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通过PCR方法自含NDVZF基因的克隆质粒中扩增NDVF基因 ,将其与真核表达载体pcDNA3..1/V5_His_TOPO重组。经核酸内切酶酶切 ,阳性克隆鉴定准确无误 ,核酸序列测定结果与原始基因比较 ,同源性大于 99% ,启始密码和终止密码未出现变异 ,将该重组质粒命名为pcDNANDVZF。将pcDNANDVZF在脂质体作用下转染CEF细胞 ,用间接免疫荧光试验检测 ,结果证明pcDNANDVZF可在CEF细胞中大量表达F蛋白。 相似文献
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马传贫驴白细胞弱毒疫苗株跨膜蛋白主要免疫决定区基因的克隆与表达 总被引:3,自引:0,他引:3
从感染驴白细胞的马传贫驴白细胞弱毒疫苗株前病毒DNA中克隆了编码跨膜蛋白主要免疫决定区(TMIR)的基因,并在大肠杆菌中进行了表达。所表达的融合蛋白有一部分是可溶的,其氨基端带有6个组氨酸的标签,因此可以用固定化金属离子亲和层析法在非变性条件下进行纯化。在间接酶联免疫吸附试验(ELISA)和免疫印迹试验中,重组的TMIR蛋白可与马传贫阳性血清样品发生反应,而与健康马血清无任何反应。这表明该重组蛋白具有良好的抗原性和特异性,可用于马传贫弱毒疫苗株在体内外复制、接种马体内免疫应答及马传贫诊断的研究。 相似文献
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应用蚀斑方法将SY-45毒株经过3次蚀斑纯化直到蚀斑大小相对稳定。从不同大小的蚀斑中挑选出三种蚀斑,大斑直径约3mm(简称LP)、中斑约2mm(简称MP)、小斑约1mm(简称SP)。分别在MDCK细胞上增殖并进行了三种不同大小斑毒对犬的毒力、免疫原性和在MDCK细胞上产毒量比较,以筛选最佳的疫苗株,试验结果表明用不同大小蚀斑病毒大剂量人工感染易感犬后,所有的试验犬临床症状和病理解剖学和病理组织学表现均正常;对挑选的4窝CAV HI抗体效价小于等于1:2的健康幼犬进行免疫试验,测定血清的中和抗体效价和血凝抑制抗体效价,结果表明:大斑毒的免疫原性要稍高于中斑毒,而明显高于小斑毒;不同大小蚀斑毒在MDKC细胞上产毒量差异很大,大斑毒可达10^7TCID50/mL、小斑毒达10^6TCID50/ml、小斑毒达10^4.5TCID^50/mL。综合所有试验结果表明:大斑毒株具有产毒量高、安全性好、免疫原性强的优点,是较为理想的疫苗株。 相似文献
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猪在断奶后的生长期内,体内脂肪逐渐增加,和其它家畜相比,猪更倾向沉积体脂。但猪体脂的沉积还要受遗传、年龄、日粮营养水平等因素的影响。在饲粮消化能量(DE)水平保持在3000—3200Kcal/kg,蛋白质含量为14%—15%的饲养条件下,我们分别测定了纯系北京黑猪(肉脂兼用型,平均瘦肉率为51%)和纯系长白猪(瘦肉型猪、平均瘦肉率为62%)的某些脂肪合成酶活性和脂肪代谢的一些生化指标。北京黑猪(公母各半)脂肪组织(背膘)中苹果酸酶(ME),葡萄糖—6—磷酸脱氢酶(G—6—PDH),异柠檬酸脱氢酶(ICDH)三种NADPH—生成酶活性随体重增加而升高,差异极其显著(P<0.001)。体重90kg的酶活性比56kg约高三倍。脂纺组织中上述NADPH生成酶活性北京黑猪比长白猪(体重均为90kg,公母各半)高一倍(P<0.001)。给北京黑猪(30头,公母各半,起始体重为60kg)注谢重组猪生长激素(rPGH,每天每头2mg,连续注谢28天),除表现生长加快,脂肪率下降约21%—23%外,其脂肪组织中NADPH生成酶活性降低十分明显(P<0.001)。苹果酸酶,葡萄糖—6—磷酶脱氢酶,异柠檬酸脱氢酶,三种酶总活性比对照组降低20%。血精中三酰甘油,游离脂肪酸,总胆固醇,高密度脂蛋白(HDL)胆固醇、乳糜微粒,极低密度脂蛋白(VLDL)胆固醇含量,6月龄时,北京黑猪明显高于长白猪(P<0.001—0.0005);而4月龄时,北京黑猪血清中三酰甘油,高密度脂蛋白胆固酶含量则均明显低于长白猪。北京黑猪血清中三酰甘油,高密度脂蛋白胆固醇含量,随月龄(4月龄—6月龄)增长而增加(P<0.0005)。而长白猪则相反,随月龄而呈下降趋势(P<0.05—0.0005)。两种猪的脂蛋白电泳和含量测定未见有年龄和品种间的差异。 相似文献
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BEVERLY J. E. McEWEN 《Veterinary dermatology》1992,3(3):115-119
Abstract— A unique dermatosis of male miniature swine is described. The disease occurs in post-pubertal pigs, and is characterized by symmetrical, indurated, plaques over the truncal region. Histologically, the dermis and panniculus are effaced by thick, interwoven bundles of collagen resulting in an absence of deep dermal elastin. Hypertrophy and hyperplasia of superficial dermal vessels, fibroblasts and fibrocytes are accompanied by perivascular infiltrates of lymphocytes, plasma cells and eosinophils. The