克氏原螯虾幼体发育时期消化酶活力及氨基酸含量研究

采用生物化学方法对克氏原螯虾各期幼体消化酶活力与氨基酸组成进行了分析。实验结果显示,在克氏原螯虾幼体发育过程中,五种消化酶活力(胃蛋白酶、类胰蛋白酶、淀粉酶、纤维素酶和脂肪酶)表现出两种变化模式:胃蛋白酶和类胰蛋白酶在幼体发育Ⅱ龄幼体期和Ⅳ龄幼体期活力较高,其中Ⅳ龄幼体期该两种酶活力最高;淀粉酶、纤维素酶和脂肪酶活力为先增高后降低,在Ⅲ龄幼体期,三种酶的活力达到最高,但与Ⅳ龄幼体期的酶活力比较无显著差异。总氨基酸含量在幼体发育早期逐渐降低,幼体发育至Ⅲ龄幼体期,其氨基酸含量最低,Ⅳ龄幼体期又有所增加。在测定的所有氨基酸中谷氨酸含量最高,必需氨基酸中赖氨酸含量最高,单个必需氨基酸含量与必需氨基酸总量的比值(A/E)在整个胚胎发育过程中的变化趋于一致。     

Mitochondrial NAD(P)-dependent malic enzyme from herring testicular tissue: Purification,kinetic behaviour and regulatory properties

Mitochondrial NAD(P)-dependent malic enzyme [EC 1.1.1.39, L-malate: NAD⁺ oxidoreductase (decarboxylating)] was purified from herring testicular tissue to a specific activity of 26.4 μmol NADH/min/mg protein. Herring testicular tissue is one of the most abundant sources of this enzyme. The purification procedure involved differential centrifugation of mitochondria and then chromatography on DEAE-Sephacel, Red Agarose and Sephacryl S-300. This enzyme catalyzes the oxidative decarboxylation of malate in the presence of Mn²⁺ and either NAD or NADP. Under V_max conditions the ratios for the rate of NAD/NADP reduction was 1.8. A study of the reductive carboxulation reaction indicated that this enzyme reaction is reversible; at pH 7.0 the reverse reaction exhibited 22% of the activity of forward reaction. Some kinetic characteristics of the enzyme were determined. ATP was found to be a competitive inhibitor with respect to malate. Fumarate reversed ATP inhibition. Regulation of NAD(P)-dependent malic enzyme from herring testicular tissue mitochondria could respond to changing levels of mitochondrial ATP and fumarate in vivo.     

中华绒螯蟹胚胎发育过程中的消化酶活力及氨基酸组成

采用生物化学方法测定了中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)胚胎发育过程中7个发育期的5种水解酶(类胰蛋白酶、胃蛋白酶、淀粉酶、脂酶和纤维素酶)活力和氨基酸的组成。结果表明，胚胎发育各阶段消化酶活力及氨基酸组成的变化与其发育关系密切。在整个胚胎发育过程中，类胰蛋白酶、胃蛋白酶和纤维素酶的活力呈“高-低-高”的变化趋势，脂酶则呈现逐渐上升的趋势，而淀粉酶的变化趋势不明显。但在原蚤状幼体期，5种酶的活力均显著升高，这与孵化后幼体开口摄食的自身调控机理有关。可溶性蛋白质的含量呈“低-高-低”的变化趋势，明显与相关酶的活力有关。氨基酸含量在前6期变化不大，在原蚤状幼体期显著下降。所有氨基酸中，谷氨酸的含量最高；必需氨基酸中以亮氨酸的含量最高，并且单个必需氨基酸含量与必需氨基酸总量的比值(A／E)在胚胎发育不同阶段略有差异，但基本趋于一致。     

过饱和溶氧对大菱鲆生长及消化酶的影响

探讨工程化养殖中过饱和溶氧对大菱鲆生长的影响,通过充入液态氧与空气,使试验水体的溶氧分别达到过饱和溶氧水平(12±1)mg/L和(14±1)mg/L,正常溶氧水平(7.0±0.5)mg/L.结果显示,过饱和溶氧组的大菱鲆生长速度及饵料利用率明显高于正常溶氧组(p<0.05),而在过饱和溶氧条件下与正常溶氧条件下大菱鲆的丰满度无显著差异(P>0.05).对大菱鲆胃、肠道消化酶、脂肪酶与淀粉酶的分析发现,大菱鲆胃蛋白酶活性在过饱和溶氧条件下较正常溶氧有明显提高(p<0.05),而脂肪酶与淀粉酶的酶活力未得到显著性提高(p>0.05).     

用IGF—ⅠmRNA表达量评价鲮饲料配方效果的研究

试验以秘鲁鱼粉为饲料蛋白源,研究4种蛋白水平（21．5％、32．2％、42．5％和51．6％）的饲料对鲮（Cirrhinus molitorella）生长、消化酶活性及类胰岛素生长因子（IGF—Ⅰ）mRNA表达水平的影响。经过8周的养殖试验,不同饲料蛋白水平下,蛋白酶活性与特定生长率（SGR）成极显著的正相关性（P〈0．01）;鲮肝组织中IGF—ⅠmRNA的表达量与特定生长率成极显著正相关性（P〈0．01）;鲮肝组织IGF—ⅠmRNA的表达量与蛋白酶活性也成极显著正相关性（P〈0．01）。结果表明,用鲮肝组织IGF—ⅠmRNA的表达量可以快速鉴定饲料的质量。     

增氧对池塘沉积物酶活性的影响

比较研究了微孔和机械2种增氧养殖模式下4种沉积物酶活性的动态变化,并分析了所测酶活性与养分因子的相关性。结果表明：（1）4种酶活性随水温的季节性变化较为明显,其中蛋白酶活性与脲酶活性变化呈单峰状曲线,蔗糖酶各月波动较大,过氧化氢酶活性整体呈上升趋势。（2）池塘沉积物中酶活性对不同增氧方式有明显的响应,2种增氧均可提高4...     

