黄芪提取液对家兔睾丸细胞活力的影响

为探讨黄芪提取液对家兔睾丸细胞活力的影响,将无菌条件下分离得到的家兔睾丸细胞培养于含有不同浓度黄芪提取液的培养液内,培养48 h后,用CCK-8试剂测定细胞相对活力。结果表明,培养液内添加适当浓度的黄芪提取液可以提高家兔睾丸细胞的活力。     

抗菌肽CRAMP的安全性、稳定性及其在清除铜绿假单胞菌生物被膜中的作用

旨在考察鼠源抗菌肽CRAMP的安全性、稳定性及其在清除铜绿假单胞菌生物被膜中的作用。采用兔血红细胞悬液的溶血性和小鼠腹腔巨噬细胞(RAW264.7)的细胞毒性考察CRAMP的安全性;采用不同温度、蛋白酶、金属离子和酸碱梯度对CRAMP抗菌活性的影响,考察其稳定性;通过在6孔细胞培养板中构建铜绿假单胞菌(PAO1株)成熟生物被膜,以人源抗菌肽LL-37和3种抗菌药为对照,采用结晶紫染色法检测生物被膜量,平板菌落计数法对生物被膜活菌数进行计数,苯酚-硫酸法结合Folin-酚试剂法检测生物被膜胞外基质含量,激光扫描共聚焦显微镜(CLSM)观察CRAMP干预PAO1生物被膜形态学的变化。结果显示,CRAMP在所测试浓度下对兔血红细胞溶血率均<2%;在62.5~125 mg·L^-1时对 RAW264.7没有细胞毒性。温度(25~100 ℃)、两种盐离子(Na⁺、K⁺)以及pH为5~10时对CRAMP的抗菌活性没有影响;胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶均不同程度影响了CRAMP的抗菌活性。6孔细胞培养板中,4倍MIC 的CRAMP极显著降低了PAO1生物被膜量(减少率为76.74%,P<0.01),极显著减少了生物被膜中的活菌数量(减少了1.2个CFU·mL^-1,P<0.01),效果优于LL-37和3种抗菌药。CRAMP组的胞外基质显著低于空白对照组和LL-37组(P<0.05)。CLSM结果显示：与对照组相比较,4MIC浓度下,CRAMP组的细菌总荧光强度(PI+SYTO)显著低于空白对照组和LL-37组(P<0.05);与空白对照组相比,CRAMP组和LL-37组的死菌荧光强度/活菌荧光强度比值 (PI/SYTO)均极显著增大(P<0.01)。综上表明,CRAMP具有低溶血性、低细胞毒性,除蛋白酶作用不稳定外,具有较好的稳定性,对PAO1成熟生物被膜具有明显的清除作用,且效果优于LL-37,具有良好的药物开发前景。     

抗玉米赤霉烯酮单克隆抗体的制备及ELISA检测试剂盒的研制

制备并鉴定抗玉米赤霉烯酮(ZEN)单克隆抗体杂交瘤细胞株,研制检测谷物中ZEN的ELISA检测试剂盒。将ZEN肟化成ZEN-6-CMO,ZEN-6-CMO在DCC与NHS作用下与牛血清白蛋白(BSA)或卵清白蛋白(OVA)偶联合成完全抗原。以ZEN-6-CMO-BSA为抗原,免疫BALB/c小鼠,用ELISA筛选并建立分泌抗ZEN抗体的杂交瘤细胞株。测定单抗免疫球蛋白亚类、单抗效价及特异性。在ZEN单克隆抗体(Z9C3)的基础上,用间接竞争ELISA研究试剂盒的各项指标。试验结果表明:建立了2株稳定分泌抗ZEN抗体的杂交瘤细胞株(Z9C3和Z7E6),该细胞株所分泌的单隆抗体Ig亚类均为IgG1,ELISA检测结果表明:抗ZEN抗体可与ZEN发生特异性反应,IC50为3ng/mL和1.3ng/mL,该抗体与玉米赤霉醇(ZEL)的交叉反应分别为15.9%和9.8%。试剂盒最低检出质量浓度为0.5ng/mL,标准曲线的线性范围为0.5～50ng/mL;对玉米和小麦的平均添加回收率分别是92.5%和91.7%,变异系数分别是8.5%和10.5%。     

H9N2流感病毒诱导MDCK细胞自噬对病毒复制的影响

本试验旨在研究H9N2流感病毒感染MDCK细胞引发的细胞自噬对病毒复制的影响。试验首先建立了稳定表达GFP-LC3的 MDCK细胞系,该细胞系经H9N2流感病毒感染后,激光共聚焦观察到了绿色荧光的点状聚集,得出H9N2流感病毒感染MDCK细胞引发细胞自噬。随后试验利用3-MA抑制细胞自噬、Rapamycin诱导细胞自噬,荧光定量PCR检测NP mRNA水平,TCID50检测病毒的滴度进行细胞自噬与病毒复制的研究。结果表明： Rapamycin可显著增加NP mRNA水平和病毒滴度（P ＜ 0.01）|3-MA可以显著降低NP mRNA水平和病毒滴度（P ＜ 0.01)。说明H9N2流感病毒感染MDCK细胞引发的细胞自噬可促进流感病毒的复制。 [关键词] H9N2 流感病毒|细胞自噬|病毒复制|MDCK细胞|诱导     

