综述式和Seminar教学法在食品专业“分子生物学与生物技术”研究生课程中的应用

从教学内容设计、授课形式、考核模式及结合研究生具体研究课题对食品专业硕士研究生“分子生物学与生物技术”综述式和Seminar教学法进行了阐述。这2种教学方法不仅能够帮助学生全面深入地掌握课程的基本理论知识、熟悉分子生物学研究思路和方法、了解相关研究领域的新进展,并且能够增强硕士研究生对科学研究的兴趣,达到促进研究生科研创新能力培养的目的。     

新型抗广谱性除草剂草甘膦转基因油菜的创制及其鉴定

草甘膦是世界上应用最广泛的广谱性除草剂,目前我国还没有自主知识产权的抗草甘膦油菜品种。本研究利用农杆菌介导的油菜下胚轴遗传转化方法,将新型抗草甘膦基因I.variabilis EPSPS转入甘蓝型油菜品系J9707中,获得了126株阳性转化株,阳性率为97.0%。这些转化单株中的T-DNA插入以单拷贝为主(占44.8%)。通过反向PCR确定了EPS-2、EPS-6和EPS-7等油菜转化体中T-DNA插入位置,并设计转化体特异性引物对它们的T0~T3代材料进行检测,证明了它们的T-DNA在基因组水平上整合的稳定性。RNA和蛋白水平的表达分析证实,I.variabilis EPSPS转基因及其蛋白产物在各转化株系不同世代能够稳定表达。苗期进行不同剂量的除草剂喷施处理发现,EPS-1、EPS-2、EPS-5、EPS-6和EPS-7等株系可耐受4倍田间推荐使用剂量的草甘膦。本研究所创建的新型抗草甘膦油菜种质资源将为我国抗除草剂油菜品种培育奠定了重要基础。     

Effect of nitrogen application rate on content of glutenin macropolymer and high molecular weight glutenin subunits in grains of two winter wheat cultivars

Two winter wheat (Triticum aestivum L.) cultivars differing in grain protein content were selected to study the effect of N application rate on changes in contents of glutenin macropolymer (GMP) and high molecular weight glutenin subunits (HMW-GS) during grain filling. Contents of GMP and HMW-GS were much higher in the high GPC cultivar, Xuzhou 26, than those in low GPC cultivar, Ningmai 9. N increased contents of GMP and HMW-GS in Xuzhou 26 with N rate between 0 and 300 kg ha⁻¹, while at the very high N rate of 300 kg ha⁻¹ the contents of GMP and HMW-GS in Ningmai 9 decreased. The high contents of GMP and HMW-GS at maturity were closely related to the rapid increase in contents of GMP and HMW-GS during the initial period of their synthesis. HMW-GS and GMP content were closely correlated. The total HMW-GS content was important in determining GMP content than the content of any HMW-GS pair or any individual HMW-GS present in the selected cultivars. The pattern of response of GMP content to N application rate was closely related to the regulatory effect of N on HMW-GS synthesis.     

南疆小麦品种(系)的HMW-GS组成及分布

为了给新疆优质小麦品种的选育和改良提供科学依据，应用SDS-PAGE方法对来源于南疆的169个小麦品种(系)的HMW-GS组成与分布进行了系统分析。结果表明，Glu-A1住点有两种等位变异类型Null和1；Glu-B1住点有7、7 8、7 9、6 8、17 18、14 15、21共7种等住变异类型，且主要以7 8和7 9为主；Glu-D1位点有2 12、4 12、5 i0、2 10、2．2 12共5种等位变异类型，且以2 12和5 10为主。本文还研究了这些HMW-GS(或组成)出现的频率和特点。     

藏系绵羊KAP3.2基因多态性及其对部分经济性状的影响

采用PCR-SSCP和DNA测序技术,对高原型、欧拉型和乔科型3个类型共254只藏绵羊KAP3.2基因的部分序列进行多态性分析,并利用最小二乘线性模型研究了其多态性与体质量、毛长和产毛量性状的关联性。结果,3个群体藏绵羊在KAP3.2基因座上均检测到AA、AB和BB 3种基因型,高原型以A等位基因为主,欧拉型和乔科型以B等位基因为主。3个群体基因型频率均处于Hardy-Weinberg非平衡状态,高原型和欧拉型达中度多态,乔科型为低度多态。测序表明KAP3.2基因271 bp处存在1个C→T的突变,属同义突变。体质量性状上,3类藏绵羊各基因型间均差异不显著;毛长性状上,3类藏绵羊AA基因型均显著高于BB型(P<0.05或P<0.01),而与AB型间无显著差异;产毛量性状上,3类藏绵羊AA基因型均显著高于BB和AB型(P<0.05)。结果表明,KAP3.2基因可作为影响藏系绵羊毛长和产毛量性状的分子标记。     

