茶多酚氧化酶的分离提纯及固定化技术

茶的多酚氧化酶(邻苯二酚:Ｏ2氧化还原酶,ＥＣ11031)是茶中一类重要末端氧化酶类,其无论在茶树生理代谢还是在茶叶加工中多酚类物质的氧化变化都起着重要作用。1　茶多酚氧化酶的分离提纯技术由于茶多酚氧化酶存在于叶绿体、线粒体等细胞器中,有的甚至与细胞膜上的蛋白相结合,以不溶状态存在,为了使其以可溶形式从完整细胞或组织结构中释放出来,并保持其活性和稳定性,通常要将茶鲜叶在一定介质中进行充分的细胞破碎,释放出细胞的内含物,经匀浆提取后可得粗酶制剂。为了减少对细胞活动的影响,需尽量去模拟细胞体内的环境,如适宜的ｐＨ(56),温…     

乙烯利对甘蔗茎内IAA氧化酶活性动态变化的影响

测定了甘品种桂粮１１号、桂糖１５号和新台糖１６号节间２的ＩＡＡ氧化酶活性的动态变化以及乙烯利处理后的酶活性变化。结果表明：在甘蔗工艺成熟过程中,茎内ＩＡＡ氧化酶酶活性的变化主要表现为先升后降的变化过程,品种间有差异。乙烯利处理对ＩＡＡ氧化酶活性有影响,其影响效应及影响时间因品种而有差异,主要表现为抑制ＩＡＡ氧化酶活性的早期上升过程,同时钝化ＩＡＡ氧化酶对外界环境的反应,酶活性变化对照波动性要小,影     

濒危植物缙云卫矛细胞色素氧化酶的同工酶变异

采用丙烯酰胺琼脂电泳技术,对重庆北碚缙云山麓特产缙云矛３个居群的３６个个体功能叶片细胞色素氧化酶的同工酶谱带进行了测定,并进行编码,然后采用Ｓｏｋａｌ－Ｓｎｅａｔｈ结合系数的组平均法（ＵＰＧＭＡ）和Ｓｏｋａｌ－Ｍｉｃｈｅｎｅｒ结合系数的加权平均法（ＷＰＧＭＡ）对各酶谱带进行聚类分析;同时结合遗传杂合度（Ｈｅ）、遗传相似性系数（Ｉ）、遗传距离（Ｄ）进行遗传分析。结果表明,来自同一居群的个体,不但同工     

难易生根桉树多酚氧化酶,吲哚乙酸氧化酶活性及其同工酶的比？…

尾叶桉的ＭＬＡ无性系（简称ＭＬＡ）是难生根无性系,尾叶桉的Ｕ６无性系（简称Ｕ６）,刚果１２号桉Ｗ５无性系（简称Ｗ５）为易生根无性系。ＭＡＬ各器官的多酚氧化酶（ＰＰＯ）活性比Ｕ６、Ｗ５的低,而ＭＬＡ各器官的吲哚乙酸氧化酶（ＩＡＡＯ）活性比Ｕ６、Ｗ５的高。各树种的ＰＰＯ活性、ＩＡＡＯ活性及ＰＰＯ同工酶均具有器官的特异性。讨论了ＰＰＯ和ＩＡＡＯ与不定根的发生和发展的关系。     

长春花感染黄龙病菌多酚氧化酶基因的表达及活性分析

【目的】分析长春花Catharanthus roseus受黄龙病菌Candidatus Liberibacter asiaticus侵染后多酚氧化酶(PPO)基因的表达及活性变化。【方法】根据不同作物多酚氧化酶基因PPO序列的相似性,筛选出长春花多酚氧化酶基因Pw PPO引物,PCR扩增得Pw PPO基因片段,运用qRT-PCR和生理生化方法分析长春花嫁接黄龙病芽后,不同时间长春花叶、主茎和根中Pw PPO基因的表达量和酶活性变化。【结果】长春花受黄龙病菌侵染后,叶、主茎和根中Pw PPO基因的表达分别在嫁接后30、35和40 d上调表达4.23、12.64和33.80倍,不同组织中Pw PPO基因上调表达的时间和幅度不同。染病长春花的叶、主茎和根中PPO活性分别在嫁接后30、35和45 d为对照的2.87、2.10和1.89倍。【结论】Pw PPO基因表达量与PPO活性成正比,与长春花抵抗黄龙病菌侵染的能力密切相关。     

