抗黄颡鱼“红头病”功能性蛋粉的制备及其应用

为了评价抗爱德华氏菌(Edwardsiella ictaluri)的特异性Ig Y的功能性蛋粉在黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco)"红头病"预防及治疗中的应用效果,采用灭活的爱德华氏菌(菌种保藏号:CCTCCNO:M2012024)免疫蛋鸡,通过微包膜及高速离心喷雾干燥技术制备抗爱德华氏菌的特异性Ig Y的功能性蛋粉,采用泼洒和口服两种方式检测该功能性蛋粉对黄颡鱼的免疫保护率。结果显示,所制备的功能性蛋粉抗体效价达到1∶5120;以剂量为2 mg/L功能性蛋粉连续泼洒水体3 d或以饲料重量0.2%的剂量口服14 d后,再用浓度为2.0×107CFU/m L的致病性爱德华氏菌对健康黄颡鱼进行攻毒,泼洒和口服功能性蛋粉对黄颡鱼的免疫保护率分别为85.5%和70.0%;对人工感染爱德华氏菌后患病的黄颡鱼养殖水体连续泼洒5 d或投喂14 d功能性蛋粉,其对黄颡鱼的免疫保护率分别为67.2%和40.7%,表明制备的功能性蛋粉对黄颡鱼"红头病"有很好的预防和治疗效果。     

禽流感血凝抑制试验中鸭血清非特异性凝集因子去除方法研究

为解决在鸭禽流感血凝抑制试验中鸭血清与鸡红细胞的非特异性凝集,影响抗体效价的准确性,采用10 mL/L鸭红细胞直接测定法和50 mL/L鸡红细胞吸附法进行非特异性去除试验,并对结果加以比较。结果表明,10 mL/L鸭红细胞直接测定法检测血清无须前处理,具有操作简便、耗时短的优点,可用于大量样本的检测。在进行小样本、高精度要求的检测时,适宜使用50 mL/L鸡红细胞吸附+鸭细胞测定法,以更有效去除非特异性反应。     

Effects of Jerusalem artichoke powder on the growth performance,nonspecific immunity,and gastrointestinal microbiota of sea cucumber

This study investigated how Jerusalem artichoke powder (JAP) affected the growth, immunity, and gut microbiota of the sea cucumber, Apostichopus japonicus Selenka. Animals were fed diets containing antibiotic (1 ppm) or five levels of JAP (0, 2.5, 5, 10, and 15 g/kg). After the feeding trial, three sea cucumbers were sampled per tank to assay for immunity and gut microbiota composition. Dietary supplementation of 2.5 g/kg JAP significantly improved the growth rate and phenoloxidase activity of sea cucumbers. The diet containing 5 g/kg of JAP increased the survival rate and phagocytic activity, and the diet containing 15 g/kg of JAP increased the growth rate and total coelomocyte count of sea cucumbers. Moreover, exposure to antibiotics significantly changed the microbiota of sea cucumbers, while the JAP supplementation stimulated the development of microbiota communities, which could be more homogeneous. Supplementing the diets with 15 g/kg of JAP increased the growth of Rhodobacterales, and this may underlie the higher growth rate of sea cucumbers in this treatment. Considered together, our results suggest that supplementing the diet of sea cucumber with JAP may be beneficial for nonantibiotic farming of sea cucumber.     

光合细菌PS2对尖吻鲈的生长、消化酶及非特异性免疫酶的影响

研究了光合细菌对尖吻鲈（Latescal carifer）的生长、消化酶及血清免疫酶活性的影响。把浓度为8×10^8cfu·mL^-1的荚膜红假单胞菌（Rhodopseudomonas capsulate）的液体制剂分别以0．0％（对照组）、0．5％、1．0％和1．5％的比例添加到饲料中,投喂初始体质量为（10．95±0．25）g的尖吻鲈50d。鱼的增重率、特定生长率、成活率及饲料系数在组间均没有显著性差异（P〉0．05）。肝蛋白酶、肠淀粉酶及胃淀粉酶在1．0％组显著高于对照组（P〈0．05）;肠蛋白酶在1．5％组显著低于1．0％组（P〈0．05）,但试验组与对照组间没有显著性差异（P〉0．05）;幽门垂的消化酶在1．5％组显著高于其他各组（P〈0．05）。血清碱性磷酸酶（AKP）、过氧化物酶（POD）和超氧化物歧化酶（SOD）的活性在组间均没有显著性差异（P〉0．05）。结果表明,该株光合细菌对尖吻鲈的生长及非特异性免疫力没有显著影响,但在1．5％组能显著促进其幽门垂消化酶的活性,在1．0％组显著促进肝蛋白酶及肠和胃淀粉酶的活性。     

饲料菜粕水平对吉富罗非鱼幼鱼生长、肝脏组织结构和部分非特异性免疫指标的影响

分别用15.0%(对照组)、30.0%、45.0%、60.0%、75.0% 的菜粕配制5种等氮(粗蛋白质为34.0%)等能(总能为19.2 kJ/g)饲料,饲养吉富罗非鱼幼鱼［初始体质量(4.82±0.46) g］10周,考察饲料中不同菜粕水平对吉富罗非鱼生长、肝脏组织结构和部分非特异性免疫指标的影响。结果表明,吉富罗非鱼的增重率、特定生长率、饲料效率和蛋白质效率随着菜粕水平的增加呈下降趋势,且60.0%和75.0%组显著低于对照组(P<0.05),30.0% 和45.0% 组与对照组无显著性差异(P>0.05);各处理组之间的肝体比、脏体比和成活率无显著性差异(P>0.05)。吉富罗非鱼全鱼营养成分,60.0% 组粗蛋白质含量显著高于对照组(P<0.05),60.0%组粗脂肪含量显著低于30.0%(P<0.05),各处理组水分和灰分无显著性差异(P>0.05)。吉富罗非鱼肝细胞核偏移和空泡变性的数量随着菜粕水平的增加逐渐增加,肝脏组织结构受损程度加剧。血清碱性磷酸酶活性随着菜粕水平的增加不断升高,且75.0%组显著高于对照组(P<0.05),血清超氧化物岐化酶活性随着菜粕水平的增加而下降,60.0%组最低,与对照组差异显著(P<0.05)。在本试验条件下,吉富罗非鱼幼鱼饲料中菜粕的使用量不宜超过45.0%。     

