组敲除znuA基因.对构建的新型基因缺失株进行生物学特性及毒力的鉴定与分析.【结果和结论】PCR及核苷酸序列测序结果表明,羊种布鲁菌减毒活疫苗znuA单基因缺失株和bp26、znuA双基因缺失株均构建成功,分别将其命名为M5-ΔznuA和M5-Δbp26-ΔznuA.与亲本株相比,2种缺失突变株的生物学特性没有显著性差异;体外连续传至20代后,菌落PCR和核苷酸测序结果显示M5-ΔznuA和M5-Δbp26-ΔznuA株具有良好的遗传稳定性.小鼠脾脏质量和脾脏菌落数表明,M5-Δbp26-ΔznuA双基因缺失株毒力最弱,单基因缺失株M5-ΔznuA和M5-Δbp26次之.血清中抗体水平的监测显示,znuA基因的缺失对布鲁菌减毒活疫苗诱导机体体液免疫的能力没有影响.获得了免疫原性保持良好而毒力减弱的羊种布鲁菌减毒活疫苗基因突变株M5-ΔznuA和M5-Δbp26-ΔznuA.     

诱发枇杷霜冻害的冰核细菌拮抗菌分离与筛选

[目的]筛选出具有防除枇杷INA细菌的拮抗菌.[方法]从枇杷根际土壤中分离冰核细菌拮抗菌,对其进行抑菌圈、杀菌能力、破坏冰核活性蛋白能力测定.[结果]从不同海拔地区的根际土壤中共分离得到128个菌株,其中有拮抗效果的有55株,平皿拮抗效果强的有15株,再经拮抗系数比较得到9株强拮抗菌菌株,最后筛选出l株杀菌率达98％、破坏冰核蛋白能力达100％的拮抗菌BL-36.[结论] BL-36既有杀菌效果又有破坏冰核蛋白能力,是具有较好利用前景的防除诱发枇杷霜冻害冰核细菌、减轻枇杷霜冻害的生物防治材料.     

植物土传疾病拮抗菌的筛选及其生防潜力评价

通过筛选出对植物土传疾病具有良好拮抗效果的菌株BS-17,对其生防效果进行测定,旨在为开发植物土传疾病广谱抗菌生物制剂提供一定依据。采用平板对峙法,筛选出对9种常见植物土传疾病具有拮抗效果的拮抗菌,抑菌率均在80%以上。利用形态学、生理生化及分子生物学的方法对其进行了鉴定,并对拮抗物质产生的位置以及性质进行初步研究;通过土壤定殖试验对其生防潜力作出评价。通过形态学、生理生化及分子生物学的方法鉴定菌株BS-17为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)。该菌产生的主要抗菌物质分布于胞外,拮抗物质对热、pH值、紫外线以及蛋白酶均不敏感。此外,菌株BS-17具有较好的产纤维素酶及蛋白酶的能力。土壤定殖试验证明,该菌表现出良好的定殖能力以及抑制病原菌生长的能力。菌株BS-17作为生防菌用于防治植物土传疾病,具有较好的开发和利用价值。     

高效石油烃降解菌CQ6的分离鉴定及He-Ne激光诱变

从长庆油田石油污染土壤中分离得到一株产生生物表面活性剂的高效石油烃降解菌。通过形态学、生理生化和分子生物学研究,筛选出的菌株CQ6被鉴定为短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)。为了增强该菌降解石油烃的能力,对其进行He-Ne激光诱变,获得6株突变株,通过检测其表面张力、排油圈直径和烃降解率,降解石油烃能力最强且遗传性状稳定的突变株CQ66被挑选出来。本研究表明,He-Ne激光诱变育种技术可有效改良石油烃降解菌,该手段对修复石油污染土壤具有现实意义。     

抗灰霉病解淀粉芽孢杆菌的发酵条件优化

【目的】研究灰霉病拮抗菌K1的发酵条件。【方法】以OD600值为指标采用响应面法对其发酵培养基、发酵条件进行优化。通过Plackett-Burman实验确定酵母膏、p H、接种量为其最显著的3个因素。经过BoxBehnken实验和响应面实验得到最优发酵条件。【结果】最优发酵培养基为:淀粉1%,酵母膏1.8%,硫酸钾1.5%。最优发酵条件:p H6.8,接种量为2.8%,温度25℃,转速130 r/min,装液量100 m L/250 m L。【结论】K1发酵16 h后的OD600值可达到1.490,远高于优化前0.864,明显提高了K1的生长速率。优化后发酵液抑菌直径为49mm,高于优化前的43 mm。     

乳酸菌富铁的研究

为了使铁离子转化为易被动物体吸收的微量元素,以防治仔猪因缺铁而造成的贫血等病症,本研究用乳酸菌富集铁元素。首先测得乳酸菌在硫酸亚铁和有机铁2种来源的铁元素中所能正常生长的最高铁离子浓度,然后加入适宜浓度的铁离子培养乳酸菌至最高活菌数。菌液离心后冲洗3次并烘干,用原子分光光度法测定乳酸菌干细胞内铁离子的含量,比较乳酸菌对2种形态铁元素的富集能力。最后做饲养试验。结果表明:乳酸菌对有机铁的耐受质量浓度(0.5 g/L)比硫酸亚铁(0.1 g/L)高;乳酸菌对有机铁的富集能力(1.590 mg/g)比硫酸亚铁(0.024mg/g)强。含有机铁的乳酸菌制剂对降低断奶仔猪死亡率有显著效果。     

饲料呕吐毒素生物降解研究进展

呕吐毒素（Vomitoxin）,又名脱氧雪腐镰刀菌烯醇（deoxynivalenol,DON）,是一种无色针状结晶,熔点为151℃～152℃,具有较强的热抗力,121℃高压加热25min仅少量破坏。     

ELISA和微量凝集法检测马流产沙门菌血清抗体的比较

为比较微量凝集(MSAT)和间接ELISA方法检测马流产沙门菌血清抗体的检出率和符合率,本试验分别用全菌包被间接ELISA、MSAT法对采集的191份马血清及标准阴阳性血清进行马流产沙门菌抗体的检测,并对两种方法进行比较分析。MSAT法和间接ELISA法的阳性检出率分别为45.03%和47.12%,MSAT法与间接ELISA法的符合率为89%。MSAT法不需要精密的仪器,便于操作,操作周期短,但存在观察时的人为误差;间接ELISA具有较高的敏感性、特异性和准确性。在实践中可以将两种方法相结合使用。