饲料糊精水平对暗纹东方鲀幼鱼生长、消化酶活性和血液生化指标的影响

配制等蛋白质(42%),等脂肪(9%),糊精水平分别为10%、15%、20%、25%、30%的5组饲料,饲养暗纹东方鲀幼鱼[初始体质量为(10.25±0.51)g]60 d,考察饲料中不同糊精水平对其生长、消化酶活性和血液生化指标的影响。结果发现,随着饲料糊精水平的升高,暗纹东方鲀幼鱼的特定生长率和饲料效率先增加后降低,25%组最高,并显著高于10%和15%组。30%组鱼的脏体比和肝体比显著高于10%组,同时其肝脂肪含量也显著高于其他组。10%组的肝糖原和血浆总氨基酸含量显著低于其他组。10%和15%组鱼的肝胰脏和肠道中淀粉酶活性显著低于其他实验组,而其肝胰脏中胰蛋白酶活性显著高于30%组。25%和30%组的血浆总胆固醇和甘油三酯含量显著高于10%和15%组。10%和15%组的血浆尿素氮含量显著高于其他实验组。15%和20%组的血细胞数量显著高于其他实验组。30%组的细胞凋亡率及细胞内活性氧(ROS)和钙离子(Ca2+)含量显著高于其他实验组。饲料糊精水平对暗纹东方鲀幼鱼的血糖含量、血浆谷草转氨酶和谷丙转氨酶活性及肝胰脏和肠道中脂肪酶活性无显著影响。在本实验条件下,暗纹东方鲀幼鱼饲料中糊精的适宜水平为20%～25%。     

不同开口饵料对克氏原螯虾幼虾发育及消化酶活性的影响

实验采用丰年虫无节幼体、草鱼鱼糜、水蚯蚓、1号人工配合饲料和2号人工配合饲料为克氏原螯虾的开口饵料,观察幼虾存活率和生长情况。经过40d的培育,对幼虾的胃蛋白酶、胰蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶的活力进行测定。结果表明：投喂丰年虫无节幼体的实验组幼虾存活率最高,为75,增重率和增长率也最大,分别为4746.00和171.00。幼虾的胃蛋白酶活性与投喂的饵料密切相关,投喂丰年虫无节幼体组幼虾的胃蛋白酶和胰蛋白酶活性分别为2.18U/mgprot和0.96U/mgprot,极显著高于投喂草鱼鱼糜实验组。实验的5种开口饵料中,丰年虫无节幼体是克氏原螯虾幼虾的最佳开口饵料。摄食丰年虫无节幼体可能提高了主要消化酶的活性,从而促进了克氏原螯虾幼体的生长。     

抑食金球藻对翡翠贻贝抗氧化酶系统的影响

本研究以单种抑食金球藻及其与亚心形四爿藻的混合藻为实验组,以亚心形四爿藻为对照,探究抑食金球藻对翡翠贻贝超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)和谷胱甘肽(GSH)含量的影响。结果显示,抑食金球藻显著影响翡翠贻贝的SOD活性、MDA和GSH含量,各实验组均表现出诱导升高与抑制降低交替出现的规律。单种高、中浓度的抑食金球藻在短期(3 h)内即可对翡翠贻贝的SOD活性产生影响,混合藻组中的SOD活性上升较慢,说明亚心形四爿藻可以延滞氧化还原系统的反应时间。各实验组翡翠贻贝GSH含量在2 d内均显著低于对照组,且混合藻组与单种抑食金球藻组相差不大,提示亚心形四爿藻对抗氧化还原损伤并未起到明显的缓解作用。     

Pectin purified from pomelo (Citrus maxima) peel as a natural hatching agent for fish embryos

Pectin is a biodegradable polysaccharide, and it has been recently applied as a gene delivery, drug delivery, wound healing and tissue engineering agent. In this study, pectin was extracted from pomelo (Citrus maxima) peel and characterized. The extraction recovery of pectin form pomelo peel was 14.5%, and it had 72.56% degree of esterification, 1,245.56 equivalent weight, 7.82% methoxyl and 68.27% anhydrouronic acid contents. Use of pomelo pectin as a hatching enhancing agent for fish embryos and its effect on hatching enzyme 1 (ZHE1) was investigated. The pectin‐exposed zebrafish embryos (100 µg/ml) showed significantly (p < .05) higher hatching rate (96.6%) compared with untreated (control) embryos (66.6%) at 60 hpf. The mRNA expression of ZHE1 was also significantly (p < .05) elevated up to 55.6‐fold in pectin‐exposed embryos at 24 hpf. In situ hybridization results revealed remarkably strong expression of ZHE1 in pectin‐exposed embryos compared with the control group. In addition, considerably larger size of the hatching gland was observed in pectin‐exposed larvae than that of the unexposed larvae group. These results clearly indicate that pectin isolated from pomelo peel has an ability to enhance the hatching process of zebrafish embryos via upregulation of ZHE1.