稻瘟菌侵染诱导的水稻过氧羟基脂肪酸羟化环氧化酶的抗血清制备

 通过选择性抽提、盐析、阴阳离子交换柱层析等步骤从非亲和性稻瘟菌侵染的120g稻叶中获得了诱导性过氧羟基脂肪酸羟化环氧化酶(POG)的电泳纯蛋白250μg。利用这些纯化蛋白,制备了POG的抗血清。点免疫杂交结果表明,该抗血清效价大于1:5000,其抗原检测灵敏度可达0.05ng,并具有较好的特异性。蛋白印迹结果显示,稻瘟菌侵染可诱导POG在水稻细胞膜上的累积。     

猪链球菌35个血清型标准抗血清的制备及应用

用猪链球菌35个血清型的标准菌株免疫新西兰白兔制备标准抗血清,经试管凝集测定抗血清的效价均在1:32以上,吸附处理后抗血清具有良好的特异性和敏感性。对12株猪链球菌的试验结果表明:抗血清只与相同血清型的菌株出现凝集,可以区分出PCR方法无法区分的1型和14型以及2型和1/2型,并在国内首次鉴定出猪链球菌13型。     

大肠杆菌987P菌毛抗原的纯化和抗血清制备

<正>肠毒性大肠杆菌可以引起新生犊牛、羔羊和仔猪的急性腹泻,而细菌对小肠粘膜的粘附能力是致病的重要因素.987P抗原是引起仔猪腹泻而大肠杆菌最常见的吸附因子之一,它介导肠毒性大肠杆菌粘着到仔猪小肠粘膜刷状缘上,以促进细菌抵抗肠蠕动对细菌的清除作用和细菌在小肠的克隆化作用.我们于1987—1989年进行本试验,旨在通过硫酸铵沉淀、DOC缓冲液透析和凝胶过滤来获得免疫纯和电泳纯的987P抗原,以制备高纯度987P特异性抗血清.     

动物抗血清及其制备技术要点与应用进展

抗血清对于控制动物疫病具有很重要的作用。综述了动物抗血清的发展历程、产品技术现状、制备技术要点与最新研究应用进展以及面临的问题和解决方案等。     

羊、鸡抗鼠脂肪细胞膜抗血清对大鼠体脂与生长性能的影响

应用提取的鼠脂肪细胞膜分别免疫羊和鸡 ,所产生的抗血清用于 Wistar大鼠被动免疫。实验 1: 组腹腔注射羊正常血清 , 组腹腔注射羊抗鼠脂肪细胞膜抗血清 ,剂量均为 1m L /只 ,连续注射 4 d。结果表明 ,羊抗鼠脂肪细胞膜抗血清免疫促进了大鼠体增重 ,降低了体脂沉积 ,与对照组相比 ,7周末体重增加 6 .35 % (P<0 .0 5 ) ,饲料摄入增加6 .85 % (P<0 .0 1) ,料重比 (F/G)提高 4 5 .0 0 % (P<0 .0 5 ) ;肾周、附睾、网膜脂肪垫重量分别降低 2 3.92 % (P<0 .0 5 )、34.4 5 % (P<0 .0 5 )、0 .98% ,脂肪总量降低 2 0 .92 %。实验 2 :1组腹腔注射鸡正常血清 ,2组腹腔注射鸡抗鼠脂肪细胞膜抗血清 ,剂量均为 1m L/只 ,连续注射 4 d。结果表明 ,鸡抗鼠脂肪细胞膜抗血清免疫对大鼠的生长发育产生了不利影响 ,7周末 ,免疫大鼠平均体重较对照组减少 4 0 g(P<0 .0 5 ) ,饲料摄入显著降低 (P<0 .0 1) ;对体脂的沉积和血液中 TG和 FFA的影响没有规律 ,且无统计学意义     

鸡免疫球蛋白AFc(IgAFc)重链的分离纯化及其抗血清的制备

经硫酸铰盐析、柱色谱分离得到纯化的鸡胆汁免疫球蛋白A(IgA)。然后用木瓜蛋白酶水解IgA,再经DEAE_(52)—纤维素柱色谱纯化得到IgAFc重链。用IgAFc重链免疫家兔制得兔抗鸡IgAFc重链抗血清。     

牛重组型生长激素抗独特型抗体的产生与鉴定

利用纯化的兔抗牛生长激素抗体ＩｇＧ来免疫３只绵羊以制备抗独特型血清。间接ＥＬＩＳＡ法和琼脂糖双扩散法测定抗血清滴度分别达到或超过１：１２８０００和１：６４以上。之后用硫酸铵沉淀法和亲和层析法纯化抗独特型抗体。采用间接ＥＬＩＳＡ法来研究抗独特型抗体与第一抗体ＩｇＧ成分特异性结合及生长激素与第一抗体中ＩｇＧ结合的影响,结果显示出它不但能ＩｇＧ成分特异性结合。而且能与生长激素竞争性结合第一抗体ＩｇＧ成分     

甘薯潜隐病毒莲藕分离物辅助成分-蛋白酶基因原核表达及抗血清制备

根据已报道的甘薯潜隐病毒莲藕分离物sweet potato latent virus-lotus(SPLV-lotus)核苷酸序列设计引物,采用RT-PCR从感病莲藕样品中扩增获得SPLV-lotus辅助成分-蛋白酶基因(HC-Pro),大小为1 375 bp。通过序列测定和分析后,将其克隆到原核表达载体pGEX4T-1,转化大肠杆菌Rosetta(DE3),经IPTG诱导并纯化获得大小为74 kD的融合蛋白pGEX4T-1-HC-ProSPLV-lotus。SDS-PAGE结果显示,融合蛋白获得过量表达。以纯化蛋白为抗原免疫新西兰大白兔制备抗血清,采用ELISA和Western blot对抗血清效价和特异性进行检测,当HC-Pro抗血清稀释比为1∶256 000时,ELISA显色后OD450读数仍高于0.6,表明所制备抗血清合格;Western blot结果显示,在感染SPLV-lotus植株样品中仍能检测到单一目的条带。这些结果表明,制备的抗血清效价合格且可用于SPLV-lotus的特异性检测。     

用2种偶联比率偶联蛋白质制备猪抗克伦特罗血清的比较

将同窝断奶1周左右的仔猪分为2组，用偶联比率为1：14和1：18的2种BSA-CL偶联蛋白BSA14和BSA18分别免疫3次后，采用间接ELISA、间接抑制ELISA测定抗血清效价和血清阻断率。结果表明，虽然BSA18组血清的稀释度（1：20000）低于BSA14组血清的稀释度（1：40000），但血清阻断率明显高于BSA14组。提示以BSA为载体蛋白制备抗CL血清时，偶联比率在1：20左右较好。