膜过滤法分离纯化刺芹侧耳提取液中海藻糖的工艺

联合使用截留相对分子质量1000的超滤膜和270的纳滤膜从刺芹侧耳(Pleurotus eryngii)水提液中分离海藻糖。超滤膜操作压力为4 kg/cm2,同时纳滤膜操作压力为3 kg/cm2,经膜分离的相对分子质量270~1000部分溶液经浓缩结晶,海藻糖纯度可达93.3%。     

Trehalose protects testicular tissue of dairy goat upon cryopreservation

The aim of this study was to investigate whether the addition of trehalose to cryomedia reduces cellular damage and improves gene expression in cryopreserved dairy goat testicular tissues. Testicular tissues were cryopreserved in cryomedia without or with trehalose at a concentration of 5%, 10%, 15%, 20% or 25%. Cryopreserved testicular tissues were analysed for TUNEL‐positive cell number, expression of BAX, BCL‐2, CREM, BOULE and HSP70‐2. Isolated Leydig cells from cryopreserved tissue were cultured, and spent medium was evaluated for testosterone level. The results showed that though the TUNEL‐positive cell number increased in cryopreserved testicular tissues, the presence of trehalose reduced apoptotic cell number significantly. Quantitative real‐time polymerase chain reaction results showed that although the expression of BAX was upregulated following cryopreservation, the presence of trehalose downregulates it in cryopreserved testicular tissues. Expression of BCL‐2, CREM, BOULE and HSP70‐2 was downregulated following cryopreservation but the presence of trehalose significantly upregulated their expression in cryopreserved testicular tissues. Leydig cells isolated from testicular tissues cryopreserved with trehalose produced higher testosterone than the one without it (control). These results suggest that trehalose has a protective role in cryopreservation of dairy goat testicular tissue, and the most suitable trehalose concentration for cryopreservation is 15%.     

外源海藻糖浸种对低温胁迫油菜种子萌发及幼苗生长的影响

为提高抗寒性,促进油菜种子发芽及幼苗生长,以甘蓝型油菜品种中油杂19为材料,研究外源海藻糖浸种对低温胁迫下油菜种子萌发及幼苗生长的影响,阐明外源海藻糖浸种的寒害缓解作用.结果表明,在低温处理下(10℃),油菜种子萌发受到抑制,发芽势、发芽率、发芽指数及活力指数均显著下降,平均发芽时间显著延长;种子萌发过程中异柠檬酸裂解...     

海藻糖对转C4型PEPC水稻种子萌发耐旱性的影响

为揭示海藻糖参与高表达转玉米C₄型磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPC)基因(C₄-PEPC)水稻(Oryza sativa)(简称PC)在干旱胁迫下种子萌发的生理机制,本研究以PC及其未转基因野生型受体Kitaake(简称WT)种子为材料,研究外施不同浓度海藻糖联合干旱处理下,其种子活力、萌发过程中可溶性糖和脯氨酸含量、α-淀粉酶活性,以及α-淀粉酶、PEPC、糖信号、部分海藻糖相关基因的表达。结果表明,干旱处理均显著抑制了两材料的发芽率,并且抑制了芽的生长;外施低浓度海藻糖可缓解干旱对种子萌发的抑制,与WT相比,PC对海藻糖更加敏感,当海藻糖浓度为0.5 mmol·L^-1时已表现出明显的缓解效应,且较10 mmol·L^-1海藻糖对WT的缓解效果更佳。外施0.5 mmol·L^-1海藻糖联合干旱处理可以维持水稻的种子活力、种子内渗透调节物质含量以及α-淀粉酶活性,尤其有益于PC。外施0.5 mmol·L^-1海藻糖通过上调PC内依赖钙信号的CBL1-OsSnRK3.1/3.23基因的表达,激活OsK1a-OsMYBS1/2-OsAmy3/8途径;同时诱导OsTPP1/7合成海藻糖,上调蔗糖和葡萄糖含量,进而增强糖代谢,维持种子萌发。此外,海藻糖也上调了SAPK8/9/10和C₄-PEPC的转录水平,使PC在芽期表现耐旱。本研究结果为改善直播稻田的发芽率和“C₄稻”的创制提供了新线索。     

昆虫海藻糖酶的研究进展

为了解海藻糖酶的研究进展,从对昆虫海藻糖与海藻糖酶、昆虫海藻糖酶的酶学性质与海藻糖酶基因、昆虫海藻糖酶抑制剂等方面进行了综述,并对其作为杀虫靶标进行了展望.     

海藻糖、蔗糖和乳糖对猪精液冷冻保护效果的影响

比较了在冷冻保存液中添加不同水平海藻糖、蔗糖和乳糖对猪精液冷冻保护的效果。结果表明,添加3种双糖均能提高精液的冷冻保护效果,其最佳添加水平均为0.035 g/mL,在该添加水平下,海藻糖组的精子活率、活力和精子质膜完整率分别为(46.34±0.52)%,(41.38±0.39)%和(43.51±1.78)%,与蔗糖组差异均不显著(P>0.05),但均显著高于乳糖和对照组(P<0.05);海藻糖组的有线粒体活性精子百分率和精子顶体完整率分别为(44.56±1.16)%,(64.09±0.81)%,显著高于蔗糖、乳糖和对照组(P<0.05),3种双糖均随添加水平升高精子的顶体完整率逐渐升高;海藻糖组获能处理前后的精子获能率分别为(3.68±0.07)%和(41.82±0.56)%,显著优于蔗糖、乳糖和对照组(P<0.05)。说明海藻糖对猪精液冷冻保护的效果最好,最佳添加水平为0.035 g/mL。     

