miR-92a对奶山羊乳腺上皮细胞增殖及凋亡的调控分析

miRNAs是对哺乳动物乳腺组织发育及泌乳机能进行调控的重要因子。本研究依据已有的关中奶山羊乳腺组织miRNA表达谱,选择不同泌乳时期差异表达的miR-92a为研究对象,探究miR-92a对山羊乳腺上皮细胞（GMEC）增殖及凋亡的调控作用,并挖掘其潜在的调控基因。采用荧光定量PCR、MTT检测、EdU检测及流式细胞术,检测miR-92a在不同泌乳时期乳腺组织的表达情况,并在细胞水平检测miR-92a对乳腺上皮细胞增殖、凋亡及细胞周期的调控作用。利用RNA-seq技术,分析过表达miR-92a乳腺上皮细胞中的差异表达基因。qRT-PCR结果显示,miR-92a在奶山羊泌乳初期乳腺组织中表达量极显著高于泌乳中期（P<0.01）,表明miR-92a可能对奶山羊泌乳性状有重要的调控作用。GMEC过表达miR-92a后,试验结果显示：与NC对照组比较,miR-92a过表达组的EdU阳性细胞数极显著减少（P<0.01）,S期的细胞数显著下降、G1期的细胞数显著增加,同时miR-92a组的凋亡细胞数目显著增加（P<0.05）。采用RNA-seq,构建了miR-92a过表达mRNA文库,发现下调基因54个,上调基因160个。GO terms及KEGG通路分析显示差异表达基因调控乳腺上皮细胞多种生物学功能。以上结果表明miR-92a促进GMEC凋亡、抑制其增殖,测序结果进一步证明miR-92a对奶山羊乳腺发育及泌乳性能具有潜在的调控作用。     

Distribution of Tetrodotoxin in Pacific Oysters (Crassostrea gigas)

A potent and heat-stable tetrodotoxin (TTX) has been found to accumulate in various marine bivalve species, including Pacific oysters (Crassostrea gigas), raising a food safety concern. While several studies on geographical occurrence of TTX have been conducted, there is a lack of knowledge about the distribution of the toxin within and between bivalves. We, therefore, measured TTX in the whole flesh, mantle, gills, labial palps, digestive gland, adductor muscle and intravalvular fluid of C. gigas using liquid chromatography-tandem mass spectrometry. Weekly monitoring during summer months revealed the highest TTX concentrations in the digestive gland (up to 242 µg/kg), significantly higher than in other oyster tissues. Intra-population variability of TTX, measured in the whole flesh of each of twenty animals, reached 46% and 32% in the two separate batches, respectively. In addition, an inter-population study was conducted to compare TTX levels at four locations within the oyster production area. TTX concentrations in the whole flesh varied significantly between some of these locations, which was unexplained by the differences in weight of flesh. This is the first study examining TTX distribution in C. gigas and the first confirmation of the preferential accumulation of TTX in oyster digestive gland.     

Gross Anatomical,Radiographic and Doppler Sonographic Approach to the Infra-auricular Parotid Region in Donkey (Equus asinus)

The present study was performed on 12 heads of donkey’s cadavers of both sexes for different anatomic techniques and on 20 live adult donkeys for ultrasonographic approaches of local anesthetic techniques. The aim was to achieve safe desensitization of the ear canal and tympanic membrane in addition to measuring different parameters of the structures occupying the infra-auricular parotid region. The internal auricular nerve was divided into two fine branches and constituting, at its origin, a characteristic V-shape with the caudal auricular nerve. The styloid process of auricular cartilage was an adequate landmark for ultrasonographic needle-guided anesthesia for internal auricular and auriculopalpebral nerves, whereas the great auricular nerve was easily palpated subcutaneously that showed safety and success in all cases. The auricular branch of mandibular nerve joined the auriculopalpebral branch of facial nerve. The maxillary vein was descending, partially embedded within the texture of the parotid glandular tissue. The parotid gland divided into five segments was clearly demarcated by maxillary vein tributaries with three main collecting radicles pouring into the parotid duct. The mandibular duct received about 12–15 fine radicles and supplied with a separate branch from the external carotid artery. Using the Doppler sonographic technique in donkeys for diagnosis of ear affections, evaluation of retrograde sialography to salivary glands with their blood vasculature and their indices might be helpful for the detection of different critical abnormalities, such as stenosis, thrombosis, and other vasopathological affections through measuring their resistivity and pulsatility indices.     