pathogenesis of this unusual dermatosis, designated as “progressive dermal collagenosis of male miniature swine” is unknown. Résumé— Une dermatose originale du cochon nain mâle est décrite. La maladie apparait chez des cochons post pubertaires, et est caractérisée par des plaques sur le tronc, indurées et symétriques. Histologliquement, le derme et le pannicule sont envahis par d‘épais falsceaux de collagène, entrainant l'absence d’élastine dermique. Les vaisseaux du derme superficiei sont hyperplasiés et hypertrophiés, des fibroblastes et des fibrocytes sont accompagnés d'un infiltrat inflammatoire périvasculaire de lymphocytes, éosinophiles et plasmocytes. La pathogénie de cette affection peu commune, appelée “collagénose dermique progressive du cochon nain mâle” est inconnue. Zusammenfassung— Es wird eine einzigartige Hauterkrankung beim männlichen Miniaturschwein beschrieben. Die Krankheit tritt bei postpubertären Schweinen auf und wird durch symmetrische, indurierte Plagues im Rumpfbereich gekennzeichnet. Histologisch treten Dermis und Pannikulus gegenüber dicken, verflochtenen Kollagenbündeln in den Hintergrund, wodurch das tiefe, dermale Elastin verschwindet. Die Hypertrophie und Hyperplasie der oberflächlichen Hautgefäße, Fibroblasten und Fibrozyten wird von perivaskulären Infiltraten aus Lymphozyten, Plasmazellen und eosinophilen Granulozyten begleitet. Die Pathogenese dieser ungewöhnlichen Dermatose, die als “progressive dermale Kollagenose des männlichen Miniaturschweins” bezeichnet wird, ist unbekannt. Resumen El presente artículo es una descripción de una dermatosis única del macho cerdo miniatura. Le enfermedad aparece después de la pubertad, y se caracteriza por la aparición de placas simétricas sobre la región del tronco. El exámen histológico de la dermis y del tejido panicular revela la presencia de gruesas bandas de colágeno entrelazadas, lo cual tiene como resultado la ausencia de la capa de elastina profunda. La hipertrofia e hiperplasia de los vasos superficiales dérmicos, fibroblastos y fibrocitos, se ve acompañadas de infiltrados perivasculares de linfocitos, células plasmáticas y eosinófilos. La patogénesis de esta rara dermatosis Ilamada ‘colagenosis dérmica progresiva del cardo macho miniatura’, es desconocida. 相似文献
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广州香蕉束顶病毒分离和核酸鉴定 总被引:2,自引:0,他引:2
经液氮冷冻、差速离心和蔗糖梯度离心,从广州地区香蕉束顶病株中获得大小为25nm的病毒颗粒,该病毒与香蕉束顶病毒单克隆兔抗血清呈阳性反应,该病毒核酸可被Dnase和S1核酸酶降解,但不能被RNase降解,属于ssDNA ;人子量大小约为1165碱基。 相似文献
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