海藻糖代谢及其调控昆虫几丁质合成研究进展

海藻糖为一种非还原性糖,广泛存在于细菌、藻类、真菌、植物和无脊椎动物中。海藻糖被称为昆虫“血糖”,源于该糖为昆虫血淋巴中的主要糖类物质,在昆虫生长、发育、蜕皮等正常生理活动中有着重要的作用。昆虫的海藻糖先由海藻糖合成酶（trehalose-6-phosphate synthase,TPS）生成海藻糖-6-磷酸,然后通过海藻糖磷酸脂酶（trehalose-6-phosphate phosphatase,TPP）最终合成海藻糖,在能量需求时通过海藻糖酶（trehalase,TRE）降解为葡萄糖,用于能量供给。几丁质为昆虫表皮、中肠围食膜和气管系统的主要组成成分,昆虫在发育过程中需要蜕掉旧表皮,形成新的表皮,该过程一直是害虫控制的重要靶标途径。海藻糖酶为昆虫几丁质合成途径的第一个酶,在几丁质合成通路中有着重要的功能。那么海藻糖代谢又是如何调控几丁质合成途径来控制昆虫的蜕皮及几丁质代谢的呢？随着国内外海藻糖代谢相关基因功能研究的深入开展,研究结果表明昆虫海藻糖供给在几丁质合成中具有重要的作用,海藻糖酶分为可溶性和膜结合型两类,可溶性TRE和TPS在不同昆虫种类中具有多个同源基因,表明昆虫海藻糖代谢进化途径多样化。其次,海藻糖代谢直接调控几丁质合成途径,不论是海藻糖合成酶还是海藻糖酶基因的低表达,均能控制海藻糖使其供给不平衡,从而导致几丁质合成途径受阻,特别是几丁质合成酶基因表达降低而造成几丁质含量下降,该调控作用可进一步引起昆虫蜕皮困难、翅发育畸形等,甚至大量死亡。再次,海藻糖酶抑制剂能够抑制可溶性和膜结合型两类海藻糖酶活性、引起几丁质合成通路相关基因及几丁质酶基因表达的显著下降,导致几丁质含量显著降低,产生高比例的昆虫个体死亡。这些结果充分表明,一旦昆虫海藻糖代谢的供给平衡被打破,会直接影响到昆虫的几丁质合成乃至昆虫的蜕皮与发育过程。本文综述前人在海藻糖代谢调控几丁质合成方面的最新研究成果,为将来开发和利用海藻糖酶抑制剂及海藻糖合成酶抑制剂等绿色农药防治害虫提供理论依据。     

Protective Effect of Trehalose on Human Brain-type Creatine Kinase During Thermal Denaturation

Creatine kinase(CK) is a good model for studying protein folding and stability.The result of thermal inactivation showed that trehalose could prevent the thermal inactivation and thermal denaturation of human brain-type creatine kinase(hBBCK).In the presence of 1.0 mol/L trehalose, the midpoint temperature of thermal inactivation(T_m) of hBBCK increased by 4.6℃, and the activation energy(E_a) for thermal inactivation increased from 29.7 to 41.1 kJ/mol.Intrinsic fluorescence spectra also showed an increase in the apparent transition temperature(T_1/2) of hBBCK from 43.0 to 46.5, 47.7 and 49.9℃ in 0, 0.6, 0.8 and 1.2 mol/L trehalose, respectively.The results of intrinsic fluorescence spectra and extrinsic fluorescence spectra of ANS showed that the hydrophobic effects of trehalose might play an important role in thermal stability of hBBCK.The result of renaturation kinetics experiment showed that trehalose could effectively block the coagulation of hBBCK during renaturation process.     

外源海藻糖对盐胁迫下海滨锦葵种子萌发的影响

以耐盐经济植物海滨锦葵种子为材料,设置浓度为0（CK）、5、10、20、40 g/L NaCl和0（CK）、2、4、8、16 g/L海藻糖为处理液,研究不同浓度的NaCl和海藻糖及二者的交互作用对种子萌发特征的影响。结果表明：NaCl单独处理下,随着盐浓度的提高,显著降低了种子的萌发指标和幼苗鲜重,当盐浓度达到40 g/L时,种子无萌发。对盐处理下的种子施以海藻糖后,低浓度的海藻糖（2 g/L）就可以提高盐胁迫下的种子萌发特性,随着海藻糖浓度的增加,并没有明显提高盐胁迫下的种子萌发。施加一定的外源海藻糖可以提高盐胁迫下幼苗的鲜重,使幼苗更加适应盐胁迫的环境。     

胞内海藻糖在CP02菌降解对苯二甲酸中的作用

采用室内培养测定方法，研究了对苯二甲酸降解菌Candida CP02胞内海藻糖的抗渗透压冲击作用，同时分析了CP02在降解不同浓度对苯二甲酸时，胞内海藻糖含量的变化以及海藻糖酶和海藻糖-6-磷酸合成酶活性的差异。结果表明，随着对苯二甲酸浓度的增加，海藻糖合成酶的酶活也相应升高，胞内海藻糖含量迅速提高，有利于细胞的存活和对苯二甲酸的降解。