对虾白斑综合征病毒囊膜蛋白VP28 基因的克隆及序列分析

自1990年来,世界各地的对虾养殖业受对虾白斑综合征的严重威胁[1].对虾白斑综合征的病原是对虾白斑综合征病毒(white spot syndrome virus,WSSV)[2],WSSV的宿主主要是海洋甲壳类动物,经口感染[3].     

扁穗牛鞭草克隆单株地上空间拓展能力与拓展效益多样性研究

以自然高与匍匐茎长度作为横向、纵向空间拓展能力参数,以匍匐茎长与自然高度之比作为植物形态指数,以拓展的空间范围为拓展能力,以单位空间分蘖数作为拓展熵,以单位空间生物量作为拓展效益,对67份处于株型相对稳定的孕穗期的扁穗牛鞭草资源克隆单株空间拓展能力与拓展效益多样性进行了分析比较。结果表明:纵向参数的变异范围(10.67~103.00cm)、变异系数(54.39%)都大于横向参数(54.67~120.67cm、16.94%);植株形态指数变异范围为1.03~8.72,变异系数高达60.18%;拓展面积变异范围为0.72~5.53m2,变异系数为49.67%;拓展能力变异范围为0.16~5.58m3,变异系数高达104.17%;拓展熵变异系数达74.29%;拓展效益变异范围为0.38~3.16kg/m3,变异系数为50.34%。单株拓展能力与纵向拓展参数、横向拓展参数及拓展面积为正相关(相关系数分别为0.8908、0.6620、0.6749);拓展熵与拓展能力为负相关(r=-0.6255);拓展效益与拓展熵为正相关(r=0.8429),而与拓展能力为负相关(r=-0.5310)。在欧式距离15处67份材料可分为4类。扁穗牛鞭草种质资源空间拓展能力与拓展效益的多样性,为优异基因型的选择利用和优质品种的选育提供了丰富的资源基础。     

TES基因C端的分段克隆与表达

为了在大肠杆菌中分段表达人类TES基因C端3个顺次排列的LIM结构域,利用PCR技术从含有TES基因全长编码序列的质粒pCMV-HA-TES中扩增出这3个LIM domain基因片段,分别重组入pGEM-T载体,再经酶切后,将获得的目的片段亚克隆入原核表达载体pQE-N1进行融合表达。酶切鉴定及测序结果表明,扩增产物与已知基因序列一致,成功构建了3个目的片段的pQE-N1表达质粒;SDS-PAGE结果显示,IPTG诱导表达出与预期分子质量大小相同的3个融合蛋白。     

一种新的精子膜蛋白sp18基因的克隆及其在E.coli 中的表达

摘要：利用sp18 mAb筛选小鼠睾丸λgt11-cDNA表达文库,命名为sp18（GenBank登录号：AF129872）的阳性克隆由 1 468 bp组成,开放阅读框（open reading frame, ORF）长约429 bp,编码142个氨基酸。起始密码ATG位于第694 bp,终止密码位于第1 122 bp,polyA位于1 245~1 250 bp。核苷酸同源性分析表明,sp18 cDNA的10~651 bp与人视神经Hr44的532~ 1 173 bp、sp18 cDNA的10~816 bp、864~1 444 bp与牛视神经Hr44的1 408~2 208 bp、2 250~2 309 bp的cDNA序列有很高的同源性, 高达98%。推测sp18基因可能是生殖系统存在的一种新基因。sp18编码蛋白的理论分子量约为15.7 kD,有8个N-糖基化位点和12个O-糖基化位点,亲水性分析表明sp18多肽是一种精子跨膜蛋白,跨膜区位于第17~33氨基酸处。将sp18 cDNA亚克隆到原核表达载体pET-30a(+),在E. coli BL21（DE3）中得到诱导表达,其表观分子量约为16.5 kD,表达量约占菌体总蛋白的32%。Western blot分析表明sp18 mAb能识别重组的sp18膜蛋白,表明重组蛋白具有免疫原性,为进一步研究sp18基因的功能打下了基础。     

