广西猪瘟流行毒株全基因组的克隆与序列分析

参考已发表的猪瘟病毒(CSFV)Shimen株、HCLV株、Paderborn株的核苷酸序列，设计并合成11对引物。应用RT—PcR技术，成功地分11个片段扩增了CSFV广西流行毒株GXWZ02的全基因组，将这11个基因片段克隆，并测定了其核苷酸序列。应用计算机生物软件Vector NT1将11个基因片段进行拼接。确认CSFV GXWZ02株全基因组序列的长度为12296个核苷酸(GenBank收录号AY367767)。将GXXZ02株与国内外已发表的Slhimen、HCLV、39、Brescia、Eystrup、Glentorf、Alfort187、Pader190rn、CS、ALD、GPE、P97、LPC毒株进行全基因组核苷酸序列和推定的氨基酸序列比较，核苷酸同源性分别为85．4％、84．6％、88．7％、85．7％、85．7％、85．3％、85．6％、95．3％、85．7％、85．7％85．4％、83．4％、84．3％，推定的氨基酸同源性分别为92．6％、91．7％、94．2％、93．1％、92．9％、92．3％、93．0％、97．7％、92．6％、93．0％、92．6％、90．5％、90．6％。GXWZ02与Shimen、HCLV的全基因组序列及推定的氨基酸序列有明显差异，表明GXWZ02株在遗传性和抗原性上发生了较明显的变化。系统发育树分析，所比较的14株CSFV被分为2个群：GXWZ02、Paderborn和39这3个毒株被归为群Ⅰ，其余的11个毒株被归为群Ⅱ，GXWZ02与Paderborn的亲缘关系最接近。将GXXZ02与Shimen、HCLV基因组中单个基因分别进行核苷酸及推定的氨基酸序列同源性比较，结果显示，基因E^ms、E2、P7、NS2、NS5A的遗传变异程度大。而NS3、NS4A、NS4B的遗传性则相对保守。     

添加不同酵母培养物对瘤胃纤维分解菌群和纤维素酶活的影响

用3种酵母培养物(YC- 1、YC 2和YC- 3)分别饲喂4头带有永久性瘤胃瘘管的肉牛,研究培养物对瘤胃发酵、纤维分解酶活性和3种纤维分解菌数量的影响,结果表明:YC 2处理的乙酸、丙酸、丁酸和总 VFA浓度显著高于对照组(P<0 .05),YC 1和YC 3处理的乙酸/丙酸比例显著降低(P<0 .01);各处理均能显著提高瘤胃内羧甲基纤维素酶、水杨苷酶和木聚糖酶的活性(P<0 .01);各处理都显著提高黄化瘤胃球菌的相对比例(P<0 .01),16SrRNA特异性寡聚核苷酸探针杂交法分析测定结果表明 3 种纤维分解菌在瘤胃细菌中所占比例为 3. 80%±0 .2%。     

黄羽肉种鸡对棉籽粕、菜籽粕、禽副粉氨基酸消化率的比较研究

本试验对黄羽和爱拔益加肉种鸡在棉籽粕、菜籽粕、禽副粉3种饲料原料氨基酸消化率进行了比较研究。试验结果表明 ,经内源校正后 ,黄羽肉鸡对棉籽粕、禽副粉的总真氨基酸消化率高于爱拔益加肉鸡 ,对菜籽粕的总真氨基酸消化率和爱拔益加肉鸡十分接近。就单个饲料原料的总真氨基酸消化率而言 ,黄羽肉鸡对禽副粉的消化率最高 ,其次是菜粕和棉粕 ;爱拔益加肉鸡显示相同的规律 ;虽然爱拔益加肉鸡和黄羽肉鸡在谷氨基、酪氨酸、赖氨酸、色氨酸的内源排泄量差异达到显著水平 (P<0.05,P<0.01),两种肉鸡在内源总氨基酸排泄量之间不存在显著差异 (P<0.05)。     

伪狂犬病病毒Bartha株TK-/LacZ+突变株的构建及其生物学特性研究

本研究将伪狂犬病病毒Bartha株基因组与含有LacZ标志基因的TK基因转移质料pUEKPZ共转染猪肾传代细胞PK－5，细胞出现病变后，反复冻融3次收毒，按1：5稀释接种于IBRS－2细胞。在X－gal存在下挑取蓝斑，蓝斑筛选3次，再进行空斑试验，同时用PCR扩增LacZ基因，经3次空斑纯化，随机挑取的空斑均能扩增出LacZ基因，证实所获得的重组病毒为伪狂犬病病毒Bartha株TK^-/LacZ^ 突变株。TCID50试验表明，TK失活对Bartha株在细胞上增殖无影响；Balb/C小鼠试验表明，该突变对Balb/C小鼠的安全性明显高于Bartha亲本毒株。     

鸡贫血病毒荷兰弱毒株基因序列比较研究

用ＣＡ５、ＣＡ６和ＣＡ７、ＣＡ８两对引物对鸡贫血病毒荷兰弱毒株进行ＰＣＲ扩增。将扩增产物１．５ｋｂ和０．８ｋｂ的ＤＮＡ片段分别克隆到ＰＵＣ１１９、ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔ载体质粒中,并进行核苷酸序列分析。通过与２６Ｐ４毒株进行核苷酸序列比较发现二者有３２个核苷酸的差异。荷兰和２６Ｐ４两毒株间ＶＰＩ蛋白质同源率为９７％,没有发生特异性变化;ＶＰ３蛋白质同源率为９５％,在Ｉ￣３０个氨基酸之间发生了特异性     