矮生稷山牡丹的性状鉴定及转录组差异分析

为探究稷山牡丹矮化机理,本研究以矮生稷山牡丹和高株型杨山牡丹的茎段为材料,通过石蜡切片技术进行细胞学观察,利用转录组测序技术分析两种材料茎段的差异基因,并进行RT-qPCR验证。细胞学观察结果显示：稷山牡丹的细胞长度显著短于杨山牡丹,而细胞宽度和密度显著大于杨山牡丹;通过转录组测序并进行差异基因的筛选,获得122 336个差异表达基因,其中69 364个基因表达上调,52 972个表达下调。KEGG通路富集发现,与矮生性状相关的基因主要富集在脂肪酸途径和植物激素信号转导途径。筛选13个矮生相关候选基因进行RT-qPCR验证,其结果与转录组结果一致。本研究旨在从细胞及分子水平解析牡丹株高性状,挖掘其相关基因,为揭示稷山牡丹的矮生机理以及利用矮生相关的优异基因来改善株型提供了理论依据。     

PK15细胞在不同培养条件下的生长情况

PK15细胞在多种兽用疫苗的研究和生产中被广泛培养。在生产中培养生长状态良好的PK15细胞,是生产优质疫苗的前提。随着疫苗生产工艺的不断更新迭代,细胞培养的方式也不断增加,目前常见的培养方式有方瓶、转瓶、生物反应器等。为了给生产制定更加优化的培养策略,本文探讨了PK15细胞在方瓶、转瓶、生物反应器三种不同培养条件下的生长情况。通过分析每次细胞培养前的分种密度、培养72 h细胞密度、细胞增长倍数并观察24 h、48 h、72 h的细胞状态,确定细胞的生长情况。结果表明,就对于细胞生长繁殖而言,无论哪种培养方法,该细胞均能很好生长。培养72 h,就细胞增长倍数而言,各培养系统有所区别,表现为方瓶倍增为10～30倍,转瓶为5～10倍,生物反应器为8～12倍。     

韩国研究人员在马勃菌中发现抑制乳腺癌物质

据韩国联合新闻报道,近日,韩国国立山林研究院与成均馆大学药学院的联合研究发现了马勃菌中存在一种抑制乳腺癌细胞增长的甾醇类天然物质。研究发现,马勃菌中的该物质能够降低雌激素受体为阳性的乳腺癌细胞的活力,有望用于雌激素依赖型乳腺癌治疗。研究团队表示,新发现的天然甾醇与麦角固醇的合成高度相关。目前已知麦角固醇有助于吸收维生素D及增强免疫力。     

蛋白质组学和营养

在科学发展的长河中,几乎没有哪一个领域能像营养学样取得如此巨大和有价值的进展〔1〕。随着分子生物学、细分子学及细胞内传导系统的研究,我们对营养素、激素、细因子、炎症介质对细胞代谢的作用,以及细胞代谢的调控了更深入的认识〔2〕。20世纪90年代,人类基因组测序草完成。基因虽是遗传信息的源头,而功能性蛋白是基因功的执行体。基因组计划的实现固然为生物有机体全体基序列的确定、为未来生命科学研究奠定了坚实的基础,但它并不能提供认识各种生命活动直接的分子基础,其间必研究生命活动的执行体———蛋白质这一重要环节。因此,命科…     

睾丸支持细胞的功能、分离纯化及鉴定研究进展

支持细胞对维持精子形成过程中的微环境起决定作用,它可以通过分泌功能、细胞间连接形成的血睾屏障功能以及吞噬功能等来促进精子的形成过程,其发育异常会导致不同程度的雄性生殖缺陷。基于支持细胞在雄性动物生殖过程中的作用,体外培养高纯度支持细胞可成为研究睾丸两大核心功能-精子发生和性激素分泌功能相关调节机制重要的细胞模型。此外,体外培养睾丸支持细胞也可作为生殖毒理学等新兴热点领域的细胞模型,为评估和研究环境因素对雄性生殖的影响提供便利。因此,作者系统地归纳、总结了目前关于动物支持细胞生物功能的研究及常用的体外分离纯化、培养及鉴定方法,以期为利用动物支持细胞开展雄性生殖领域的研究提供参考。     

几个梨品种果肉石细胞的切片观察

梨果实石细胞是影响梨果加工和鲜食品质的重要因子之一．石细胞含量直接影响着果肉的粗细。为了更好地了解梨石细胞与果实品质的关系．以蜜梨等品种为材料．对其果肉中石细胞的形态、结构和分布作了解剖观察。