重组大肠杆菌E.coli P84A/MC1061发酵生产卤醇脱卤酶的研究

用基因工程大肠杆菌E.coliP84A/MC1061生产卤醇脱卤酶,此后,进一步进行了酵母浸出物FM888与酵母蛋白胨FP101的联合调控作用研究。结果表明,用高溶解度酵母浸出物FM888替代原配方中的牛骨蛋白胨,可使E.coliP84A/MC1061生长速率增大,发酵稳定期的菌体浓度保持在较高水平,酶活提高了约2.4倍。当补料培养基中的FM888与酵母蛋白胨FP101的比例为7∶3时,菌体浓度保持在较高水平(OD600≥120),酶活进一步提高约50%,大大提高了单罐产率。此研究可为其他酶制剂的发酵生产提供借鉴。     

产香真菌ZY-2菌株鉴定及其挥发性物质抑菌活性测定与组分分析

[目的]鉴定产香真菌ZY-2,测定、分析其挥发性物质的抑菌活性及挥发性物质组分,筛选产有益挥发物质菌株.[方法]通过18S rDNA序列分析对产香真菌ZY-2进行分子生物学鉴定;以5种植物病原真菌为目标菌,测定ZY-2菌株挥发性物质的抑菌活性,并采用气质联用仪（GC-MS）对挥发性物质组分进行分析.[结果]产香真菌ZY-2在PDA培养基上不产孢,18S rDNA序列分析将该菌鉴定为蒙塔涅梨孢假壳（Apiospora montagnei Sacc.）;ZY-2挥发性物质对5种植物病原真菌均有一定的抑制作用,随着处理时间延长抑制率有一定变化;挥发性物质的主要成分为苯乙醇,其相对含量为98.982％.[结论]产香真菌ZY-2的苯乙醇相对含量高,有作为生物生产苯乙醇的开发潜力.     

不同毒力传染性法氏囊病病毒衣壳蛋白酵母双杂交诱饵载体的构建及鉴定简

传染性法氏囊病病毒（infectious bursal disease virus,IBDV）毒株Gx（超强毒株）、F9（中等毒力毒株）、Gt（弱毒株）遗传背景高度相似,但生物学性状差异显著。为研究不同毒力毒株与宿主细胞相互作用的分子细节,本研究将IBDV Gx、F9、Gt毒株的衣壳蛋白VP2基因克隆入pGBKT7载体,分别构建了诱饵载体pGBGxVP2、pGBF9VP2和pGBGtVP2。经Matchmaker Gold Yeast Two-hybrid System验证,结果显示所构建的3个诱饵载体均无自激活作用,对酵母细胞无毒性作用。本研究为利用酵母双杂交系统深入研究IBDV与宿主相互作用奠定了基础。     

黑丝羽乌骨鸡的选育进展与冠型效应

通过对黑丝羽乌骨鸡的复冠父系和单冠母系进行家系选育五个世代，在体重、孵化性能、开产性状及产蛋量方面得到了明显进展，而且可见单冠在这些性状上的正向效应。尤其是产蛋性能上的选育进展非常明显，高峰4个月的总产蛋量增加了1．2倍，母系300d产蛋量达到102枚左右，母系500d产蛋量达到201枚。     

伪狂犬病病毒鄂A株TK基因的克隆及其鉴定

合成了 １ 对能对伪狂犬病病毒（ Ｐｓｅｕｄｏｒａｂｉｅｓ ｖｉｒｕｓ, Ｐ Ｒ Ｖ） Ｔ Ｋ（ｔｈｙｍ ｉｄｉｎｅ ｋｉｎａｓｅ）基因＋ １１９～＋ １ ０７１区进行特异扩增的引物,用猪 Ｐ Ｒ Ｖ 鄂 Ａ 株细胞培养物提取的基因组作模板,扩增出 ９５３ ｂｐ 长的片段,用地高辛标记该片段作探针,通过 Ｓｏｕｔｈ ｅｒｎ 杂交,从克隆有 Ｐ Ｒ Ｖ 鄂 Ａ 株的 Ｂａｍ Ｈ Ｉ片段的重组质粒中钓出含 Ｔ Ｋ 基因的重组质粒 ｐ Ｓ Ｔ Ｋ。对 ｐ Ｓ Ｔ Ｋ 进行酶切分析,绘制了含 Ｔ Ｋ 基因的 Ｂａｍ Ｈ Ｉ片段的图谱,通过测序得出了 Ｔ Ｋ 基因的全序列。将该序列与 Ｐ Ｒ Ｖ Ｎ Ｉ Ａ３ 株 Ｔ Ｋ 基因进行比较,发现鄂 Ａ 株的 Ｔ Ｋ 基因存在变异。     

