应用重组N蛋白—ELISA检测猪繁殖与呼吸综合征抗体的研究

利用昆虫杆状病毒表达系统表达的猪繁殖与呼吸综合征重组N蛋白作为抗原，包被聚苯乙烯微量反应板，建立了猪繁殖与呼吸综合征重组N蛋白-ELISA诊断方法。试验证明，该方法对其他8种猪疫病阳性血清均无交叉反应，对标准阳性样品的检出率为100%。具有敏感性高、特异性强的特点。     

猪繁殖与呼吸综合征诊断技术研究进展

猪繁殖与呼吸综合征是最近 2 0年来才发展起来的一种新的猪病 ,然而它给许多国家的养猪业带来了灾难性的经济损失。 2 0世纪 90年代晚期 ,我国也有暴发该病的报道。为了加强进口检疫以及防止该病的传播 ,目前最主要的是提高对该病的诊断和防制水平 ,文章就有关该病的病理变化 ,诊断方法的研究进展进行了综述     

猪繁殖与呼吸综合征

综述了猪繁殖与呼吸综合征,包括病原PRRSV病毒的病原特点、流行病学、临床症状及诊断方法和防治措施等六方面。介绍了该病的临床诊断、病理学诊断和血清诊断方法及病毒分离技术,同时提出了该病的防治措施。     

重组N蛋白间接ELISA检测猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体

用纯化的猪繁殖与呼吸综合征病毒重组N蛋白作为包被抗原，建立了检测猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体的间接ELISA方法，并确定了ELISA最佳工作条件：抗原包被浓度为0．27μg/ml，37C1h加4C过夜，血清(1：40)和酶标免抗猪IgG(1：400)分别在37℃温育30min，底物溶液37℃显色15min。经重复性试验、交叉试验、阻断试验等试验结果表明该方法重复性好、特异性强、灵敏度高；与美国IDEXX试剂盒相比较，特异性和敏感性分别为97．6％和92．1％，无显著性差异。用已建立的方法检测临床血清样本187份，总阳性率为30．5％。     

双重RT-PGR方法检测猪流感病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒

为建立特异、敏感的猪流感病毒(SIV)和猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的双重RT-PCR检测方法,本研究根据GenBank登录的SIV M基因保守序列和PRRSV美洲型毒株的N基因保守序列,设计合成了2对特异引物,通过对扩增条件的优化,建立检测SIV和PRRSV的双重RT-PCR方法.检测结果显示:该方法可同时扩增出SIV(345 bp)和PRRSv(520 bp)的特异性片段;而猪瘟病毒、猪伪狂犬病病毒、猪细小病毒、猪圆环病毒2型及阴性鸡胚尿囊液核酸扩增结果均为阴性;对SIV和PRRSV 2种病毒混合液的最小检出量分别为102 EID50/0.1 mL和103TCID50/0.1 mL.应用双重RT-PCR和病毒分离法对12份临床疑似样品进行对比检测,结果表明:除双重RT-PCR检测到双阳性的3份混合感染病料中1份未分离到PRRSV外,其余2份均分离出病毒.证明该方法具有良好的特异性、敏感性,可以用于临床样品的早期快速检测.     

氮素形态对小麦生长中后期保护酶等生理特性的影响

在水培条件下,探究了氮素形态对小麦营养生殖并进生长时期保护酶的影响。结果表明:铵、硝态氮单供和混合供应对小麦保护酶活性影响不同。在铵、硝态氮混合供应下,叶片SOD、CAT,根系SOD活性最高,同时叶片、根系可溶性蛋白含量最大,根系活力和根系表面K3Fe(CN)6还原活性最高,但MDA含量最高;单供硝态氮时叶片POD活性最高,根系MDA含量最高;单供铵态氮时根系POD、CAT活性最高。单供尿素时叶片仅CAT活性高于铵和硝态氮混合供给,但同时叶片MDA含量也高于铵和硝态氮混合供给。叶片以SOD、CAT和POD为主清除自由基,而根系以SOD和POD为主清除自由基。铵和硝态氮混合供给下,小麦成熟后,地上部干重,籽粒产量最大,根冠比最小。     

