马传贫驴白细胞弱毒疫苗株跨膜蛋白主要免疫决定区基因的克隆与表达

从感染驴白细胞的马传贫驴白细胞弱毒疫苗株前病毒DNA中克隆了编码跨膜蛋白主要免疫决定区(TMIR)的基因，并在大肠杆菌中进行了表达。所表达的融合蛋白有一部分是可溶的，其氨基端带有6个组氨酸的标签，因此可以用固定化金属离子亲和层析法在非变性条件下进行纯化。在间接酶联免疫吸附试验(ELISA)和免疫印迹试验中，重组的TMIR蛋白可与马传贫阳性血清样品发生反应，而与健康马血清无任何反应。这表明该重组蛋白具有良好的抗原性和特异性，可用于马传贫弱毒疫苗株在体内外复制、接种马体内免疫应答及马传贫诊断的研究。     

T7 RNA多聚酶基因的克隆、序列测定及其在E.coli中的表达

从BL21(DE3)E．coli菌株中以PCR的方法扩增得到了与T7RNA多聚酶(T7RNApolymerase，T7pol)基因大小一致的DNA片断。将PCR产物纯化后直接克隆到pGEM—T载体中，经酶切鉴定和DNA序列分析表明克隆得到了正确的T7pol基因。将T7pol基因亚克隆入pET-28b( )中，构建得到原核表达质粒pET28T7。该质粒的BL21(DE3)pLysS转化菌在IPTG的诱导下可表达约98800的蛋白，这与T7pol的相对分子质量一致。将该质粒转化DH5α、JMl09、HBl01、BL21(DE3)和BL21(DE3)pLysS等5种不同的宿主菌，仅有转化T7pol酶活性受到抑制的宿主菌BL21(DE3)pLysS才能得到转化子，而其余4种T7T7pol酶活性不受抑制的E．coli宿主菌不能得到转化子。pET28T7原核表达质粒这种仅能在T7pol酶活性受到抑制的宿主菌中才能存活的现象说明本试验所克隆的T7pol基因能正确表达出具有RNA转录酶活性的蛋白。     

人血栓调节蛋白基因的表达及转基因小鼠的建立

用PCR方法从人的基因组DNA中扩增了人血栓调节蛋白（hTM)基因，将其克隆到带有人EF－1α启动子的pEF-neo哺乳动物表达载体上，得到表达质粒pEF-TM。在转染pEF-TM的COS－1细胞中，hTM得到了瞬时表达，并且正确地定位到细胞膜上。用pEF-TM转染猪内皮细胞（PEC），经G418筛先得到稳定转染的克隆。凝血活性测定结果显示，表达hTM的PEC凝血时间明显延长，表明其抗凝血能力增强。通过显微注射方法，得到了1只F0代hTM转基因小鼠。Southern杂交结果表明，该转基因小鼠整合了9个拷贝的pEF-TM DNA,并能将外源DNA遗传给后代。     

Decreased transport of orally administered protein into the blood circulation of developing juveniles of Japanese eel Anguilla japonica

ABSTRACT: To clarify the quantitative changes in the transport of orally intubated protein into the blood circulation as macromolecules in development, immunoglobulin Y (IgY) extracted from chicken eggs was administered orally to juvenile Japanese eel, Anguilla japonica . For the first experiment, which was performed before the commencement of artificial feeding, the oral delivery of 2.0 μg/0.1 g bodyweight of IgY resulted in a rapid increase in plasma IgY to a maximum of 2.30 μg/mL. However, the transport of IgY into the blood decreased significantly in the experiments that followed, which were performed after 12, 25 and 42 days. During this period, bodyweight increased approximately by a factor of eight, and rapid growth of the stomach was observed histologically. Possible contributions for the development of the alimentary canal to the diminishment of intestinal protein assimilation are discussed.     

Changes in Endopeptidase Activity during Photosynthetic Declination in Rice Leaf

Two japonica rice varieties, Wuyujing 3 and 97-7, were used to study the changes in contents of soluble protein, free amino acids and endopeptidase activity during photosynthetic declination. The content of soluble protein in flag leaf of cv.Wuyujing 3 was higher than that of cv. 97-7, but decreased rapidly in Wuyujing 3. Free amino acids in flag leaf and the thirteenth leaf of Wuyujing 3 started to increase 10 days before the turning point of photosynthetic declination (TPPD), while it occurred just 1-2 days before TPPD in the flag leaf and the thirteenth leaf of 97-7. During reversible phase of photosynthetic declination,endopeptidase activity remained at a low level and increased slightly only in the later part of this phase. Then it rose up rapidly at irreversible decline phase and reached a very high level. For Wuyujing 3, the change in endopeptidase activity in the thirteenth leaf was parallel to that in flag leaf. However, for 97-7, the rapid increase of endopeptidase activity in the thirteenth leaf started later than that of flag leaf. The results implied that the rate of protein breakdown and conversion to transportable nitrogen in leaves of 97-7 was slower than that in leaves of Wuyujing 3 during photosynthetic declination and it led to relatively lower seed setting rate and fully filling grains rate in 97-7. This may be one of the important reasons why 97-7 could not bring the high yield potentiality into play and the findings may be taken into consideration while breeding for high potential varieties in future.     

