巴西橡胶树叶片蛋白样品的制备及质谱初步分析

采用TCA-丙酮沉淀法并稍做改进提取巴西橡胶树叶片总蛋白,蛋白溶解后,用试剂盒对蛋白上清液进行纯化和浓度测定。十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS—PAGE）和双向凝胶电泳（2-DE）的结果均表明,所制得的蛋白样品质量较高,并且纯化过的蛋白样品2-DE（双向电泳）图谱效果更好（7cm,考染）。根据预实验结果,选用17cm IPG预制干胶条对纯化的蛋白样品进行2-DE实验,采用快速银染法进行染色,随机挖取银染胶上6个蛋白点进行MALDI-TOF MS分析和数据库检索,鉴定了3个蛋白,它们是：1-氨基环丙烷-1羧酸合酶2,核酮糖-1,5-二磷酸羧化酶／加氧酶大亚基和F1104．2。本实验为进一步对巴西橡胶树叶片中具有重要生物学功能蛋白的筛选和鉴定打下了方法学基础。     

由Cu(Ⅱ)促进的肌红蛋白选择性水解切割反应

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,研究了中性条件下[CuL(Cl)](C lO4)与马心肌红蛋白的选择性水解切割反应,L为2-[二(2-氨乙酸)氨基]乙醇.结果表明,[CuL(Cl)](ClO4)对马心肌红蛋白显示出较高的切割选择性和切割效率,且切割效率与浓度、介质条件、温度、温育时间有一定的相关性.     

浅谈种子纯度聚丙烯酰胺凝胶电泳测定技术

电泳是指荷电的胶体颗粒在电场中的移动。1809年,一位俄国物理学家进行了世界上第一次电泳实验,这个早期实验为电泳理论和技术的发展及其应用奠定了基础。     

PAGE凝胶制备方法和银染方法的改进

PAGE凝胶分析技术已广泛运用于小分子量PCR产物的分离,但因操作环节多、耗时长,不利于大规模分子标记分析工作的开展.对PAGE凝胶的制备和银染方法作些改进,省去常规凝胶制备中亲和硅烷/剥离硅烷处理过程,以及常规银染过程中的固定和定影两步骤.与常规方法相比,该方法操作简便、耗时短、带谱的分辨率高,可代替常规方法用于SSR等标记的PCR产物的分离.     

农田非结构特征视觉导航研

研究了农田非结构环境下,通过机器视觉提取导航线的处理算法.首先,根据农作物的特点提出了使用聚类的方法检测作业区域终点;其次,为避免噪声干扰,利用移动窗口检测二值图像白色像素的个数,确定导航路径区域;最后,使用改进的Hough变换提取导航线.实验表明,该算法可以准确提取绿色植物的行信息,处理一帧分辨率为320×240像素的彩色图像平均需要57.404ms,正确识别率达99%.     

暴露于异丙隆中文蛤差异表达基因的研究

为了研究文蛤经异丙隆处理后引起的细胞基因表达变化,探索文蛤暴露于农药后分子水平上基因的开放、关闭或表达量的改变,以寻找和发现有价值的指示农药污染的生物标记物基因.在恒定温度(25℃)条件下驯化文蛤7 d,将驯化后的文蛤分为2组(每组20个),给药组文蛤暴露于添加除草剂异丙隆的海水中处理30 d,对照组文蛤暴露于天然海水中处理30 d,用酸性酚-硫酸氰胍-氯仿提取法纯化文蛤鳃总RNA,用4种锚定引物,以总RNA为模板在反转录酶的作用下合成cDNA第一链,以cDNA第一链为模板,在锚定引物和随机引物的作用下连续进行2轮PCR反应,用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分离PCR产物,银染法显色.对聚丙烯酰胺凝胶电泳显示的差异条带进行回收,并对差异基因片段进行第2次扩增,经琼脂糖电泳后回收基因片段.结果共得到cDNA扩增片段约400条,其中有60余种基因片段的表达发生了明显的差异.在文蛤适应除草剂污染过程中有12个基因表达上调,有11个基因表达下调,有22个基因片段只在试验组表达,有23个基因片段只在对照组表达.基因差异片段可能与指示农药污染的生物标记基因的表达有关.     

近红外光谱法鉴别6种根茎类中药材

为建立山豆根、百两金、千斤拔、北豆根、滇豆根、云南豇豆等6种易混淆根茎类中药材的快速鉴别方法,利用近红外漫反射光谱分别采集其在900~1 700 nm内的光谱信息,结合主成分分析、系统聚类分析、K近邻法、线性判别分析建立定性判别模型。结果显示,6种药材在主成分分析及系统聚类分析中表现出了明显的分类聚集特征,K近邻法和线性判别分析对46个药材盲样的鉴别准确率分别达到了93.48%和95.65%。结果表明,近红外漫反射光谱结合模式识别方法可用于根茎类中药材的定性鉴别。     

聚蔗糖水凝胶的制备及其在药物控制释放中的应用

[目的]研究聚蔗糖水凝胶的制备工艺,并考察制备工艺对溶胀度和牛血清蛋白（BSA）释放性能的影响。[方法]以环氧氯丙烷为交联剂,在碱性条件下制备聚蔗糖水凝胶,用BSA作为模型药物考察其释放性能。[结果]当聚蔗糖溶液浓度为16.7 g/L,交联剂用量为0.85 mol/L,反应温度为45℃,反应时间为5 h时,制得的聚蔗糖水凝胶弹性和硬度较好,其溶胀度在5.5～7.5。聚蔗糖水凝胶对BSA的释放性能表明,聚蔗糖水凝胶的交联程度决定BSA的释放速率,适当增加聚蔗糖水凝胶的交联程度有利于药物的缓慢释放。[结论]可以通过调控聚蔗糖水凝胶的溶胀度调节包埋在此水凝胶中BSA的释放速率。     

凝胶电泳法(SDS-PAGE)测定乳与乳制品中β-乳球蛋白的含量

建立一种快速、准确测定乳与乳制品中β-乳球蛋白含量的SDS-PAGE方法.β-乳球蛋白标准溶液在0.238-7.128 mg/L范围内呈线性相关(r=0.99),具有良好的重复性(RSD＜10%).液态奶及奶粉的检出限分别为24 mg/100mL、240 mg/100g.通过对β-乳球蛋白的重复性和灵敏度实验,表明SDS-PAGE方法具有操作简单、准确可靠的特点,适用于乳与乳制品中β-乳球蛋白含量的测定.     

温度和金属离子对干扰素诱导剂-聚肌胞配对的影响

为提高聚肌胞（Polyinosinic-polycytidylic acid,polyI：C）的配对效果,本文研究了温度和金属离子对聚肌胞配对的影响。实验结果显示,在45℃条件下合成的聚肌胞减色效应最强,说明在该温度下聚肌苷酸（Polyinosinic acid,PI）和聚胞苷酸（Polycytidylic acid,PC）配对最紧密;Na^＋、Ca^2＋、Mg^2＋、Mn^2＋和Zn^2＋能够增强聚肌胞双链结构的紧密性,当Na^＋浓度增加到0．085mol／L后,聚肌胞的配对接近饱和;Ca^2＋、Mg^2＋、Mn^2＋和Zn^2＋对聚肌胞结构的保护效果基本一致,而Cu^2＋对聚肌胞结构具有明显破坏作用。建议采用45℃合成聚肌胞并添加适当浓度的Na^＋和Ca^2＋等增强其结构的紧密性,以避免机体内高活性RNA酶的降解而失去药效。