少动鞘氨醇单胞菌ZX4儿茶酚2,3-双加氧酶基因的克隆与序列分析

利用PCR扩增分离得到了少动鞘氨醇单胞菌(Sphingomonas paucimobotis)ZX4菌株的儿茶酚2，3-双加氧酶基因(c230-ZX4)。核苷酸序列测定与分析表明，该基因片段全长924bp且具有一个完整的阅读框，编码306个氨基酸残基。序列分析结果表明，该基因与已报道的来自菌株Sph.yanoitcuyae B1和Sphingomonas sp．KMG425的xylE基因(编码产物均为C23O)具有较高的核酸序列同源性，分别为94．37％和94．05％；与研究较多的Pseudomonas putida的TOL型质粒pWWO上的xylE基因同源性仅为57．79％。与其同源性较高的xylE基因编码的多肽氨基酸序列比较发现，c23O-ZX4编码产物的第86、92、113、125、126、182、185、186、216及218位的氨基酸残基均有所不同。     

刺梅嫩枝扦插育苗技术

使用全日照24h自动化间歇喷雾设备,采用半木质化刺梅嫩枝作插穗带叶扦插生根育苗的方法,具有生根速度快、育苗周期短、一年可生产多批及插穗来源丰富等优点,苗木成活率达97%。     

大青杨纤维素合酶PuCesA6全长基因的获得及分析

为给大青杨纤维素方面的基因改良提供基础,以大青杨叶片总DNA为模板,根据已登录的欧洲颤杨PtrCesA6序列保守区段设计2对引物进行PCR扩增,将得到的2个片段克隆到pMD18-T载体中.测序后拼接2片段,结果显示,该基因全长5 760 bp,与欧洲颤杨的PtrCesA6全长cDNA的相似性为99%,证明克隆的序列为纤...     

兔出血症病毒NJ85株衣壳蛋白基因在原核系统中的高效表达

从兔出血症病毒(Rabbit hemorrhagic disease virus，RHDV)中国早期流行株NJ85中成功地克隆出衣壳蛋白(VP60)基因。序列分析表明该基因长度为1740nt，编码579aa，与已报道的另2个RHDV中国毒株WX84和TP的VP60基因的同源性分别为92．7％和97．2％。构建了NJ85株VP60基因原核表达质粒pET—VP60，用SDS—PAGE分析，重组VP60蛋白的表达量占菌体总蛋白的40％，分子量约62kD，在菌体内以包涵体形式存在。免疫印迹实验表明，重组VP60蛋白与RHDV抗体反应形成1条带，证明它具有抗原性。     

无定形锰氧化物在氮素损失中的作用

Studies have been made,by ^15N-tracer technique on nitrogen loss resulting from adding amorphous manganese oxide to NH4^ -N medium under anaerobic conditions.The fact that the total nitrogen recovery was decreased and that ^15NO2,^15N2O,^15N^14NO,^15NO,^15N2 and ^15N^14N were emitted has proved that,like amorphous iron oxide,amorphous manganese oxide can also act as an electron acceptor in the oxidation of NH4^ -N under anaerobic conditions and give rise to nitrogen loss.This once again illustrates another mechanism by which the loss of ammonium nitrogen in paddy soils is brought about by amorphous iron and manganese oxides.The quantity of nitrogen loss by amorphous manganese oxide increased with an increase in the amount of amorphous manganese oxide added and lessened with time of its aging.The nitrogen loss resulting from amorphous manganese oxide was less than that from amorphous iron oxide.And the nitrogen loss resulting from amorphous manganese oxide was less than that from amorphous iron oxide.And the nitrogen loss by cooperation of amorphous manganese oxide and microorganisms (soil suspension) was larger than that by amorphous manganese oxide alone.In the system,nitrogen loss was associated with the specific surface ares and oxidation-reduction of amorphous manganese oxide.However,their quantitative relationship and the exact reaction processes of nitrogen loss induced by amorphous manganese oxide remain to be further studied.