猪硒蛋白W的原核表达及IgY多克隆抗体制备

试验旨在优化硒蛋白W （selenoprotein W，SelW）的原核表达系统，并评估SelW的免疫原性和基于IgY抗体检测猪体内SelW的可行性。将获得的猪SelW基因序列密码子进行优化、合成并连接至pET-32a （+）表达载体中，构建原核表达重组质粒pET32a （+）-SelW，转化E.coli BL21（DE3）宿主菌中，进行IPTG诱导表达，SDS-PAGE鉴定重组猪SelW的表达情况，并免疫产蛋鸡制备抗SelW的IgY多克隆抗体，通过间接ELISA检测IgY抗体滴度，采用Western blotting检测IgY识别抗原的特异性。SDS-PAGE结果显示，SelW基因在原核细胞中成功表达，得到了大小约为33 ku的重组蛋白，IPTG最佳诱导浓度及时间分别为0.5 mmol/L和6 h；可溶性分析结果显示，重组蛋白SelW主要以包涵体形式存在。间接ELISA检测结果显示，免疫后45 d的IgY多克隆抗体的效价可达1：51 200。Western blotting检测结果显示，重组蛋白具有良好的免疫原性，所制备的IgY抗体与SelW的亲和力较高。本试验成功构建并优化了SelW蛋白的原核表达系统，提高了SelW蛋白的表达量，获得了具有良好免疫原性的SelW蛋白，制备的IgY抗体能特异性识别猪肌肉组织中的SelW，可用于检测猪组织中SelW的表达、预防硒中毒和缺硒性疾病的监测等，为进一步探究SelW的生物学功能奠定基础。     

卵黄抗体提取方法及其在畜禽细菌性肠道疾病防治中的应用

细菌性肠道感染是畜禽养殖过程中的常见疾病，易引起畜禽采食量下降、生产性能降低等问题，严重者甚至造成死亡。在养殖过程中多采用抗生素对其进行治疗，但由于抗生素长期大量使用，特别是不合理使用，使药物残留和细菌耐药性问题日益凸显。因此，发展安全可靠的抗生素替代品已然成为当今畜牧行业的研究热点。卵黄抗体（egg yolk immunoglobulins，IgY）是通过免疫接种产蛋鸡后，在蛋黄中表达的一种免疫球蛋白，可用于相应疾病的预防和治疗。IgY具有产量大、性质稳定、安全高效等诸多优点，目前IgY作为抗生素替代品已被广泛用于畜禽养殖过程中，并取得了显著的效果。文章介绍了IgY的分子结构、理化性质和作用机理，总结并比较了5种IgY提取方法的去脂率、抗体效价、总蛋白含量等指标，最后详细介绍了IgY在防治畜禽常见细菌性感染中的研究现状和应用前景，以期为IgY的高效生产及疾病防治提供研究依据和技术支持。     

稀释倍数和处理时间对水稀释法提取鸡卵黄抗体的影响

就稀释倍数、处理时间对水稀释法提取鸡卵黄免疫球蛋白的影响进行了探讨,单因素试验结果表明:①处理时间分别为2.5,4.5,6.5,8.5和10.5 h的各个处理所提取的卵黄免疫球蛋白含量之间差异不显著;这5个处理的结果与0.5 h所提取的抗体数量差异极显著。②分别作1∶2,1∶4,1∶6,1∶8稀释处理,所提取的卵黄免疫球蛋白含量之间差异不显著;1∶9和1∶10两个处理所提取的卵黄免疫球蛋白量差异也不显著;1∶2,1∶4,1∶6,1∶8四个处理结果与1∶9和1∶10的两个处理之间差异极显著。③卵黄经2倍以上稀释其免疫球蛋白几乎都存在于稀释液中,沉淀中含量极低。     

中药多糖保护剂对免疫球蛋白制剂耐热性影响的研究

中药多糖保护剂可以有效地抵抗多克隆IgY(免疫球蛋白制剂)在75℃加热条件下的热变性,从而保证了IgY制剂的效价在加工、贮存、运输和使用时能够稳定可靠,不会因环境温度变化而受到任何影响。为IgY制剂的产业化生产和市场化运营提供了扎实的理论基础。     

复方中草药对AA肉鸡非特异性免疫的影响

以复方中草药作为饲料添加剂按一定比例添加到AA肉鸡日粮中,通过检测血清中溶菌酶、总蛋白和白蛋白等免疫学指标,研究其对AA肉鸡非特异性免疫功能的影响。结果表明,在肉鸡日粮中添加不同比例的复方中草药可以显著提高AA肉鸡血清的溶菌酶水平以及总蛋白和白蛋白的含量。在日粮中添加复方中草药2%、4%,溶菌酶和白蛋白的含量分别比对照组提高87.9%、70.5%和12.74%、14.95%;在日粮中添加2%复方中草药,总蛋白水平比对照组提高5.73%。综合考虑,AA肉鸡饲料中复方中草药添加量以2%为宜。