犬ANP32蛋白多态性及其对A型流感病毒RNA聚合酶活性的影响

【目的】探索犬酸性核磷蛋白32(canis acidic (leucine-rich) nuclear phosphoprotein 32 ku, caANP32)对不同物种A型流感病毒(Influenza A virus, IAV) RNA聚合酶活性的影响。【方法】利用实时荧光定量PCR方法分析caANP32家族基因(caANP32A、caANP32B及caANP32E)的组织分布并对其进行扩增和克隆,评估caANP32家族蛋白对不同物种A型流感病毒RNA聚合酶活性的支持作用。【结果】caANP32家族基因在不同组织中分布相似,其中caANP32B基因组织丰度显著或极显著高于caANP32A和caANP32E基因(P<0.05;P<0.01),在心脏、盲肠和大脑中caANP32E基因组织丰度极显著或显著高于caANP32A基因(P<0.01;P<0.05),在肝脏、肺脏等组织中caANP32E与caANP32A基因丰度均无显著差异(P>0.05)。在犬心脏组织和MDCK细胞中发现,caANP32A基因仅存在1个转录本,caANP32B基因存在3个不同剪接...     

羊痘病毒P32基因的克隆与原核表达

根据发表的羊痘病毒P32基因,设计一对特异性引物,PCR扩增P32全长基因,将其克隆入pMD-18-T载体,获得重组质粒pMD-P32.再将P32基因亚克隆入原核表达载体pGEX-4T-1,获得重组表达质粒pGEX-P32,转化大肠埃希菌BL21后用IPTG诱导,表达产物经SDS-PAGE分析.结果表明,P32全长基因在大肠埃希菌中以融合形式成功表达,分子质量为58 ku左右,与预期大小相符.     

利用~(32)P示踪技术研究土壤磷素活性剂对大豆吸收土壤和肥料磷素量的影响

应用 3 2 P示踪技术研究了土壤磷素活化剂在磷肥肥效方面的影响。结果表明 ,施用土壤磷素活化剂可增加土壤磷素和肥料磷素的供应强度 ,促进大豆对土壤磷素和磷肥磷素的吸收。     

宿主蛋白ANP32A对流感病毒功能影响的研究进展

流感病毒是一类危害人和动物健康的RNA病毒,其在宿主细胞内的有效复制离不开宿主蛋白酸性核磷蛋白32家族成员A （ANP32A）和病毒RNA聚合酶的协助和支持。病毒RNA聚合酶由3种蛋白PB1、PB2和PA组成,且ANP32A与病毒RNA聚合酶的最强相互作用需要这3种蛋白的共同参与。ANP32A是酸性富含亮氨酸的核磷蛋白32（ANP32）家族成员,其被确认为支持细胞核中病毒RNA聚合酶活性的关键宿主因子,对流感病毒的复制具有重要的作用。ANP32A的物种特异性差异决定了病毒RNA聚合酶的宿主范围：独特的33个氨基酸序列存在于禽类ANP32A （avANP32A）,而在哺乳动物ANP32A中缺乏此氨基酸序列。avANP32A中特有的33个氨基酸序列能增强ANP32A的功能,从而增加禽源特征流感病毒聚合酶活性。禽流感病毒（Avian influenza virus,AIV）不能有效利用较短的ANP32A （即缺乏独特33个氨基酸序列的ANP32A）,因而哺乳动物ANP32A无法支持禽源特征聚合酶活性,然而在人ANP32A （huANP32A）中插入这33个氨基酸能促进其对AIV聚合酶的支持作用。此外,流感病毒的适应性突变也能增强AIV在哺乳动物中的传播力和致病性。AIV适应哺乳动物时往往会发生E627K突变,以增强其在哺乳动物中的复制能力。作者主要介绍了宿主蛋白ANP32A对流感病毒复制、转录的影响和流感病毒发生适应性突变的作用机制,简要论述了ANP32A与聚合酶的相互作用对流感病毒跨物种感染的分子机制。     