应用酵母双杂交方法筛选与猪瘟病毒Npro蛋白相互作用的宿主蛋白

为研究猪瘟病毒(CSFV)与宿主细胞间的相互作用,本研究采用酵母双杂交方法以猪瘟病毒Npro蛋白为诱饵,从猪外周血单个核细胞(PBMC) cDNA表达文库中筛选与之相互作用的蛋白,经共转化试验表明,共筛选到12个与Npro蛋白相互作用的宿主蛋白,应用Cytoscape 2.8.2软件绘制了蛋白质间相互作用关系图,根据GO分析结果,这些蛋白分别参与细胞代谢、细胞生长、免疫等过程,经双分子荧光互补(BiFC)试验表明筛得的部分宿主蛋白与CSFV Npro具有相互作用.本研究中筛选得到的蛋白质对CSFV复制的影响有待进一步深入研究.     

Evaluation using hoof wall strain gauges of a therapeutic shoe and a hoof cast with a heel wedge as potential supportive therapy for horses with laminitis

OBJECTIVE: To evaluate using strain gauges, a hoof cast with heel wedge, and a therapeutic shoe with unsupported toe for their effectiveness in redistribution of load from the dorsal hoof wall. STUDY DESIGN: In vitro biomechanical study. SAMPLE POPULATION: Twenty forelimb specimens. METHODS: Rosette strain gauges were placed on the dorsal and lateral hoof wall of 20 normal shaped hooves. Limbs were loaded vertically using a tensile testing machine with a 1 Hz sinusoidally cycling load up to 3000 N during 15 seconds. Mean values of principal strain and direction at 2500 N load were calculated for 3 experimental conditions (unshod, therapeutic shoe with unsupported toe, and hoof cast with heel elevation) and tested by ANOVA (P<.05). RESULTS: Vertical limb loading in an unshod hoof leads to a biaxial compression of the dorsal wall with high longitudinal compression (epsilon2 = -1515 microm/m). Principal strain at the dorsal wall (epsilon2) was decreased by 23% with the therapeutic shoe and by 59% with the hoof cast. On the lateral hoof wall principal strain was unchanged with the shoe, but increased by 34% with the cast. CONCLUSIONS: Strain measurements indicate unloading of the dorsal hoof wall by both methods with the cast being more effective than the shoe. CLINICAL RELEVANCE: The hoof cast with wedge offers substantial unloading of the dorsal wall, but increases load on the quarter. Therefore a hoof cast would likely be most helpful in acute laminitis when palmar structures can still bear load. The therapeutic shoe offers rehabilitation and regrowth of the dorsal wall without increased load on the quarter wall.     

有机铬对热应激蛋鸡生产性能和血液生化指标的影响

试验选用91周龄新罗曼商品蛋鸡480只,按2×2双因子试验设计随机分为5组,对照组饲喂不添加铬的玉米-豆粕型基础日粮,4个试验组饲喂在基础日粮中分别添加了以吡啶羧酸铬或酵母铬来源的0.2mg/kg或0.4mg/kg的日粮,试验30d,以研究有机铬对热应激蛋鸡生产性能和血液生化指标的影响。试验结果显示:①有机铬能在一定程度上促进热应激蛋鸡的蛋白质利用,提高热应激蛋鸡的生产性能;②铬水平对血清尿素氮有极显著的影响(P<0.01),添加0.4mg/kg铬组均极显著地低于对照组(P<0.01),说明了补铬能够抑制由高温引起的蛋白质分解过程,从而起到缓解高温应激的作用;③吡啶羧酸铬和酵母铬在作用效果上无显著的差异;从经济效益方面考虑,0.4mg/kg铬水平的酵母铬和吡啶羧酸铬经济效益较高。     

复合酶高活性酵母对岭南黄肉鸡生产性能的影响

300只岭南黄肉鸡随机分为2组(每组设3个重复,每个重复50只),对照组饲喂基础日粮,试验组在基础日粮中用3%活性酵母替代3%豆粕。饲养试验结果表明:0～49日龄,平均末重、平均日增重、成活率试验组分别比对照组提高8.74%(P<0.05)、8.91%(P<0.05)和5.00%(P<0.05),试验组料蛋比比对照组下降11.25%(P<0.05)。代谢试验表明:能量表观利用率和粗蛋白质表观利用率试验组比对照组分别提高4.05%(P<0.05)和6.84%(P<0.05)。     

苏云金芽孢杆菌YJ-2000菌株对家蚕安全性和杀虫活性的评价

应用时间-剂量-死亡率模型就苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)YJ-2000菌株对6种鳞翅目昆虫的杀虫活性作了初步评价。该菌株对家蚕基本无毒性,而对蔬菜害虫小菜蛾、菜粉蝶,水稻害虫三化螟、二化螟,桑树害虫桑螟幼虫均有不同程度的毒性,其中对小菜蛾和菜粉蝶的毒性最强;幼虫死亡率可高达100％。该菌株是对家蚕安全而对其它鳞翅目害虫具杀虫活性的特异性菌株,有望用于养蚕地区桑园及其邻近作物的鳞翅目害虫防治。