镉诱导仔猪睾丸支持细胞氧化酶活性降低及DNA的损伤

以仔猪睾丸支持细胞为试验模型,采用二步酶消化法分离支持细胞进行培养。探讨了0、10、20、40、80μmol/L的氯化镉对支持细胞的毒性作用。结果表明:10μmol/L以上的氯化镉有抑制支持细胞生长的作用,并能使支持细胞氧化酶活性下降,造成支持细胞DNA的损伤。     

几种化学物质诱导草莓抗根腐病的初步研究

利用叶圆片法对水杨酸(SA)、草酸(OAA)、磷酸氢二钾(K2HPO4)和壳聚糖(CTS)4种化学物质诱导草莓抗根腐病(Pestalotiopsis photiniae(Thuem)Y.X.Chen)的作用进行了研究,并对其机理进行了初步探讨。结果显示,SA在0.5 mmol/L浓度下诱导抗病效果达91.9%,OAA在20 mmol/L浓度下诱导抗病效果达96.4%,K2HPO4和CTS在供试浓度范围内均无诱导抗病作用;4种化学物质中只有CTS有直接抑菌作用,对根腐病菌丝生长的抑制中浓度为1.983 mg/mL,其余3种均无直接抑菌作用;用SA和OAA诱导处理后,草莓叶片中多酚氧化酶(PPO)、过氧化物酶(POD)和苯丙氨酸解氨酶(PAL)的活性变化表明,0.5 mmol/L SA诱导处理草莓叶片POD活性至第1天达到最大值,比对照增加了252.3%,而PPO和PAL活性变化不大;20 mmol/L OAA诱导处理草莓叶片PAL活性至第4天达到最大值,比对照增加了37.8%,而PPO和POD的活性变化不明显。     

甘蓝多酚氧化酶的生物化学性质及其杀虫剂的诱导作用

采用时间动力学法,在研究了甘蓝多酚氧化酶的最适反应条件的基础上,对有机溶剂和杀虫剂对多酚氧化酶活性的影响进行了研究。结果表明:甘蓝多酚氧化酶反应的最适pH值为6.4,最适反应温度为55℃;丙酮和乙醇对多酚氧化酶活性有明显的激活作用;高效氯氰菊酯、灭多威和辛硫磷以及小菜蛾和桃蚜取食的胁迫会对多酚氧化酶的活性产生影响。     

水稻品种对褐飞虱代谢酶的影响

用水稻敏感品种TNl和具有不同抗性基因的品种Mudgo,ASD7和Rathu Heenati饲养稻褐飞虱(Nilaparvata lugens)，研究不同品种对褐飞虱体内酯酶、谷胱甘肽转移酶和多功能氧化酶氧—脱甲基活性的影响。结果表明，褐飞虱在3种抗性品种上饲养一代后，其酯酶活性与敏感品种上的试虫相比没有显差异。然而，取食Mudgo和ASD7的雌成虫之间酯酶活性达到显性差异；取食Mudgo和Ruthu Heenati的雄成虫酯酶的Km值分别为取食TNl的2．78和2．58倍。褐飞虱体内酯酶活性还因其生物型的不同而异。对褐飞虱生物型1和生物型2个酯酶活力分布的测定结果表明，生物型2的雌、雄成虫酯酶活性均显低于生物型1的。研究还表明，在ASD7与Rathu Heenati上饲养一代后，褐飞虱雌、雄成虫GST的活性显高于取食TNl和Mudgo的个体，但抗性品种对褐飞虱成虫的多功能氧化酶氧—脱甲基活性没有明显影响。因此，水稻品种对褐飞虱代谢酶的影响因品种的特性，代谢酶的类型，甚至褐飞虱的性别而异。中对其可能的机制进行了探讨。     

苯并（a）芘对双齿围沙蚕抗氧化酶活性和细胞色素P450基因表达的影响

在实验室条件下,利用诱导试验分析了不同浓度苯并（ a）芘[ B（ a） P]对双齿围沙蚕Perinereis aibuhit-ensis （体质量为1.5 g±0.5 g）细胞色素P450基因表达和肌肉组织抗氧化酶活性的影响。结果表明：双齿围沙蚕细胞色素P450基因表达与B（ a） P诱导浓度和诱导时间呈正相关,随着诱导浓度的增加和暴露时间的延长,表达量逐步上调;超氧化物歧化酶（ SOD）、过氧化氢酶（ CAT）和谷胱甘肽过氧化物酶（ GPx）活性均随B（ a） P诱导时间的延长而逐步升高,其中SOD酶活性随B（ a） P浓度的增加出现抑制, CAT和GPx酶活性则与B（ a） P浓度呈正相关。