闽南山地DH32-29桉树无性系的耐寒性调查分析

通过对华安葛山林场较高海拔山地种植的DH32-29桉树无性系的寒害进行调查,结果表明:幼龄林分寒害较重,林龄较大的林分寒害相对较轻;坡向、坡位、地形地势等是影响寒害程度的外在因素。在本区域较高海拔山地种植桉树应选择避寒环境,避免在盆地、洼地、坡地下坡和山谷等处种植;根据实践经验提出搞好林分抚育、冬前增施钾肥不施氮肥可以减轻寒害、合理搭配桉树品种、选择抗寒能力强的品种是避免寒害的根本措施。     

Cloning and Sequence Analysis of the Gene Encoding LipL32 of <Emphasis Type="Italic">Leptospira interrogans</Emphasis> Serovar Sejroe

Leptospira, a member of the order Spirochaetales, is the causative agent of leptospirosis, an important zoonosis encountered worldwide. The Leptospira interrogans serovar Sejroe was grown in EMJH medium and its DNA was isolated using standard techniques. The LipL32 gene was amplified using the reported primer of Kirschneri of LipL32. The amplified product was found to comprise 756 base pairs. This amplified gene fragment of LipL32 lipoprotein was cloned in E. coli (DH5α) cells using pDrive plasmid as a vector. The recombinant cells were selected on LB agar medium containing ampicillin, X-gal and isopropyl-β-d-thiogalactopyranoside. Plasmid was extracted from the recombinant white colonies, and restriction endonuclease (RE) analysis was carried out using PstI and SalI. On partial sequence analysis, the product exhibited 756 base pairs, corresponding to 251 amino acids. The cloned gene could be further used for expression of recombinant protein for serodiagnosis of leptospirosis.     

基于山羊痘病毒P32蛋白间接ELISA方法的建立

通过Ni柱亲和层析和G-100层析技术对真核表达蛋白进行纯化,SDS-PAGE分析GPVP32蛋白纯化效果;应用琼脂扩散试验检测纯化蛋白的抗原反应性,并以纯化蛋白作为包被抗原建立间接ELISA方法。结果显示,从真核表达产物中获得了纯化的GPVP32蛋白,琼脂扩散试验显示纯化的GPVP32蛋白具有良好的抗原反应性;基于纯化蛋白建立的间接ELISA方法具有良好的特异性、敏感性和重复性。结果表明,本试验建立的间接ELISA方法可用于山羊痘流行病学的调查和血清抗体水平的监测,为山羊痘的防控提供了有效技术。     

桂糖32号在合浦种性表现及其对蔗糖成本价格影响

2008-2009年广西甘蔗品种区域试验合浦试点结果表明：桂糖32号的出苗率较高,宿根发株率最高,有效茎数较多。早熟。两新一宿平均甘蔗蔗糖分为15．41％,比新台糖22增加2．29个百分点。其中11月份蔗糖分为14．74％．比新台糖22增加3．02个百分点。公顷含糖量较高。平均每生产It白糖需要桂糖32号原料蔗成本及运费合计为3772．84元,比新台糖22减少658．52元,减14．86％。其中在榨季前期的11月份每生产It白糖需要桂糖32号原料蔗成本及运费合计为3944．34元。比新台糖22减少1016．37元,减幅达20．09％。     

基于PID算法对热风炉热风温度控制及仿真分析

在农作物金银花干燥期间,为了满足干燥热风的温度和风速的稳定性要求,针对热风炉出风口热风温度与设定的温度值滞后和稳定性差等问题,设计了一套以单片机STM32作为核心处理器和模糊自适PID算法作为参数控制器的控制系统,实现模糊自适PID算法对参数进行调整。利用Matlab语言建立模型,对整套控制系统进行仿真分析。结果表明:出风口热风温度的稳定性能达到95%以上,该研究方法提高控制系统的性能,有利于农作物干燥的质量和效率。     

猪源粪肠球菌和屎肠球菌多重PCR快速鉴定方法的建立

粪肠球菌和屎肠球菌是引起猪感染发病的优势肠球菌种,以肠球菌的16S rRNA基因设计属特异性引物,利用SodA基因多态性设计种特异性引物,同时优化反应条件,建立了能同时测定猪源粪肠球菌和屎肠球菌多重PCR方法。通过特异性和敏感性分析,该方法能扩增出肠球菌属特异性片段及粪肠球菌和屎肠球菌种特异性片段;对粪肠球菌敏感性为0...