prd29A-otsAB表达载体的构建与转化本生烟草的研究

分别以拟南芥(Arabidopsis thaliana)和大肠杆菌(Escherichia coli)的基因组DNA为模板,通过PCR技术克隆得到rd29A启动子、ots A和ots B基因,将其依次插入到p2300-gfp质粒中,从而构建p2300-prd29A-ots AB融合基因表达载体。利用农杆菌介导法将prd29A-ots AB融合基因导入到本生烟草(Nicotiana benthamiana)中,通过对转基因烟草进行筛选,初步获得具有卡那霉素抗性的转基因植株,为今后进一步研究相关基因的功能以及通过基因工程技术提高植物的抗胁迫能力奠定基础。     

高温海藻糖合酶释放处理条件及其酶学性质的研究

[目的]对从Bacillus sp.SN02004-01菌所产高温海藻糖合酶产酶特性进行研究。[方法]通过试验研究了菌株细胞的破壁处理工艺及所得细胞海藻糖合酶性质。[结果]以2%甲苯＋0.2%EDTA为破壁试剂,菌体浓度0.05g/ml,温度为35℃,150r/min处理3.0h为最佳处理条件;该细胞酶最适反应pH值7.0,最适反应温度为60℃;Cu2＋、Zn2＋对该酶有抑制作用。[结论]在最佳处理条件下获得最高酶活为54.05u/ml,提高了2倍,说明该酶具有很好的生物反应特性。     

浅黄恩蚜小蜂寄生对烟粉虱海藻糖含量、酶活和热激蛋白表达水平的影响

本文以烟粉虱Bemisia tabaci Gennadius及其优势寄生蜂浅黄恩蚜小蜂Encarsia sophia (Girault & Dodd)为研究对象,测定了浅黄恩蚜小蜂寄生烟粉虱若虫后6、12、24、48和72 h,寄主体内海藻糖含量、海藻糖酶活性变化以及3种热激蛋白基因的即时表达情况.结果表明,自寄生蜂寄生后烟粉虱体内海藻糖含量先升高后降低,而海藻糖酶活性则先降低后升高,二者的变化拐点均表现在寄生后24 h.此外,寄生能够诱导烟粉虱hsp90过量表达,但同时抑制hsp70的表达.热激蛋白hsp20的表达量先升高后降低,且3种基因均在寄生后12h开始出现表达差异.本研究证明海藻糖和热激蛋白参与了寄生蜂与寄主互作体系,同时探讨了二者在寄生蜂与寄主互作过程中的具体作用,对于揭示寄生蜂-寄主互作机制有一定的参考价值.     

海藻糖对乳酸菌保护机制的研究进展

海藻糖是一种广泛存在于生物体中的非还原性二糖,具有独特的生物学特性,在医药、农业和食品等领域对细胞和生物分子都起到重要的保护作用。乳酸菌作为食品发酵工业中的重要微生物,近年来逐渐成为研究热点。为了进一步探究海藻糖对于乳酸菌的保护机制,本文综述国内外学者关于海藻糖对生物分子的保护机理及其在保护乳酸菌抵御环境胁迫中的应用。海藻糖对生物分子的保护机理存在4 种假说：“水替代”假说、“玻璃态”假说、优先排阻学说和分子间协同作用学说;海藻糖能够对乳酸菌在脱水胁迫、高温胁迫、冷冻胁迫及氧化胁迫等恶劣环境下起到一定的保护作用。本文为今后将海藻糖作为保护剂,提高乳酸菌对不利环境的抗性提供了理论依据。     

蛹虫草中游离糖醇、小分子糖类成分研究

建立高效阴离子色谱-脉冲安培法同时测定赤藓糖醇、阿糖醇、海藻糖、甘露醇和葡萄糖的方法 ,方法学考察结果表明该方法精密度(1.4%~4.4%)、稳定性(2.1%~4.9%)、重复性(0.6%~4.5%)和回收率(95.2%~105.7%)良好。用该方法对13个蛹虫草(Cordyceps militaris)子实体和4个菌丝体样品中游离糖醇、小分子糖类成分进行分析,结果表明蛹虫草子实体中含海藻糖(1.04%~19.17%)、甘露醇(0.96%~3.93%)和葡萄糖(1.46%~14.93%),其中海藻糖和葡萄糖含量呈显著负相关;菌丝体中含甘露醇(3.66%~6.70%)和葡萄糖(0.42%~1.06%)以及少量阿糖醇(0.02%~0.12%)。     

鸡新城疫活疫苗室温保存工艺的初步研究

选用海藻糖、明胶、PVP等成分配制耐热保护剂,采用梯度真空干燥方法,将鸡新城疫病毒(La Sota株)进行泡沫干燥,通过37℃10 d耐老化试验筛选到配方T5的病毒滴度损失为0.2 Lg;NDV-T5泡沫干燥疫苗经DSC测定配方玻璃化转变温度Tg为56.45℃,扫描电镜观察可见较为规则的片状结构;NDV-T5在各温度耐热性能均较好,2℃~8℃保存24个月,25℃保存15个月、37℃保存5个月,病毒含量下降≤1.0 Lg;将不同保存温度的NDV-T5泡沫干燥疫苗免疫1月龄雏鸡,鸡只均能在免疫后14 d产生抗体,与现有商品疫苗效力相当。     

海藻糖提高绵阳15号小麦幼苗耐盐能力的研究

经海藻糖预处理的小麦幼苗在NaCl溶液中生长,其细胞电解质渗漏率和游离脯氨酸含量均显著低于对照,而叶绿素含量、根系活力、干物质积累和生长速度则明显高于对照。海藻糖预处理能维持细胞膜结构的稳定性,从而提高小麦幼苗的抗盐能力,而蔗糖处理则无效。     

海藻糖在抗疲劳方面的应用研究

海藻糖是一种非还原性双糖,具有独特的抗冷冻生物学功能和较好的耐热性和稳定性。主要对海藻糖是否具有抗疲劳的功能进行探索,同时研究了海藻糖、转谷氨酰胺酶、淀粉与内酯复配形成的凝固剂对内酯豆腐结构和感官性质的影响,发现用复配凝固剂制得的净速冻处理豆腐,在解冻后可以基本保持其本来的结构和感官性质。此外还对海藻糖是否可以作为净菜的保鲜剂进行了初步探讨。     

啤酒废酵母细胞破壁方法的研究

本文采用反复冻融法、超声波法、微波法、盐法、酶法、液氮研磨等方法对啤酒酵母细胞进行破壁处理,对细胞破壁率、海藻糖得率和破壁时间进行分析比较,结果表明：微波法的细胞破壁率（49%）和海藻糖得率（5.64%）最高,且时间（30min）最短。通过对这6种破壁方法的研究,为啤酒废酵母的综合开发利用提供理论数据和技术条件。