野桑蚕、家蚕海藻糖酶基因5''侧翼区的克隆与序列分析

海藻糖是一种双糖,广泛存在于包括细菌、酵母、植物和无脊椎动物在内的生物体内,主要功能是储备生物代谢所需的能源.在昆虫血液中,海藻糖是一种最重要的糖类,具有供给能量和提供合成生物大分子的底物等功能.其功能主要是通过海藻糖酶(Trehalase)的作用来实现的.家蚕海藻糖酶有可溶型和膜固定型两种类型,可溶型主要存在于蛹期中肠,而膜固定型存在于包括卵巢在内的多种组织.这两种类型酶是由同一个基因表达而形成不同的成熟海藻糖酶.海藻糖酶膜固定型存在于向血液面的卵巢膜内,该基因的表达是由滞育激素诱导调控.卵母细胞通过位于膜内的海藻糖酶,将血液中海藻糖降解成葡萄糖,然后吸收到胞内,最后合成糖原,从而导致蚕卵的滞育.从而海藻糖酶基因是从分子水平来解明家蚕滞育机理的一个重要途径.本实验从野桑蚕、家蚕苏@菊×明@虎基因组中分别克隆了野桑蚕和家蚕的海藻糖酶基因的5′侧翼区片段并进行了测序分析,以供进一步的启动子功能研究,现报道如下.     

T7 RNA多聚酶基因的克隆、序列测定及其在E.coli中的表达

从BL21(DE3)E．coli菌株中以PCR的方法扩增得到了与T7RNA多聚酶(T7RNApolymerase，T7pol)基因大小一致的DNA片断。将PCR产物纯化后直接克隆到pGEM—T载体中，经酶切鉴定和DNA序列分析表明克隆得到了正确的T7pol基因。将T7pol基因亚克隆入pET-28b( )中，构建得到原核表达质粒pET28T7。该质粒的BL21(DE3)pLysS转化菌在IPTG的诱导下可表达约98800的蛋白，这与T7pol的相对分子质量一致。将该质粒转化DH5α、JMl09、HBl01、BL21(DE3)和BL21(DE3)pLysS等5种不同的宿主菌，仅有转化T7pol酶活性受到抑制的宿主菌BL21(DE3)pLysS才能得到转化子，而其余4种T7T7pol酶活性不受抑制的E．coli宿主菌不能得到转化子。pET28T7原核表达质粒这种仅能在T7pol酶活性受到抑制的宿主菌中才能存活的现象说明本试验所克隆的T7pol基因能正确表达出具有RNA转录酶活性的蛋白。     

绵羊梅迪-维斯纳病的病理学诊断

20 0 3年 7月 ,某养羊户饲养的绵羊发生一种慢性疾病 ,以不表现发热症状 ,潜伏期极长 ,进行性、间质性肺炎或脑脊髓炎 ,病程长 ,进行性消瘦和呼吸困难 ,最终导致死亡为特征。根据发病情况、临床症状和病理学检查 ,确诊为绵羊梅迪 -维斯纳病。现将诊治情况报道如下。1　材料与方法1.1　病料来源养羊户送检的 3只濒死期绵羊 ,放血屠宰 ,进行病理学剖检及病理组织学检查。1.2　病理诊断方法眼观检查法 :通过病理剖检 ,眼观检查绵羊的肺、淋巴结、脑等器官的变化。组织学检查法 :取病羊的肺、淋巴结、乳腺、关节、脑等组织 ,用 10 %福尔马林固定…     

半胱胺不同添加方式对生长肥育猪胴体品质的影响

在生长期和肥育期的猪基础日粮中分别添加360mg／kg和450mg／kg半胱胺(CS)(试验I组每6d添加1d，5d间隔期喂基础日粮)或分别添加60mg／kg和75mg／kgCS(试验Ⅱ组)，研究CS不同添加方式对生长肥育猪酮体品质的影响。屠宰试验表明：胴体瘦肉率试验I组和试验Ⅱ组比对照组分别提高5．24％(P＜0．05)和4．63％(P＜0．05)，胴体脂肪率试验I组和试验Ⅱ组比对照组分别降低9．52％和8．53％(P＜0．05)。肉质测试表明，CS对背最长肌肉质无明显影响。经包被处理的CS间断性添加和持续添加对朋体性状和肉质均无显著性差异。试验I组和试验Ⅱ组的皮下激素敏感脂酶和血清中生长激素含量分别比对照组提高41．38(P＜0．05)、31．11(P＜0．05)和38．23(P＜0．05)、24．44％(P＜0．05)。     