下丘脑GnRH—Ⅰ mRNA在绍兴鸭松果腺中的表达

用反转录多聚酶链式反应 (RT PCR)方法检测 30至 15 0日龄绍兴鸭松果腺内GnRH ImRNA含量的变化。结果表明 ,绍兴鸭松果腺内存在GnRH ImRNA的表达且其核苷酸序列与绍兴鸭下丘脑内GnRH ImRNA仅有一个核苷酸差异 ,且不影响氨基酸的编码序列 ,但 30至 15 0日龄松果腺内GnRH ImRNA含量未出现显著性差异 (P >0 0 5 )。     

麦饭石对意蜂王浆腺超微结构的影响

麦饭石是一种天然矿物质营养源。本试验研究了给意蜂饲喂麦饭石矿化水对王浆腺超微结构的影响，结果表明：实验组１８日龄工蜂王浆腺细胞粗面内质网、核糖体、核仁、储存泡及分泌颗粒都较发达，而对照组１８日龄工蜂王浆腺则已退化。     

西方蜜蜂咽下腺与繁殖力的发育遗传研究

应用条件和非条件分析的方法对 3品种西方蜜峰的蜂群繁殖力和工蜂咽下腺重量进行了发育遗传研究。结果表明 ,除蜂群的起始繁殖群势和 1日龄工蜂咽下腺重量外 ,其它各个时期均检测到显著或极显著的基因型方差 ,说明二性状主要受遗传决定。条件遗传分析发现 ,在某些无法检测到非条件方差的时期存在显著水平的条件方差 ,表明在不同时期有基因的新表达。同一性状不同时期的相关分析表明 ,除 1月 31日群势、1日龄工蜂咽下腺重量分别与其它各阶段没有检测到遗传相关外 ,其余各时期之间均检测到显著或极显著的基因型相关 ,表明控制这二性状早期表现的遗传效应并不是以相同的方式调节后期的表现。成对性状之间的相关分析表明 ,除了 1月 31日群势、1日龄工蜂咽下腺重量与蜂群产浆量没有检测到遗传相关外 ,其它各时期均检测到显著或极显著的遗传相关 ,说明除 1月 31日、1日龄两个阶段外的其它时期对二性状进行改良均有效。     

动物生物反应器研究现状和进展

通过基因工程手段 ,不但有可能揭示有机体几乎所有蛋白质的结构和功能 ,而且也可以工业化大规模地生产外源重组蛋白。然而 ,在大多数情况下 ,细菌不能大量地合成外源蛋白 ,同时 ,由于某些蛋白在生物体内是以多聚体的形式存在 ,特别是某些潜在的药用蛋白质 ,通过重组 DNA的手段无法满足其生物活性的要求。在这种情况下 ,通过重组动物细胞可以获得具有生物活性的蛋白质     

黑穗醋栗腺体的研究

研究结果表明，１）厚度品种植株地上幼嫩部分表面普遍有腺体产生，形如铜钮扣收，大小为７０～１８０μｍ．分布密度为４２～４５个／ｃｍ２；２）切片现察，腺体起源于器官的原表皮层，由腺体原始细胞分化产生，由基细胞、柄和头部分泌细胞组成；３）腺体分泌细胞表面具发达的角质层，后期角质层与分泌细胞脱离，分泌物贮存于其中，最后角质层破裂释放出分泌物质．     

山羊乳腺上皮细胞氧化损伤模型的建立

【目的】 探究过氧化氢(H₂O₂)诱导山羊乳腺上皮细胞(GMEC)氧化损伤的最佳条件,构建可靠、稳定的氧化损伤模型,为今后探究紫大薯花青素对氧化损伤的保护机制提供模型条件。【方法】 试验采用二因子完全随机设计,第一因素为H₂O₂处理浓度,分别为0(对照组)、350、430、460、490、520和550 μmol/L,第二因素为对GMEC的处理时间,分别为8、11、14、17 h。舍弃细胞存活率低于60%的处理组,并根据结果重新调整处理浓度与时间。然后通过细胞内谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性、活性氧(ROS)和丙二醛(MDA)的含量以及培养液内乳酸脱氢酶(LDH)、过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)的活性和总抗氧化能力(T-AOC)的测定确定最佳的H₂O₂处理条件。【结果】 与对照组相比,各H₂O₂处理组作用8 h后GMEC存活率均显著降低(P<0.05),其中350、430、460 μmol/L H₂O₂处理8 h时细胞存活率分别降低至64.6%、72.9%、66.2%,基本符合细胞存活率的筛选需求(70%)。因此,选择350、430、460、490、520 μmol/L H₂O₂处理4、6、8、10 h进行后续试验。调整后,除4 h 430 μmol/L处理组外,各处理组LDH活性在不同处理时间下均显著高于对照组(P<0.05),并随着时间的延长逐渐升高,10 h时各处理组LDH活性均达到最大值,且与浓度呈正比;各处理组ROS含量在6 h时均显著高于对照组(P<0.05),且8 h时各处理组ROS含量较6 h均大幅度显著升高(P<0.05),说明8 h为ROS含量变化的转折点;430、490、520 μmol/L处理组MDA含量在处理8 h后均显著高于对照组(P<0.05),其中430 μmol/L处理组MDA含量在8和10 h时显著高于对照组(P<0.05);各浓度组CAT、SOD、GSH-Px和T-AOC活性在处理6~8 h时均出现不同程度的降低,且8 h时仅430 μmol/L处理组CAT、SOD、GSH-Px和T-AOC活性显著低于照组(P<0.05)。【结论】 430 μmol/L H₂O₂处理GMEC 8 h为构建GMEC氧化损伤模型最佳条件。