猪瘟病毒E2基因主要抗原区原核表达载体的构建及表达

用RT-PCR技术对猪瘟兔化弱毒C株、石门强毒株(Shimen)、近期地方流行的属于第1群毒株的新疆毒株(XJ)和第2群代表毒株甘肃临洮(LT)株E2基因的主要抗原区进行扩增，均得到约561bp的基因片段；经克隆测序及序列分析，该基因编码187个氨基酸残基，预计蛋白分子质量为21.7ku。将这4个基因分别克隆到原核表达载体pGEX-4T-1中，经酶切、PCR扩增和测序分析确证其正确插入到表达载体中，阅读框是正确的，从而构建成重组表达载体。重组质粒转化至宿主菌BL21(DE3)中，用异丙基硫代-β-半乳糖苷(IPTG)进行诱导表达，对表达的蛋白用SDSPAGE电泳、免疫印迹和薄层凝胶扫描分析。结果表明，E2基因的主要抗原区可以在大肠埃希氏菌中表达，表达的蛋白多以包涵体形式存在，表达产物的分子质量约为50．0ku，与理论推测的分子质量一致；薄层凝胶扫描分析表明。表达蛋白约占菌体蛋白总量的20．1％；免疫印迹结果证明，表达的E2蛋白可被猪瘟阳性血清所识别。     

山羊痘病毒贵州分离株P32基因的克隆及序列分析

山羊痘(goat pox)是由羊痘病毒属(capripox-virus)山羊痘病毒(goat poxvirus,GPV)引起的一种主要危害山羊的高度接触性传染病[1]。本试验应用PCR技术,从山羊痘病毒DNA中扩增P32基因,通过pMD18-T克隆载体转化到DH5α工程菌中,并进行重组质粒的鉴定,旨在探索山羊痘病毒贵州株与国     

利用线粒体COI序列快速检测狐源性成分

狐狸是一种重要的经济皮毛动物,养殖业十分发达.选择狐狸线粒体COI基因序列,设计特异性引物和探针,经条件优化和验证,建立狐狸成分的实时荧光PCR检测方法.该方法灵敏度高,检测限可达12 fg DNA,而且与常见的猪、牛、羊、犬以及大豆、玉米等其他物种无交叉反应.该方法可作为食品和饲料中狐狸源性成分鉴别检测的有效方法,也可作为狐狸皮毛真伪鉴别的方法.     

血清2型猪链球菌河南分离株毒力基因的鉴定及其cps2j全基因序列分析

为了解血清2型猪链球菌(S.suis2)河南分离株的毒力基因型及cps2j全基因突变情况,本研究扩增S.suis2毒力基因gdh、cps2j、mrp、ef 、sly、orf2和fbps,并对s.suis2的cps2j进行全基因序列测定和同源性分析.结果表明,gdh、cps2j、mrp、ef、sly、orf2和fbps基因在8个S.suis2分离株中的检出率分别为100％(8/8)、100％(8/8)、62.5％(5/8)、75％(6/8)、87.5％(7/8)、100％(8/8)和100％(8/8);其中cps2j全基因核苷酸及推导的氨基酸序列与来源不同的S.suis2分离株同源性分别达98％和97％以上,以该基因构建的系统发育树表明8株S.suis2河南分离株与国内外不同参考株同源性高,亲缘关系密切.     

鸡传染性喉气管炎病毒姻台株gB基因的序列测定及其结构功能分析

研究以鸡传染性喉气管炎病毒（ILTV）烟台株为模板，PCIK扩增出1条约2．7的gB基因片段，并将其克隆到pMD18-T载体中。序列测定显示，gB基因长2622bp，包含完的阅读框架。序列比较分析发现，烟台株和王岗株、河北株的班基因核苷酸序列与SA2株的比均在第89位上缺失1个碱基G，而在第102位核苷酸处插入1个碱基A，从而引起氨基酸序中第29-32位5个氨基酸的移码突变。烟台株还有另外7个碱基发生突变，使得其班基因与北株、王岗株、SA2疫苗株的gB基因核苷酸同源性分别为99．8％、99．7％和99．6％，氨基酸的同性分别为99．4％、99．4％、98．9％，表明不同ILTV毒株之间gB基因是非常保守的。划型相列河源     