柔嫩艾美耳球虫感染鸡盲肠和脾脏一氧化氮合酶的表达

采用NADPH—d(nicotinamide adenine dinucleotide phosphate—diaphroase)组织化学法观察了雏鸡感染柔嫩艾美耳珠虫(E．tenella)后一氧化氮合酶(N0S)在盲肠和脾脏中的分布与表达情况。试验结果表明，所有正常鸡盲肠粘膜下层和肌层均有较深的着色，根据以往的资料和N0S的表达特性初步判断为神经元型N0S(nNOS)；试验鸡在感染后3～5d，盲肠粘膜上皮和肠腺上皮也有较深的着色，并从感染后7d开始着色减弱；而对照组鸡盲肠粘膜上皮和肠腺上皮以及对照组和试验组的脾脏几乎不着色或着色很浅。试验结果提示，盲肠粘膜上皮和肠腺上皮的着色可能是诱导型N0S(iN0S)表达的结果，而由其产生的N0参与雏鸡球虫感染过程。     

双T-DNA表达载体转化大豆的研究

利用含有筛选标记基因和目的基因△6-脂肪酸脱氢酶基因的双T-DNA共转化表达载体pLIN61,经农杆菌EHA101介导,采用子叶节转化法转化大豆,使用除草剂Glufosinate作为筛选剂,获得了一批携带有玻璃苣△6-脂肪酸脱氢酶基因的转基因大豆,转化效率为2.0%,共转化频率及实际转化率分别为56.25%、1.12%.PCR检测和Southern杂交结果证明,玻璃苣D6D已经整合到大豆的基因组上.RT-PCR检测结果显示,玻璃苣△6-脂肪酸脱氢酶基因在转基因大豆的转录水平上得到了表达.     

英国开发出富含β-胡萝卜素的转基因稻米

英国科学家新开发出一种富含β-胡萝卜素的转基因稻米。研究人员认为，这种稻米有助于改善发展中国家儿童维生素A缺乏和因此导致的失明等情况。     

Physiological Indices and Selection of Methods on Rapid Identification for Sweet Potato Drought Resistance

The relationships between the changes of relative water content （RWC）, malondialdehyde （MDA） contents, superoxide dismutase （SOD） activity and free proline contents in sweet potato leaves, and drought resistant ability under different concentration of polyethylene glycol （PEG） treatment applied at rhizosphere of sweet potato seedlings were studied. A highly positive correlation between RWC and drought resistance （r =0.783, P〈0.01）, a highly negative correlation between MDA contents and drought resistance （r = -0.848, P〈0.01）, a highly positive correlation between SOD activity and drought resistance （r = 0.777, P〈0.01） was observed. Free proline contents in leaves was not related obviously to the sweet potato drought resistance under 25% PEG treatment. The stronger the drought resistance of variety, the less decrease of RWC and increase of MDA contents, the more increase of SOD activity. By determining these physiological indices in sweet potato leaves under 25% PEG treatment, rapid identification of drought resistant ability of different varieties can be obtained in the lab.     

6-BA诱导的过氧化氢酶及其在提高水稻抗寒力中的作用研究

6-BA可以显著提高水稻抗寒性。为了进一步明确6-BA诱导水稻抗寒机制,对6-BA及低温 诱导水稻的过氧化氢酶进行了研究。研究表明,过氧化氢酶可受6-BA诱导,并且在提高水稻抗寒力 中可能起重要作用。     

镶块连续烧坏的原因

一台铁牛-55型拖拉机连续烧坏燃烧室镶块,出现了不易启动、功率不足、冒黑烟等现象。经过检查,机手确认喷油泵供油时间正确,喷油器雾化良好,但喷油泵供油顺序不对,顺序为“1-2-4-3”(正确的供油顺序应为“1-31-4-2”)。原来,此车在出现烧镶块