鲢鱼骨蛋白水解物对肌原纤维蛋白凝胶特性的影响

为改善鲢鱼肌原纤维蛋白凝胶特性,利用中性蛋白酶制备鱼骨蛋白水解物,研究不同鱼骨蛋白水解物添加量对肌原纤维蛋白凝胶性质及抗氧化活性的影响。结果表明,随着鱼骨蛋白水解物添加量的增大,肌原纤维蛋白表面疏水性、总巯基和活性巯基含量增加。当鱼骨蛋白水解物添加量为4%时,肌原纤维蛋白凝胶具有较好的保水性和持油性,凝胶强度达到最高,具有致密的微观结构。添加量为4%鱼骨蛋白水解物-肌原纤维蛋白复合物清除DPPH自由基能力达到最高,清除率为88.4%。鱼骨蛋白水解物可用作改善水产制品品质的天然抗氧化剂和凝胶质地增强剂。     

海藻糖产生菌株发酵培养基的优化

从土壤中分离得到1株海藻糖产量较高的酵母菌株,对其进行最佳发酵培养基的研究。在预试验和分析资料的基础上,通过4因素二次旋转正交组合试验设计,得出海藻糖产量回归模型,拟合较好。结果表明,蔗糖为2.61%,牛肉膏为0.53%,酵母膏为0.53%,MgSO4·7H2O为0.03%时,海藻糖的产量在24h达到最大值,产糖量为3098.6μg/mL,较优化前提高了0.71倍。     

新疆野扁桃自交不亲和SFB与S-RNase蛋白间相互作用的研究

利用酵母双杂交系统研究新疆野扁桃自交不亲和性花粉SFB蛋白与花柱S-RNase蛋白间的相互作用。以野扁桃花药为实验材料,根据实验要求和基因的结构特点,利用已克隆到的SFB和S-RNase基因,有针对性的截短,构建酵母双杂交载体。研究结果显示,成功构建了酵母双杂交重组表达载体,PtSFB17、PtS16-RNase和PtS17-RNase各蛋白之间并没有发现存在相互作用,据此推测PtS16-RNase蛋白和PtS17-RNase蛋白不在PtSFB17蛋白的识别谱中,协同非我识别模型在新疆野扁桃中同样存在。新疆野扁桃自交不亲和性PtSFB17、PtS16-RNase和PtS17-RNase各蛋白间并无相互作用。     

甜味蛋白Brazzein基因合成及其在酵母中表达的初步研究

采用pGAPZαA为表达载体,SMD1168毕赤酵母为受体系统,构建分泌型的Brazzein毕赤酵母重组菌。按照毕赤酵母偏爱密码子设计Brazzein基因,共设计4对引物,采用SOE-PCR法合成Brazzein基因,构建克隆载体pUC57-Bra与酵母表达载体pGAPZαA-Bra。将重组质粒线性化,电转导入Pichia.pastoris SMD1168中,用高浓度的Zeocin筛选高拷贝转化子。将重组菌株接种于YPD培养基诱导表达,进行SDS-PAGE分析。成功构建了分泌型的Brazzein毕赤酵母重组菌,SDS-PAGE表明,目标蛋白的相对分子量与理论值一致,诱导72h后的目的蛋白表达量达0.12g/L。     

Integration of biocontrol yeast and thiabendazole protects stored apples from fungicide sensitive and resistant isolates of Botrytis cinerea

Three selected biocontrol yeasts, known for their elevated antagonistic activity against several fungal pathogens, were tested in vitro for compatibility with common fungicides. The antagonists were resistant to several fungicides, but they were inhibited by triazoles and dithiocarbamates. The yeast isolate LS28 (Cryptococcus laurentii), which tolerated in vitro high rates of benzimidazoles, was tested, alone or in combination with a low dose (10% of the full label rate) of thiabendazole, against grey mould on stored apples. Wounded fruit were inoculated with thiabendazole resistant and sensitive isolates of Botrytis cinerea, applied separately or as a mixture. A more effective and prolonged control of fungal decay was always exerted by the biocontrol yeast applied together with thiabendazole at a low dose. This treatment provided synergistic effects and was markedly better than treatments applied separately, whereas the fungicide applied alone at the highest label dose was ineffective in the presence of the isolate of B. cinerea resistant to thiabendazole. The biocontrol yeast applied alone provided significant protection of apples stored for up to 12 days at 20 °C (from 39 to 81% less decay than untreated control), whereas the fungicide alone at low or high dose was always ineffective in the presence of the B. cinerea isolate resistant to benzimidazoles. The integrated treatment was highly effective and durable showing high reduction of decay (from 66 to 92%) even after 18 days of storage. This study suggests that the integration of a biocontrol agent with a low rate of fungicide may be a useful alternative strategy to manage both sensitive and resistant isolates of fungal pathogens efficiently and to reduce risks involved with extensive use of synthetic chemicals.     

