Ge－132对母子代鸡体自由基代谢的影响Ⅰ．Ge－132对鸡体血液及某些组织器官自由基代谢的影响

应用电子顺磁共振技术（ＥＳＲ）研究了Ｇｅ－１３２对蛋鸡血液和肝、肾、脾、心组织自由基含量的影响。将１５０只３５周龄海兰蛋鸡随机分为５组（每组３０只），Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组分别于基础日粮中添加Ｇｅ－１３２５０、１００、１５０、２００ｍｇ／ｋｇ，Ⅴ组为对照，连续饲喂２５ｄ。试验结果：（１）Ⅰ～Ⅳ组鸡血锗含量比对照组均显著增多（Ｐ＜０．０１），且组间未见明显的、有规律的剂量依赖关系，试验第１０ｄ与第２０ｄ血锗含量差异不显著；（２）血液与肝、肾、脾、心组织的自由基含量，试验Ⅰ～Ⅳ组与对照组相比均显著降低（Ｐ＜０．０１），且Ⅰ～Ⅳ组间未见明显的剂量依赖性差异，试验第１０ｄ与第２０ｄ差异亦不显著；（３）血锗含量与血液自由基之间呈显著的负相关（相关系数０．７３６），而血液自由基与肝、肾、脾及心肌自由基之间，则呈良好的正相关（相关系数分别为：０．８７４，０．６４２，０．８４９，０．８０７）。从而证实，适量的Ｇｅ－１３２能有效地清除鸡体血液及各种组织中的自由基。     

Ge—132在蛋鸡体内的药代动力学

给24只蛋鸡单剂量灌服Ge-132,分别于0.25～12小时采集血液、肝脏、肾脏、脾脏、卵巢和卵子,用石墨炉原子吸收分光光度法测定样品锗含量,进行药时曲线拟合和动力学参数分析。结果表明,血液中锗有2只鸡符合一级吸收单室开放模型,药代动力学参数为T_(1/2ka)0.2562±0.0302h,T_(1/2k) 3.9657±0.7075h,Tp1.1556±0.1332h,Cmax 2.1621±0.4165uσ/ml,AUC10.6164±0.1748mg/L.o;另4只鸡符合一级吸收双室开放模型,参数为T_(1/2k) 0.3996±0.2606h,T_(1/2α) 0.8513±0.1626h,T_(1/2β)4.7368±0.3652h,Tp1.0116±0.4574h,Cmax 2.6134±0.4574μg/ml,AUC13.3926±3.4651mg/Lh,在各种组织器官中均呈现一级吸收单室开放模型,其消除速率以脾脏最快,依次为脾>肝>肾>卵巢>卵子,表明了蛋鸡体内的Ge-132代谢在个体和不同器官隔室间存在很大差异。     

牛疙瘩皮肤病病毒ORF132基因的克隆及其原核表达

为原核表达牛疙瘩皮肤病病毒(LDSV) ORF132并对该基因进行生物信息学分析,本研究采用PCR扩增LSDV的ORF132基因,将其亚克隆至pGEX-6p-1载体中,构建重组质粒pGEX-LSDV-ORF132.生物信息学分析表明,LSDV的ORF132与Neethling vaccine LW1959株LW132、NI-2490株LSDV132和NW-LW株LD132的相应推导氨基酸同源性分别为100％、100％和94.4％,与山羊痘病毒、绵羊痘病毒相应推导氨基酸的同源性为20.7 ％～36％.SDS-PAGE和western blot分析表明,pGEX-LSDV-ORF 132在大肠杆菌BL21中经IPTG诱导主要以包涵体形式存在,其重组蛋白大小约为48.95ku,并且与特异性抗体具有抗原反应活性.     

鸡呼吸道传染病基因芯片诊断方法的建立

随着养禽业集约化程度的不断提高,鸡呼吸系统疾病的发生呈逐年上升趋势.而且大多数的呼吸道疾病不是单一病原感染,而是多种病原混合感染,从临床上难以及时鉴别诊断,延误防治时机,从而给养禽业造成巨大的经济损失.因此,禽呼吸道疾病已经成为生产和研究中的一类重要疾病.目前,禽呼吸系统疾病的诊断方法主要有病毒分离、血凝（HA）、血凝抑制（HI）、琼脂扩散、ELISA、PCR等,但是传统的检测方法灵敏度较低,而且当病原发生变异或感染禽处在潜伏期时会造成误诊.PCR方法每次只能检测一种病毒,费时费力.采用基因芯片的方法可以快速、准确地同步检测多种病原体,且需要样品量少、灵敏、特异、快速、费用低廉,将生物芯片技术用于禽呼吸道疾病诊断意义重大.     

几种动物病原菌对替米考星耐药性的体外诱导

在测定替米考星对鸡毒支原体、多杀巴氏杆菌和猪胸膜肺炎放线杆菌的最小抑菌浓度基础上,采用药物浓度递增法体外诱导3种病原菌对替米考星的耐药性。结果鸡毒支原体经9次传代对替米考星产生了高水平耐药,多杀巴氏杆菌经7~9次传代对替米考星产生了高水平耐药,猪胸膜肺炎放线杆菌经14次传代对替米考星的耐受浓度未发生明显变化;鸡毒支原体和多杀巴氏杆菌替米考星诱导耐药株对红霉素、阿奇霉素、泰乐菌素、吉他霉素和林可霉素表现交叉耐药。研究结果提示,替米考星较易诱导鸡毒支原体和多杀巴氏杆菌产生耐药性,兽医临床应合理应用。     