中国地方鸭遗传资源的分子评估与保护利用

论文从分子遗传学的角度对鸭的遗传资源在群体遗传多样性、群体起源、进化及构建遗传图谱等多个方面的评估进行综述,并对分子遗传标记技术在鸭遗传资源的保护利用上的应用进行概述,以期通过现代动物分子育种技术加快鸭的育种进程。     

唐山地区蜱传斑点热群立克次体分子流行病学

根据已发表的长角血蜱16SrRNA序列及斑点热群立克次体外膜蛋白A（OmpA）基因序列设计2对特异性引物,对唐山地区采集的长角血蜱进行PCR检测,并对阳性样本进行测序和序列分析,抽检样本建立分子系统进化树。结果表明,在315份蜱DNA样本中检测出25份阳性样本,阳性率为7.94%;序列分析结果显示唐山地区长角血蜱携带立克次体同处于一个分支,与日本株立克次体同源性最高（93.30%）,其次是福建株立克次体（92.11%）,黑龙江立克次体绥芬株（90.45%）、虎林株（90.42%）。结论得出唐山地区蜱传斑点热感染较严重,分子进化分析结果显示唐山地区蜱传斑点热群立克次体可能为一新种。     

ADSL基因启动子区遗传变异与鸡肉冻藏新鲜度的相关性分析

试验旨在探究鸡腺苷琥珀酸裂解酶（adenylosuccinate lyase,ADSL）基因启动子区多态性及其与鸡肉冻藏新鲜度的相关性。以161只青脚麻鸡为研究对象,通过DNA混池测序法检测ADSL基因启动子区遗传变异。采用等位基因特异性PCR完成个体基因型分析,并分析了各基因型与鸡胸肌肉色、体重及胸肌冷冻60 d后新鲜度K值和pH的相关性。结果显示,在ADSL基因启动子区ATG上游1 670 bp处发现1个SNP位点（c.-1670 C>A）,其AA基因型个体肌肉冷冻60 d后新鲜度K值（23.61%）极显著低于CA（33.00%）和CC（33.56%）基因型（P<0.01）,即冻藏60 d后AA基因型个体肌肉较CA和CC基因型新鲜,CA和CC基因型间新鲜度K值差异不显著（P>0.05）;各基因型间鸡体重、胸肌肉色及胸肌冷冻60 d后pH均无显著差异（P>0.05）。生物信息学预测发现,c.-1670 C>A导致ADSL基因启动子区转录因子结合位点的显著改变,该突变位点可能造成ADSL基因的表达差异。综上,ADSL基因启动子区c.-1670 C>A与青脚麻鸡胸肌冷冻60 d后新鲜度K值具有显著相关性,该位点可作为青脚麻鸡肉品新鲜度的候选分子遗传标记。     

Identification of AFLP Markers Linked to Lr19 Resistance to Wheat Leaf Rust

AFLP analyses were carried out on Thatcher, 23 near-isogenic lines and F2 generation of TcLrl9 × Thatcher, to develop molecular markers for gene Lr19 resistance to wheat leaf rust. Seven markers linked to Lr19 resistance trait were obtained,which were P-AGT/M-GAG289 bp (3.3 cM), P-ACA/M-GGT102 bp (4.1 cM), P-ACA/M-GGT106 bp (4.1 cM), P-AAC/M-CAG123 bp(4.9 cM), P-AAC/M-GGT203 bp (5.0 cM), P-ACA/M-GGT290 bp (5.7 cM), and P-ATC/M-GAG293 bp (9.6 cM). All of these specific fragments were isolated from the polyacrylamide gels, reamplified, cloned, and sequenced. The research may facilitate genetic mapping, physical mapping, and the eventual cloning of Lr19.