高血球粉低蛋白质日粮补充异亮氨酸对仔猪生产性能和血液生化指标的影响

选择42日龄平均体重(11.00±0.07)kg 的三元(杜×长×大)杂交断奶仔猪45头 ,随机分为3个处理 ,分别饲喂 :①20 %蛋白质日粮(含血球粉4.5 % ,异亮氨酸0.64 %) ;②高血球粉(6 %)低蛋白质(16 %)日粮补充赖氨酸、蛋氨酸、苏氨酸和色氨酸(异亮氨酸含量0.41 %) ;③在第2种日粮的基础上进一步补充0.23 %异亮氨酸。试验结果 :在高血球粉低蛋白质日粮中进一步补充异亮氨酸后 ,仔猪日增重和日采食量分别提高81 %(P<0.05)和48 %(P<0.05) ,饲料/增重比降低了19 %(P<0.07)。补充异亮氨酸组与20 %蛋白质组仔猪的生产性能相似。在高血球粉低蛋白质日粮中进一步补充异亮氨酸 ,显著降低了血清尿素氮、氨和游离异亮氨酸含量(P<0.05)。结论 :合理补充合成氨基酸 ,能够节约仔猪日粮蛋白质4个百分点 ;异亮氨酸是血球粉的主要限制因子之一 ,补充异亮氨酸 ,可显著提高血球粉对仔猪的饲用价值     

大鲵虹彩病毒流行株的分离及其主衣壳蛋白编码基因序列比较分析

大鲵虹彩病毒(giant salamander iridovirus, GSIV)是近年中国大陆新发现的引起人工养殖大鲵(Andrias davidianus)大规模死亡的病毒病原。为了揭示大鲵虹彩病毒流行株的基因型差异, 本研究对2010–2012年采集自全国不同大鲵养殖区域的患虹彩病毒病的大鲵样本进行了分子检测、病毒分离培养以及病毒主衣壳蛋白(major capsid protein, MCP)基因测序与比对分析。结果显示, 采自陕西、湖北、湖南、浙江、江西、福建等省的10个样本检测为阳性, 通过细胞培养获得10株病毒流行株。对该10株流行株MCP基因的测序与比对分析发现, 核苷酸序列相似性达到99.7%~100%, 其推测的氨基酸序列无明显差异, 证实中国大鲵虹彩病毒流行株属同一基因型。系统进化树分析结果表明, 所选大鲵虹彩病毒与蛙病毒分别聚为一枝, 但其亲缘关系较近。本研究结果旨为大鲵虹彩病毒病的疫苗研制及其免疫防控技术研究奠定基础。

     

葡萄A病毒外壳蛋白基因克隆及分子变异分析

为获得葡萄A病毒(Grapevine virus A,GVA)外壳蛋白(CP)基因,并为开展GVA-CP介导的抗病毒转基因研究提供基础,本研究从葡萄休眠枝条中扩增获得12个GVA分离物的CP基因序列,全长597nt,编码198个氨基酸。所得分离物间核苷酸和氨基酸序列同源性分别为83.9%~99.8%和92.4%~99.5%,与GenBank中12个GVA CP序列比较,核苷酸和氨基酸序列同源性分别为71.0%~93.1%和81.8%~98.0%。系统进化分析表明,本研究12个分离物CP序列与已报道的GVA Ⅰ组亲缘关系最近。种群变异分析表明,GVA种群具有多种变异体类型,并且多个样品存在不同变异体类型的复合侵染。但绝大多数变异体克隆聚集在GVA Ⅰ组分支,有60%的克隆序列间同源性较高,并且聚集在同一个次级分支Ⅰ Aa,表明其为该GVA种群的优势序列。克隆的GVA CP基因以及优势序列群体的分析为葡萄抗病毒转基因研究奠定了基础。     

中国荷斯坦牛LF基因多态性与泌乳性状及乳腺炎的关联分析

乳铁蛋白（Lactoferrin,LF）是保护乳腺组织的防御因子之一,在机体抵抗乳腺炎方面起着重要作用。本研究采用PCR SSCP技术和测序的方法对宁夏农垦303头中国荷斯坦牛的LF基因进行了遗传多态性分析,利用一般线性模型分析LF基因g.4388G>C位点突变对日产奶量、测定日乳脂率、测定日乳蛋白率及体细胞评分4个泌乳性状的影响。结果显示,LF基因g.4388G>C突变位点与日产奶量、乳脂率和体细胞评分值存在显著关联（P<0.05）。多重比较结果表明,GC基因型个体的体细胞评分（SCS）值极显著低于GG和CC基因型个体（P<0.01）,因此,可尝试将GC基因型作为乳腺炎抗性的优良基因型应用于奶牛育种中。     