锗─132对鸡马立克氏病肿瘤病变的抑制效果及其作用机理的研究Ⅰ．锗─132对健康及人工感染MDV雏鸡抗氧化功能的影响

选用１日龄肉用雏鸡３００只，随机分为４组：Ｉ组为健康对照；Ⅱ、Ⅲ组喂１００ｐｐｍ锗─１３２（Ｇｅ－１３２）；Ⅲ、Ⅳ组人工感染马立克氏病病毒（ＭＤＶ）。经６０ｄ临床观察并每隔１０ｄ用电子自旋共振波谱（ＥＳＲ）法测定胸腺、法氏囊及脾组织中自由基含量，同时检测全血ＧＳＨ－Ｐｘ、血清ＳＯＤ活性及血清丙二醛含量。结果，健康雏鸡全血ＧＳＨ－ｐｘ活性均值为７．９３８７±１．２３７８Ｕ／ｍＬ血清ＳＯＤ活性为８０．４６４３±１．０９８７ｎＵ／ｍＬ血清丙二醛含量为２．９９７８±０１７６０ｎｍｏｌ／ｍＬ；健康雏鸡胸腺、法氏囊及脾组织中自由基平均含量分别为：０．２７±０．０４、０．３４±０．０８、０．２８±０．０６相对浓度（×１０１０ｓｐｉｎｓ／ｇ湿重）。通过与健康对照组比较，人工感染ＭＤＶ雏鸡全血ＧＳＨ－ｐｘ和血清ＳＯＤ活性明显降低，而上述各组织中自由基和血清丙二醛含量则显著增多。Ⅲ、Ⅳ两组对比结果表明：Ⅲ组的全血ＧＳＨ－ｐｘ和血清ＳＯＤ活性高于Ⅳ组，组织中自由基和血清丙二醛含量却低于Ⅳ组，从而证实Ｇｅ－１３２能增强人工感染ＭＤＶ雏鸡的抗氧化功能。     

禽副粘病毒2型(PMV-2)致病性的研究

7日龄SPF鸡经滴鼻、点眼感染PMV-2，可引起轻微的呼吸道症状，病理组织学观察可见气管粘液分泌亢进和少量的淋巴细胞浸润。PMV-2与传染性支气管炎（IBV）或鸡毒支原体（MG）协同感染比单纯感染这三种病原的任何一种均呈现更严重的呼吸道症状，病理组织变化呈气管纤毛部分或全部脱落，气管粘膜上皮细胞不同程度的变性、脱落。固有层和粘膜下层严重水肿，有大量淋巴细胞、巨噬细胞和异嗜细胞浸润。SPF雏鸡感染PMV-2后的不同时间检查病毒在鸡体内的分布规律，结果表明，PMV-2在法氏囊中大量分布；气管、肺、胸腺中有较多病毒；大脑、脾和肾脏只有少量病毒存在。上述实验结果揭示PMV-2感染SPF雏鸡致病性较弱，PMV-2在鸡呼吸道综合征中起一定作用。     

两步PCR法检测鸡新城疫疫苗中鸡毒支原体污染的研究

本试验以Genbank中登录的鸡毒支原体的16s rRNA基因序列为标准,根据前人设计的两套引物(外引物和内引物)对鸡毒支原体DNA进行两次PCR扩增,建立两次PCR扩增体系和条件。最后,用此体系和条件对从市场上随机购买的17支鸡新城疫La Sota系活疫苗样品和13支鸡新城疫Ⅰ系活疫苗样品进行检测。结果显示,运用建立的两次PCR扩增体系和条件可以从疫苗样品中检测到支原体的污染,外引物的检出率为23.3%(7/30),内引物的检出率为10%(3/30)。     

Defense response of tomato fruit at different maturity stages to salicylic acid and ethephon

In order to elucidate whether fruit maturity stage influence the induced resistance of exogenous elicitors in tomato and the involved mechanisms, we investigated the defense responses of tomato fruits against Botrytis cinerea, ethylene production and internal quality following treatments of fruit with salicylic acid (SA) or ethephon (ET) at mature green (MG) and breaker (BR). SA significantly suppressed decay and disease incidence in tomato fruits at both MG and BR stages, along with higher expression level of PR1 gene after 2 days of treatment. All fruits treated by SA had lower contents of ethylene and lycopene. The ET-treated fruit at both maturity stages showed lower disease incidence and higher level of PR2 and PR3 expression compared with the control fruit. ET treatment significantly enhanced ethylene and lycopene contents, and accelerated fruit ripening. Our results suggest that SA and ET induced disease resistance in fruits by mediating the expression of different pathogenesis-related genes and have different effects on fruit ripening, which in turn influences the disease resistance of tomato fruits.     

吉育系列大豆品种生育期组的划分研究

为明确吉育系列大豆品种的生育期组(maturity group,MG)归属,促进不同区域间的科学引种,以15份美国大豆生育期组标准品种为对照,采用以对照品种的生育日数为参照标准和以品种的活动积温为划分标准两种方法,于2013和2014年对95份新近选育的吉育系列大豆品种进行了生育期组划分研究。结果表明:吉育系列品种生育期组介于MG0~MGⅢ组之间,居MGⅡ组的品种最多,MGⅢ组的品种最少。有89份参试材料按两种划分方法结果一致,占参试材料的93.7%;有6份参试材料的两种划分方法结果不在同一组内,占参试材料的6.3%。通过比较各生育期组品种在R1、R7和R8期的持续天数表现,验证了生育期组划分的正确性。综合两年试验结果发现,适宜吉林省大面积种植的早熟、中早熟大豆品种主要归属于MG0和MGⅠ组,中熟、中晚熟品种主要归属于MGⅡ。此研究结果为完善中国大豆生育期组划分系统和实现大豆品种布局的科学化与标准化提供了技术依据。