中国部分地区2005－2007年猪繁殖与呼吸综合征病毒分离株ORF5基因和Nsp2基因遗传变异分析

 【目的】为分析2005－2007年间中国部分省区猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）流行毒株的分子生物学特征,了解其遗传演化规律,查明中国目前PRRSV流行毒株现状。【方法】应用病毒分离方法从中国4个省份在2005－2007年间采集的81份疑似蓝耳病病料中分离到36株猪繁殖与呼吸综合征病毒,应用RT-PCR方法对36株PRRSV现地分离株的ORF5基因和Nsp2基因进行扩增和序列分析。【结果】36株现地分离株均属于美洲型 PRRSV,ORF5基因全长均为603 bp,未发现有基因缺失或插入,编码约200个氨基酸,分离株推导氨基酸序列变异主要发生在9～39位;36个分离株中有15株PRRSV Nsp2基因全长为2 940 bp,21株PRRSV Nsp2基因全长为2 850 bp;发生Nsp2缺失的PRRSV在Nsp2基因第481位、532～560位发生了不连续缺失,共缺失30个氨基酸。与GeneBank中收录的14个PRRSV ORF5、Nsp2基因进行核苷酸及氨基酸序列比较和分析,系统进化关系显示,除B02-2005株可能与疫苗株有关外,多数现地分离株与Ch-1a株遗传距离较近,不同年份分离到的毒株与早期PRRSV分离株的同源性逐年降低。【结论】根据氨基酸变异情况对PRRSV现地分离株进行亚群聚类分析,发现36株现地分离株分别归属于以VR-2332为代表的4亚群,以BJ-4为代表的1亚群和以Ch-1a为代表的２亚群。进化关系表明PRRSV ORF5、Nsp2基因及其推导的氨基酸序列均发生了较大变异,不同地区PRRSV分离株的遗传关系存在交叉现象,地域特征不明显。     

高温对棉花生殖过程的影响

温度是影响棉花生长发育的主要环境因子之一。高温对棉花的营养生长、花蕾发育、授粉、受精、棉铃发育、产量及品质造成严重影响。本文综述了高温对棉花雄蕊发育、花粉活力、花粉在柱头上的萌发、花柱中花粉管生长、雌蕊和棉铃生长等生殖过程和产量的影响以及耐高温品种的筛选方法,并对棉花耐高温研究的发展方向进行探讨,旨在为探索棉花耐热机理及培育耐高温品种奠定基础。     

SULFUR AND BORON-MAGNESIUM-ZINC COMPOUND FERTILIZER CONTRIBUTE TO THE REPRODUCTIVE GROWTH OF JATROPHA CURCAS L.

Jatropha curcas L., a native tree to Mexico and Central America, is cultivated in many counties of China as a source for biodiesel. The effects of different fertilizers on the growth of Jatropha curcas L. were studied under soil conditions of low nitrogen (N), phosphorus (P), potassium (K) and boron (B) in soil. Compared with 16N-16P-16K compound fertilizer, both sulfur (S) and a B-management (Mg)-zinc (Zn) compound fertilizer both increased the oil concentration of the seed, and promoted the reproductive growth. Only the fertilizer S increased the seed yield and the Acid value of the oil, while the B-Mg-Zn compound fertilizer declined the Acid value of the oil and induced the differentiation of female flowers. Boron-Mg-Zn compound fertilizer induced a smaller increase in the oil concentration of Jatropha curcas seed than fertilizer S and the largest increase in growth rate of trees. Moreover, Jatropha curcas showed a higher requirement of S for the reproductive phase than for its vegetative growth. Jatropha curcas may belong to the species with restricted B mobility, and B fertilizer should be sprayed as a foliar fertilizer. However, further research on the S nutrition of Jatropha curcas is required.     

管角螺生殖系统解剖学及组织学观察

解剖并观察了管角螺的生殖系统,采用组织切片技术,对其生殖腺发育及生殖细胞发生过程进行了研究。结果表明,管角螺为雌雄异体,雄性生殖系统主要由精巢、贮精囊、前列腺、输精管和阴茎构成,其中,精巢由生精小管和输精小管组成;根据生精小管内生殖细胞分布和间质细胞数量,精巢发育分为增殖期、生长期(精母细胞分裂期)、成熟与排放期、退化期等4个时期,根据细胞大小、形态及分布特征,精细胞的发生经历了精原细胞、初级精母细胞、次级精母细胞、精子细胞和精子4个阶段。卵巢结构为滤泡型,由滤泡壁和滤泡腔组成,内含嗜酸性颗粒。从卵巢内滤泡的大小、结构及滤泡内嗜酸性颗粒的数量,卵巢发育分为增殖期、生长期、成熟期、排放期和休止期;根据卵细胞的大小、形态及卵黄颗粒的含量,卵细胞发生过程分为增殖期、生长期和成熟期。管角螺生殖腺及生殖细胞的发育均不同步,为多次成熟、多次排放方式。