磺胺类药物的环境行为及其控制技术研究进展

磺胺类药物在畜禽养殖中大规模的使用对人类生活环境造成了很大的安全隐患,尤其是当其通过饮用水和食物等方式进入食物链的情况下。在了解磺胺类药物基本性质、分类及其危害的基础上,阐述了磺胺类药物的环境行为和削减控制技术研究现状,并提出了未来的研究重点和方向。     

免疫亲和柱—高效液相色谱法检测乳制品中的磺胺

建立了牛奶和奶粉中16种磺胺残留物的高效液相色谱—紫外快速测定方法。样品用乙酸乙酯提取,所得清液经免疫亲和柱净化富集,流动相为甲醇和1.1%乙酸—0.01 mol PBS溶液(梯度洗脱),应用液相色谱—紫外法检测。该方法的回收率为80%～110%,相对标准偏差小于10%;方法检测牛奶样品的灵敏度为0.5μg/L,奶粉样品的灵敏度为5.0μg/kg。     

超高效液相色谱简介及应用比较

介绍了超高效液相色谱的技术特点和优势,并对磺胺类药物的测定进行了HPLC和UPLC两种条件下的分析比较,结果表明:超高效液相色谱方法的突出优点体现在节省分析时间和溶剂用量上,尤其对基质复杂的痕量组分测定采用该方法以提高分析通量是今后发展的必然趋势。     

猪肉中磺胺类药物残留检测能力验证分析

为了解我国食品检测实验室的磺胺类药物残留检测能力,中国合格评定国家认可委员会(CNAS)于2011年委托中国兽医药品监察所组织实施了猪肉中磺胺间甲氧嘧啶、磺胺二甲嘧啶、磺胺甲噁唑和磺胺二甲氧嘧啶四种磺胺类药物残留检测的能力验证工作。全国16个省、市、自治区的共37家实验室参加了本次能力验证,采用的测试方法主要是液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)和高效液相色谱法(HPLC)。结果显示:磺胺间甲氧嘧啶、磺胺二甲嘧啶、磺胺甲噁唑和磺胺二甲氧嘧啶实验室满意结果率分别为93.9%、93.9%、93.9%和94.1%,可疑结果率分别为3.03%、3.03%、0和0,不满意结果率分别为3.03%、3.03%、6.06%和5.88%,说明参加能力验证的绝大多数实验室可以准确检测以上四种磺胺类药物残留。     

Pharmacokinetics of Sulfadimethoxine and Sulfamethoxazole in Combination with Trimethoprim after Oral Single- and Multiple-Dose Administration to Healthy Pigs

The pharmacokinetics were studied of sulfadimethoxine (SDM) or sulfamethoxazole (SMX) in combination with trimethoprim (TMP) administered as a single oral dose (25 mg + 5 mg per kg body weight) to two groups of 6 healthy pigs. The elimination half-lives of SMX and TMP were quite similar (2–3 h); SDM had a relatively long half-life of 13 h. Both sulfonamides (S) were exclusively metabolized to N4-acetyl derivatives but to different extents. The main metabolic pathway for TMP was O-demethylation and subsequent conjugation. In addition, the plasma concentrations of these drugs and their main metabolites after medication with different in-feed concentrations were determined. The drug (S:TMP) concentrations in the feed were 250:50, 500:100, and 1000:200 mg per kg. Steady-state concentrations were achieved within 48 h of feed medication, twice daily (SDM+TMP) or three times a day (SMX+TMP). Protein binding of SDM and its metabolite was high (>93%), whereas SMX, TMP and their metabolites showed moderate binding (48–75%). Feed medication with 500 ppm sulfonamide combined with 100 ppm TMP provided minimum steady-state plasma concentrations (C _ss,min) higher than the concentration required for inhibition of the growth of 90% of Actinobacillus pleuropneumoniae strains (n = 20).     

An Improved Bacteriological Method for the Detection of Sulfonamide Residues in Food

The addition of trimethoprim to Mueller-Hinton medium was found to improve the sensitivity of test bacteria towards sulfonamides by 20—50 times. Depending on the test bacteria used, the optimal concentrations of trimethoprim added to the medium are 1 μg per ml (Micrococcus luteus), 0.25 μg per ml (Bacillus stearothermophilus var. calidolactis) and 0.1 μg per ml (Bacillus megaterium). Using Micrococcus luteus or Bacillus megaterium a concentration of 0.25 μg sulfanilamide per ml may be detected, and 0.1 μg per ml may be detected when Bacillus stearothermophilus var. calidolactis is used.     

磁性化学发光酶免疫法检测猪肉中的磺胺类药物

以磁性微球为固定相,建立了检测猪肉中的磺胺类药物含量的化学发光酶免疫法。此方法为在微孔中加入羊抗兔磁性微球、样品、抗体和酶标抗原反应30min后,清洗磁珠,加入发光液10min后分析测定。通过酶标抗原量、抗体量和反应模式的优化,成功建立了一种高灵敏度的检测猪肉中磺胺类药物的磁性化学发光方法。该方法的检出限为0.26μg/kg,回收率81.21%~97.82%之间,相对标准偏差小于9.48%。     

三重荧光定量PCR检测水产动物源细菌磺胺类耐药基因

根据Gen Bank中细菌磺胺类耐药基因Sul1、Sul2和Sul3的保守序列设计3对特异性引物及相应Taq Man探针,以重组质粒标准品为模板对反应条件进行优化,建立一种可同时检测上述3种耐药基因的三重荧光定量PCR方法,并对该方法进行敏感性、特异性、重复性及临床菌株检测试验。结果表明:该方法定量范围为1×10~1~1×10~8拷贝/反应时,其标准曲线呈良好的线性关系;该方法灵敏度高(3个基因的最低质粒检测限均可达到10拷贝/反应)、特异性强(与其他病原菌及病毒无交叉反应)、重复性好(变异系数均小于2%);对临床菌株的检测结果与药敏试验结果的符合率达94.2%,且整个检测过程可在2 h内完成。所建立的可同时检测Sul1、Sul2和Sul3基因的三重荧光定量PCR方法可用于临床检测细菌的磺胺类耐药基因。     

猪和野生动物源大肠杆菌及沙门菌中磺胺类药物耐药基因的检测

对从四川省10个规模化猪场和16种野生动物的粪样中分离鉴定出的67株大肠杆菌、57株沙门菌进行了药敏试验。结果，猪源和野生动物源分离菌对磺胺类药物的耐药率分别为72．0％（72／100）和29．2％（7／24）。根据GenBank中登录的序列，设计了3对特异性引物，对磺胺类药物的耐药基因Sul1、Sul2、Sul3进行了三重PCR检测。在这124株细菌中，Sul1基因的检出率最高，为47．6％（59／124），Sul2基因的检出率为17．7％（22／124），Sul3基因的检出率为18．5％（23／124）。药敏试验结果与基因检测结果的符合率为89．9％。     

动物源性食品中磺胺类药物残留检测方法进展

磺胺类药物广泛应用于兽医临床治疗疾病和作为饲料添加剂促进动物的生长。磺胺类药物残留对人体存在潜在的威胁,目前常用的磺胺类药物残留检测方法有很多,包括各种微生物法、免疫法以及理化分析法。本文对这些方法加以综述。