黑木耳多糖馒头的研制

以传统馒头配方及工艺为基础,将黑木耳作为原料添加到馒头中。通过单因素试验及正交试验确定黑木耳多糖馒头最佳配方。结果表明,影响黑木耳多糖馒头品质的4个因素主次顺序为黑木耳浆添加量>白砂糖添加量>酵母添加量>加水量。黑木耳多糖馒头最佳配方为黑木耳浆添加量10%,酵母添加量0.7%,加水量50%,白砂糖添加量10%。该条件下生产出来的黑木耳多糖馒头感官评分最高,馒头品质最好。     

海参性腺和海参肠酶解液风味改良研究

由于海参性腺和海参肠酶解液的风味不佳,本实验主要通过美拉德反应改善其风味,以期为海参性腺和海参肠的综合利用提供理论支持。以感官评价为指标,结合电子鼻的分析,研究了美拉德反应的基本体系及反应的基本参数对海参肠和海参性腺酶解液风味的改良作用。海参性腺酶解液Maillard反应温度120℃,还原糖添加量为6%（葡萄糖:木糖=5:1）,甘氨酸:精氨酸的比例为3:1,氨基酸添加量为3%,反应pH 8.5,反应时间20 min;海参肠酶解液Maillard反应温度115℃,还原糖添加量为6%（葡萄糖:木糖=1:1）,甘氨酸:精氨酸的比例为1:1,氨基酸添加量为3%,反应pH不调,反应时间30 min。采用Maillard反应能够很好的改善海参性腺和海参肠酶解液的风味,使其由感官难以接受变为感官易于接受的产品。     

棉花纤维RNA提取方法的比较及酵母双杂交文库的构建

为了从棉花纤维中提取高质量的RNA用于构建酵母双杂交文库,采用4种不同的方法提取9天和19天棉花纤维的RNA。琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度法检测结果表明：热硼酸法适用于初生幼嫩纤维和次生加厚纤维的RNA提取,CTAB-PVP法仅适用于初生幼嫩纤维的RNA提取,异硫氰酸胍法和高盐高pH值法提取的RNA由于杂质含量较多而影响反转录效果。采用热硼酸法大量提取总RNA,纯化后的mRNA反转录为cDNA,通过重组将扩增的cDNA片段定向插入到pGADT7-Rec AD克隆载体中,得到棉纤维9天和19天的酵母双杂交cDNA文库。2个文库的滴度分别是1.01×107 cfu /mL和8×106 cfu /mL,cDNA插入片段长度集中分布在250~2500 bp之间。由此可以看出,构建的2个棉纤维文库质量较高,可用于棉花纤维素合成和调控途径的研究。     

蜂蜜菊芋酒发酵工艺的研究

以菊芋为主要原料,蜂蜜补充糖源,对蜂蜜菊芋酒发酵条件进行研究。结果表明,三种不同加糖方式中,采用初始糖度20%(还原糖含量184.2 g·L~(-1)),糖度降为10%(还原糖含量92.90 g·L~(-1))后蜂蜜补糖至15%(还原糖含量146.3 g·L~(-1))的加糖方式进行酒精发酵,可明显提高酒体酒精度,降低残糖量;主发酵结束后酒精度为14.4%(V/V),还原糖含量降至8.00 g·L~(-1)。筛选出蜂蜜菊芋酒的发酵条件为:酵母菌接种量0.8 g·L~(-1),发酵温度26℃,初始p H 4,装液量70%,在此发酵条件下,酒体酒精度为14.0%(V/V),还原糖含量10.4 g·L~(-1),总酸含量6.90 g·L~(-1),按此工艺得到蜂蜜菊芋酒色泽金黄,香气浓郁,口感柔和。     

西藏灵菇来源酵母菌产谷胱甘肽能力比较及提取条件优化

为获得高产谷胱甘肽菌株,采用DTNB法测定酵母菌体提取液中的GSH含量,比较了16株分离自西藏灵菇的酵母菌产谷胱甘肽能力,并以Y15为出发菌株,优化从菌体中提取谷胱甘肽条件。单因素试验比较了超声波、微波和热水三种细胞破碎方式,及菌体与提取液体积比、提取液pH、水浸提温度、时间对谷胱甘肽提取的影响,正交试验优化提取液pH、沸水浸提时间、料液比。结果表明,菌株Y19、Y15谷胱甘肽产量较高。采用Y15菌体冻融后热水抽提,料液比为1:6,pH2,沸水浴50min,其提取量最大,为49.90mg/L。Y15产谷胱甘肽较高,其谷胱甘肽提取条件为菌株Y15的利用提供了数据支持。