一起猪伪狂犬病的诊治

<正>猪伪狂犬病是由伪狂犬病病毒(PRV)引起猪的一种以繁殖障碍为主要症状的病毒性传染病,其典型症状为发热及脑脊髓炎。猪伪狂犬病病毒可致母猪流产、死胎,公猪不育等繁殖障碍性病症,哺乳仔猪发生脑脊髓炎、败血症等症状,侵害消化系统引起仔猪严重腹泻,成年猪常为隐性感染,可有呼吸道症状[1]。2014年10月,某猪场发生猪体温升高,母猪流产,仔猪腹泻和运动功能失调为特征的疫病,发病急,死亡率高。根据临床症     

高温干旱胁迫下水稻花器官中敏感基因的筛选及试验研究

选择40粒中N22 (Nagina22)水稻种子作为观察组,对其进行浸种、室温催芽后播种于试验田,并在抽穗之前放于高温环境中。另选择40粒中N22 (Nagina22)水稻种子作为对照组,任其自然生长,分析高温胁迫下水稻花器官中超氧化物歧化酶、过氧化物酶、丙二醛与脯氨酸、可溶性糖与可溶性蛋白、激素含量等各项指标变化。实验结果表明,观察组在花器官进入花粉母细胞减数分裂后3 d、 5 d、 15 d超氧化物歧化酶活性均显著低于对照组,P<0.05。观察组在花器官进入到花粉母细胞减数分裂后3 d、 5 d、 15 d氧化物酶活性均显著低于对照组,P<0.05。观察组丙二醛、脯氨酸指标均高于对照组,P<0.05。观察组可溶性糖、可溶性蛋白均高于对照组。观察组玉米素、生长素指标低于对照组,水杨酸、脱落酸指标高于对照组,P<0.05。观察组miRNA靶基因中miR414、 miRNA394、 miR397b、 miR3507b均低于对照组,P<0.05。结论：高温干旱胁迫下水稻花器官中敏感基因的筛选可以对影响因素进行分析,研究其生理机制,测试出敏感基因,对于植株的优化...     

植物香豆素生物合成途径及关键酶基因的研究现状

香豆素是广泛存在于自然界的有机杂环化合物,具有抗感染等多种生物活性,是我国许多中草药材中的有效成分,如独活等多种常用中草药含有香豆素衍生物,香豆素类化合物是具有显著生物活性的物质,具有作用机制特殊等特点。香豆素对植物生长发育具有重要作用,许多香豆素化合物在植物中含量较低,对天然香豆素类化合物化学合成成为研究热点。综述香豆素合成途径及关键酶基因研究进展,分析总结香豆素研究问题,展望未来研究方向。     

湖南黑猪RBP4基因与产仔数的相关性分析

以湖南黑猪为研究对象,采用PCR-RFLP技术进行视黄醇结合蛋白4（Retinol-binding proteins 4,RBP4）基因多态性检测,并采用最小二乘分析法分析其对产仔数影响的遗传效应。结果表明：猪群中发现AA、AB和BB 3种基因型,A、B等位基因的频率、多态信息含量、杂合度分别为0.8649、01351、0.3960、0.2337,表明该位点处于中度多态。初产母猪AA型比BB型个体的总产仔数、产活仔数分别多1.66头、1.83头,差异显著（P〈0.05）;经产母猪AA型个体的总产仔数和产活仔数比AB、BB型分别多1.19头、1.48头（P〈0.01）和0.96头、1.22头（P〈0.05）。基因效应分析结果表明,初产、经产母猪在该位点上A等位基因对总产仔数和产活仔数都表现为正效应,各性状分别增加了0.1496头、0.1635头和0.1443头、0.1169头,即A等位基因可能为湖南黑猪繁殖性能的有利等位基因。     

基因缺失高致病性猪蓝耳病弱毒疫苗与猪瘟兔化弱毒疫苗在实验室和田间猪场的联合免疫试验

猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）又称猪蓝耳病,是全球养猪业的头号猪病,给世界养猪业造成巨大的经济损失,美国在2005年的统计显示由PRRS引起的损失为5.6亿美元[1]。同样,蓝耳病也给我国养猪业带来严重危害,尤其是2006年发生的高致病性蓝耳病[2],更是让中国养猪业雪上加霜。