黏虫蜜源植物花蜜中游离氨基酸的测定与分析

为探讨黏虫成虫与迁飞中转地蜜源植物的营养关系,利用氨基酸分析仪测定了其蜜源植物油菜和紫云英花蜜中游离氨基酸的种类和含量。结果显示,油菜和紫云英花蜜中都含17种氨基酸,油菜花蜜中游离氨基酸的总含量是紫云英花蜜的2.47倍。紫云英花蜜与油菜花蜜中各游离氨基酸的含量不同。油菜花蜜中除胱氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸、赖氨酸、精氨酸外,其他游离氨基酸的含量均比紫云英花蜜中相应的氨基酸高,其中丙氨酸、酪氨酸、丝氨酸、甘氨酸、天冬氨酸的含量分别是紫云英花蜜的14.36倍、11.35倍、5.70倍、4.69倍、4.11倍。研究还发现,紫云英蜂蜜中氨基酸总量是紫云英花蜜中氨基酸总量的4.29倍,油菜花蜜比油菜蜂蜜多含了胱氨酸和亮氨酸。因此,不能用油菜蜂蜜、紫云英蜂蜜代替油菜花蜜、紫云英花蜜来研究紫云英和油菜花蜜对黏虫的营养效应。     

Haematological modulation and growth of Labeo rohita fingerlings: effect of dietary mannan oligosaccharide,yeast extract,protein hydrolysate and chlorella

The present study was conducted for 60 days to delineate the efficacy of various dietary immunomodulators like mannan oligosaccharide (MOS), yeast extract (YE), protein hydrolysate (PH) and chlorella (CL) in Labeo rohita fingerlings. Five hundred and eighty‐five L. rohita fingerlings (average weight: 4.15 ± 0.07 g) were randomly distributed in 13 treatment groups with each of three replicates. Thirteen semi‐purified isonitrogenous (crude protein 324.7–332.5 g kg^?1) and isocaloric (17.66–17.80 MJ kg^?1) diets were prepared with three graded levels (1%, 2% or 4%) of immunostimulants, except the control. At the end of the feeding trial, weight gain%, specific growth rate, feed conversion ratio, leucocyte count, erythrocyte count, haemoglobin content, serum protein, globulin, albumin–globulin ratio, nitroblue tetrazolium (NBT) value and survival percentage were evaluated. Growth was significantly higher in the MOS‐fed group. All the immune parameters studied were also recorded higher in the MOS 1%‐supplemented group. The survival percentage after challenging with Aeromonas hydrophila was higher (P<0.05) in the MOS‐, YE‐ and PH‐fed groups and the lowest in the CL‐treated group. It can be concluded that dietary supplementation of MOS at a 1% dietary level promotes growth and survival in L. rohita fingerlings. In contrast, higher inclusion levels of immunostimulants led to an immunosuppressive effect in L. rohita fingerlings.     

水稻PHD锌指蛋白cDNA的克隆及其表达分析

利用cDNA-AFLP分析籼稻明恢86应答稻纵卷叶螟取食基因差异表达,发现1个与植物同源结构域(PHD)锌指蛋白高度同源的TDF,分离获得该TDF对应的粳稻全长cDNA.该全长cDNA与籼稻、玉米、蓖麻、葡萄、拟南芥和大豆等作物PHD锌指蛋白推定氨基酸序列的同源性分别为98.43%、86.01%、54.58%57.02...     

副猪嗜血杆菌广东分离株外膜蛋白P5基因的克隆及蛋白结构预测

根据GenBank上发表的副猪嗜血杆菌(HPS)外膜蛋白基因的核苷酸序列设计并合成1对特异性引物,从广东省HPS分离株外膜蛋白P5基因中扩增出与预期设计的1116bp大小相符的片段,将扩增产物连接到pMD18-T载体上,进行序列测定和分析。结果表明,克隆出HPS广东分离株的目的基因,核苷酸长为1116bp,共编码371个氨基酸,与已发表的HPS(SH0165)外膜蛋白基因核苷酸序列同源性100%,氨基酸同源性100%。生物学预测分析结果显示,HPS外膜蛋白是一种混合型结构蛋白,含有α-螺旋、β-折叠、β-转角和无规则卷曲,其β-转角和无规则卷曲区域可能形成抗原表位;其N端含有1个信号肽,最佳切割位点在21～22个氨基酸;有15个抗原决定簇;无跨膜区;同源建模分析,未见相似三维结构。     

橡胶树尖孢炭疽菌绿色荧光蛋白（GFP）标记转化株的获得

建立了根癌农杆菌介导转化橡胶树尖孢炭疽菌(Collectotrichum acutatum)获得T-DNA插入突变体的体系:在尖孢炭疽菌孢子浓度10~6个/mL、农杆菌浓度OD_(600)=0.15～0.2后在200μmol/mL的乙酰丁香酮(AS)诱导6 h,共培养48 h.转化效率可达150～300个/10~6个分生孢子.获得的转化子通过PCR检测绿色荧光蛋白基因、Southern 杂交验证、分生孢子的荧光观察,结果表明:被测转化子基因组中确实整合了目的片段,成功获得了橡胶树尖孢炭疽菌菌株CHY-1绿色荧光蛋白标记转化子.