番鸭细小病毒NS2原核表达载体的构建

根据已发表的番鸭细小病毒(MDPV)核苷酸序列设计并合成1对引物,对MDPV非结构蛋白NS2基因进行扩增。所获得的PCR产物与预期片段大小相符,约1.4 kb。将该片段直接与pMD18-T载体连接,转化入感受态大肠杆菌DH5α中增殖。在对所提质粒进行快速鉴定、PCR扩增及BamH I酶切线性化初步鉴定的基础上,经限制性内切酶BamH I和Sal I进行双酶切鉴定。将克隆产物pMD18-T-NS2与原核表达载体pET-32a分别用BamH I和SalI双酶切后,回收目的片段进行定向连接,并转化入感受态大肠杆菌DH5α中。对所获得的重组质粒分别经BamH I单酶切、BamH I和Sal I双酶切,证实含有目的基因,且基因插入方向正确,成功构建了含有MDPV NS2非结构蛋白基因的原核表达载体,为高效原核表达及研制更为有效的基因工程疫苗打下了基础。     

无疫小区的解释及应用

早在2003年世界动物卫生组织（OIE）就提出了无疫小区（compartmentalisation）作为动物疫病防控的一种新模式。笔者就无疫小区的概念和在中国如何建立和应用这种新模式作一解释。     

牛乳中分泌型IgA的合成机理及提高技术

分泌型IgA（sIgA）是介导黏膜免疫的主要免疫球蛋白,它的诸多理化特性保证了其黏膜免疫作用的发挥;牛奶中sIgA的合成与分泌是生物进化中黏膜免疫的附属产品,是为子代提供黏膜被动免疫的途径;作者综述了sIgA的功能及牛乳中sIgA的产生机理;并总结了通过免疫乳生产来提高乳中sIgA浓度的几种方法,为今后高滴度sIgA免疫乳生产提供一定的参考。     

抗水牛伊氏锥虫变异表面糖蛋白抗原单克隆抗体的研制

用纯化的伊氏锥虫变异表面糖蛋白（variant surface glucoprotein, VSG）免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,经过3次克隆和间接ELISA方法筛选,获得3D7、5B9 2株稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株,用间接ELISA方法检测杂交瘤细胞培养液上清效价和小鼠腹水效价,其中细胞培养上清效价分别为1∶6400和1∶12800,腹水效价分别为1∶105和1∶106。单抗的亚型鉴定结果表明,3D7、5B9分泌的抗体都为IgG1亚类κ链。     

秦川牛超数排卵效果的研究

本研究共超排秦川牛31头次，有效超排20头次，有效率为64.5％。头均获胚总数6.45枚，可用胚4.20枚。激素用量为300 mg/头时，头均获胚总数和头均可用胚数显著高于260和340 mg组（P<0.05）。冬春季的头均获胚总数（8.56）和头均可用胚数（6.00）显著高于夏秋季（4.73、2.73）（P<0.05）。对供体牛连续超排处理3次，间隔70 d，对超排效果无显著影响。     

斑点杂交法检测犬瘟热病毒

N蛋白是犬瘟热病毒核衣壳的主要构成成分,又是保守性较强的免疫原性蛋白。本研究对犬瘟热病毒N基因重组质粒酶切、凝胶回收目的DNA进行DIG标记制备探针,用此探针斑点杂交检测40只疑似犬瘟热患病犬鼻液和20只病死犬脾脏、肝脏、心脏、肺脏、肾脏、血液中的犬瘟热病毒。结果显示,40只疑似犬中,有33只是阳性,阳性率是82.5%,比胶体金诊断试纸阳性检出率高。而对病死犬的不同组织检测中,脾脏中病毒检出率最高,表明斑点杂交技术在犬瘟热病毒的早期诊断和流行病学调查中有很高的应用价值。     

基于温度—含氧量的全自动堆肥通风控制系统设

采用工业计算机和下位机的监测控制方式,开发了基于温度-含氧量的全自动堆肥通风控制系统,并实现了软硬件的配套设计。运行试验表明：采用该工艺堆肥,时间一般为2周,高温期（55～65℃）可维持9d以上,能有效杀灭病原微生物,产品稳定性好;可在整个堆肥过程中实现自动在线监控堆体温度、含氧量和湿度,运行稳定。     

内充气吹式油菜精量排种器气室流场仿真与试验

针对机械式排种器易发生堵塞造成漏播的问题,设计了一种内充气吹式油菜精量排种器。以ANSYS/CFX为工具建立气室流场仿真模型,以气室有无平衡出气孔为试验因素,对气室内气流场进行了仿真分析。仿真结果表明,有平衡气孔的气室压力波动比无平衡气孔小93 Pa。台架试验表明,无气吹作用、无平衡气孔气室气吹作用和有平衡气孔气室气吹作用3种状态下,漏播指数分别为14.4%、4.4%和2.4%,排种器的合格指数分别为66.8%、78.4%和82.0%,在气吹作用下排种器堵塞漏播问题得到明显改善。     

“增抗1号”在冬春茬厚皮甜瓜育苗上的应用效果研究

以厚皮甜瓜品种"潍科厚甜1号"为试材,在冬春茬日光温室内采用叶面喷施和浸种2种处理方法,研究了"增抗1号"低温弱光逆境调控合剂对厚皮甜瓜苗期低温逆境的调控效果。结果表明:"增抗1号"叶面喷施和浸种处理的甜瓜根系活力、功能叶片硝酸还原酶和谷氨酰胺合成酶活性较对照显著增加。根、叶功能的增强促进了植株生育,表现为2种方法处理的甜瓜植株下胚轴长度均较对照显著减小,单株叶面积减少,但厚度增加,同时"增抗1号"处理植株茎粗、干物质率、一级侧根条数和根冠比显著提高。因此,冬春茬甜瓜苗期施用"增抗1号"可以显著提高甜瓜的低温弱光抗性水平,有利于培育壮苗。2种施用方法比较结果表明,叶面喷施总体效果优于浸种处理,但浸种处理有利于促发侧根。     

半胱胺的动物营养研究进展

半胱胺(cysteamine,CS)作为一种新型的饲料添加剂,通过调节机体激素的变化,从而达到促进畜禽生长的目的,作者系统地综述了半胱胺的生理作用及其作用机理,并强调了其在动物生产中的应用以及在应用过程中应注意的问题。