苏云金芽孢杆菌YJ-2000菌株对家蚕安全性和杀虫活性的评价

应用时间-剂量-死亡率模型就苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)YJ-2000菌株对6种鳞翅目昆虫的杀虫活性作了初步评价。该菌株对家蚕基本无毒性,而对蔬菜害虫小菜蛾、菜粉蝶,水稻害虫三化螟、二化螟,桑树害虫桑螟幼虫均有不同程度的毒性,其中对小菜蛾和菜粉蝶的毒性最强;幼虫死亡率可高达100％。该菌株是对家蚕安全而对其它鳞翅目害虫具杀虫活性的特异性菌株,有望用于养蚕地区桑园及其邻近作物的鳞翅目害虫防治。     

猪布鲁菌S2omp10基因缺失株的构建及特性

现有的布鲁菌减毒活疫苗存在一定毒力,且野强毒株和减毒活疫苗株间缺少可供鉴别的抗原,导致在血清学检测上自然感染与疫苗接种很难区分,限制了现有的减毒活疫苗的广泛应用.本文拟对布鲁菌的减毒活疫苗株S2进行遗传改造,克服上述缺陷.本研究利用同源重组的方法,得到了布鲁菌S2株omp10基因缺失株.分别用基因缺失株和疫苗株感染小鼠,比较基因缺失株小鼠体内的存活能力.结果成功构建了布鲁菌S2株omp10基因缺失株,动物试验结果表明,基因缺失株仍能在小鼠体内存活,具备作为减毒活疫苗的特性.与原始S2株比较,基因缺失株的感染力进一步减弱.表明omp10基因在布鲁菌的毒力及体内生存方面发挥了作用,为基因标记疫苗的研制奠定了基础.     

酵母培养物对雏鸡生长性能、免疫器官发育和血清相关激素的影响

选用7日龄海兰褐蛋用公雏鸡180只,随机分成3组(对照组,试验Ⅰ组、试验Ⅱ组),每组设3个重复,每重复20只雏鸡。对照组饲喂基础日粮,试验Ⅰ、Ⅱ组在基础日粮中分别添加2.5%和5%的酵母培养物,试验期6周,研究酵母培养物对雏鸡生长性能、免疫器官发育和血清相关激素的影响。结果表明,①在日粮中添加酵母培养物可以提高蛋雏鸡的平均日增重(P＜0.05),降低料重比(P＜0.05),并提高成活率(P＞0.05);②酵母培养物能够促进蛋雏鸡免疫器官的发育,提高其器官指数(P＜0.05)。③血清激素含量测定结果表明,添加酵母培养物组鸡血清中三碘甲状腺原氨酸(T3)、甲状腺激素(T4)水平显著提高(P＜0.05),皮质醇(COR)含量显著降低(P＜0.05),生长激素(GH)含量有所升高(P＞0.05)。     

不同硒源对肥育猪背最长肌和血清中抗氧化指标的影响

试验选用72头(61.32±1.14)kg杜长大肥育猪,随机分成3个处理,每个处理4个重复(栏),每个栏6头猪。3个处理分别饲喂基础日粮+0.30 mg/kg亚硒酸钠、基础日粮+0.30 mg/kg酵母硒Ⅰ、基础日粮+0.30 mg/kg酵母硒Ⅱ。正试试验期6周。试验结束后从每个重复选择体重基本一致的试验猪各1头,前腔静脉采血后屠宰取背最长肌,测定肌肉和血清中谷胱甘肽过氧化物酶活力、总过氧化物歧化酶活力、丙二醛含量和总抗氧化能力。结果表明:与亚硒酸钠相比,酵母硒Ⅱ提高了血清和肌肉中谷胱甘肽过氧化物酶和总过氧化物歧化酶活力活力(P<0.05),降低了丙二醛水平(P<0.05),显著提高了血清的总抗氧化能力(P<0.05)。