不同饲养水平下蛋白质与氨基酸在阉牛小肠内消化率的研究

选择6头体重500～600kg ,安装有瘤胃、十二指肠前端和回肠末端瘘管的阉牛 ,分3期饲喂以玉米、棉籽饼和氨化稻草为基础原料配合的3种不同饲养水平的日粮 ,测定十二指肠、回肠和粪便中的粗蛋白质和各种必需氨基酸流量 ,计算粗蛋白质、真蛋白、总必需氨基酸、总非必需氨基酸和各种必需氨基酸在小肠内的表观消化率。结果显示 :随着饲养水平的下降 ,粗蛋白质、真蛋白、总必需氨基酸、总非必需氨基酸和亮氨酸、蛋氨酸、色氨酸、缬氨酸、胱氨酸的小肠表观消化率逐渐降低(P<0.05)。在每种饲养水平下 ,真蛋白的小肠表观消化率均大于粗蛋白质 (P<0.05) ;各种必需氨基酸的小肠表观消化率均有差异 ,精氨酸和亮氨酸的小肠消化率通常比真蛋白高 ,色氨酸和苏氨酸的小肠消化率比真蛋白低 ,但各种必需氨基酸的小肠表观消化率并没有一致的大小顺序。与日粮相比 ,十二指肠中的必需氨基酸组成发生了较大的变化 ;与回肠流量相比 ,粪便中的必需氨基酸排泄量也发生了较大的变化。     

13～18周龄笼养蛋鸭适宜蛋白质和蛋氨酸水平的研究

用 32 4羽满 1 2周龄的金定鸭 ,通过饲养试验、代谢试验、屠宰试验和对试鸭产蛋期 (1 9～ 2 8周龄 )产蛋性能的观察 ,研究了在等能条件下(ME :1 1 51MJ/kg) ,不同蛋白质水平 (CP :1 3 %、 1 5 %、 1 7% )和蛋氨酸水平 (Met/CP :0 0 1 7、 0 0 2 2、 0 0 2 7)组成的 9种饲粮对 1 3～ 1 8周龄笼养蛋鸭的生长性能、养分利用、体成分沉积和产蛋期产蛋性能的影响。结果表明 :该阶段饲粮粗蛋白、蛋氨酸水平对体增重影响不显著 (P >0 0 5) ;体增重与蛋氨酸 (% )呈一定的正相关 (r=0 4574) ;CP为 1 3%、Met/CP为 0 0 2 7组采食量一直较稳定、较高 ,且饲料效率又好。代谢试验 :不同粗蛋白、蛋氨酸水平饲粮对试鸭氮存留率和能量的利用率影响显著(P <0 0 5或P<0 0 1 ) ,且它们随饲粮CP水平的升高而降低 ,随蛋氨酸水平升高而升高 ;磷的利用率也分别以CP为 1 3%的水平和Met/CP为 0 0 2 7的水平极显著地高于其他水平对磷利用率 (P <0 0 1 )。屠宰试验 :当Met/CP为 0 0 2 7时 ,体氮沉积量和体磷沉积量最佳。产蛋性能 :开产日龄和高峰日龄与 1 3～ 1 8周龄CP食入量呈弱的负相关 (r=- 0 1 83 3和r=- 0 0 984) ,与蛋氨酸食入量呈正相关 (r =0 5780和r =0 435 0 )。饲粮粗蛋白、蛋氨酸水平对 1 9～ 2 8周龄     

柠檬酸废液深层培养双孢蘑菇菌丝蛋白的研究

柠檬酸工业废液中含有一定有效物质,如糖类、蛋白质、矿物质等,可供微生物利用。本文介绍了利用废液深层培养双孢蘑菇菌丝蛋白的可能性及条件。并用1吨发酵堆进行生产试验,探讨了生产工艺条件,分析了发酵液中底物、产物的动态变化。双孢蘑菇菌丝蛋白培养温度25℃,底物 pH6,发酵周期6天,菌球直径1～3mm,菌球数量4.8×10~3个/ml,菌丝温重达底物量的29.3%。在上述条件下,发酵液中菌球直经、菌丝数量、发酵液粘度受生物剪切作用的影响,粘度大,剪切作用大,菌球直径小,菌球数量则多。本文为新型单细胞蛋白的开发,促进物质的多层次利用,消除环境污染,提供了一个新途径。     

编码EIAV核输出因子蛋白Rev的cDNA克隆和序列测定

EIAV在繁殖过程中涉及到多种转录因子的调节，其中Rev蛋白是病毒编码的转录后调节因子，决定了病毒复制由早期到晚期的过渡，Rev是非结构蛋白，由病毒基因组全长转录产物经多次拼接而成。本研究使用EIAV疫苗毒感染驴巨噬细胞培养物，在病毒增殖早期提取总RNA，反转录后使用EIAV特异引物扩增病毒基因组拼接产物，将扩增产物克隆后经过核苷酸序列分析，通过与基因组全序列的比较，确定了编码Rev蛋白的病毒基因组转录产物的编码序列和拼接位点。     

永丰草地的类型及其生产力评估

本文描述了甘肃省天祝县永丰草地的主要草地类型、生产能力及利用模式。研究工作显示,草地改良措施,对不同植被的生物量分布,将产生显著的效果。灌溉和施肥,将促进河谷草甸的地下生物量向地上生物量的转化过程。灌溉可使河谷草甸中禾草组分的增加超过50％,使产草量增加50％～100％。上年秋天和当年春天土壤的含水量,是全年产草量的决定因素,其对产草量的重要性超过全年平均降水量的影响。除了植被组分、产草量的变化外,河谷草地在可消化粗蛋白、可消化能、代谢能等方面也有重大变化,9月份与4月份相比,这三项指标分别高出376％、86％和86％。不同年龄组的绵羊饲料消耗显示,7岁羊的饲料消耗是10月龄羊的17倍;但是7岁羊的胴体重量仅是10月龄羊的2倍。根据永丰滩草地、饲草、家畜的这些特点,当地的畜牧业,不应当在毫无经济意义的情况下,保持太多的牲畜头数,优化畜产品生产的最好方法,就是实行季节畜牧业。季节畜牧业(其中繁殖母羊数达67％)与其他草地改良措施相结合,将使该地区单位面积上的绵羊的产肉量提高4.9倍。