利用转录组测序技术分析ADC和NOS基因mRNA在鹅等级前卵泡中的表达

为研究精氨酸代谢的关键酶精氨酸脱羧酶(Arginine Decarboxylase,ADC)和一氧化氮合酶(Nitric-oxide Synthase,NOS)mRNA在鹅等级前卵泡中的表达情况。采用高通量测序技术对鹅等级前卵泡进行转录组测序分析,并通过荧光定量PCR对结果进行验证。通过FPKM值计算分析,这2个基因在鹅等级前卵泡中均有表达,且随着卵泡的发育,NOS mRNA的表达呈现先降低后增加再降低的趋势,在初级卵泡中的表达量达到最高值,在中白卵泡中的表达量最低。ADC mRNA的表达则呈现先增加后降低再增加的趋势,在初级卵泡中的表达量最低,在小白卵泡中的表达量最高。荧光定量PCR结果与转录组测序结果基本相同。     

不同纤维素添加量对扬州鹅生长性能和屠宰性能的影响

[目的]探讨纤维素对扬州鹅生长性能和屠宰性能的影响。[方法]在日粮中能量、蛋白质水平等基本一致的情况下,采用单因素4水平设计设置4个纤维素添加量(1.50%、4.50%、7.50%、10.50%),在12周龄时进行屠宰试验,研究不同纤维素添加量对扬州鹅生长性能和屠宰性能的影响。[结果]扬州鹅的日采食量随日粮中纤维素添加量的增加而降低。添加4.50%纤维素的处理组中,扬州鹅的饲料利用率最高。不同纤维素添加量对12周龄扬州鹅屠宰率、半净膛率、全净膛率、胸肌率、腿肌率的影响无显著差异。扬州鹅屠宰率和半净膛率在粗纤维水平为4.50%时出现拐点。[结论]扬州鹅日粮中纤维素的适宜添加量为4.50%。     

血管活性肠肽在皖西白鹅下丘脑与垂体中的分布

【目的】对青春期和休产期皖西白鹅下丘脑和垂体中血管活性肠肽的分布与表达进行研究。【方法】采集青春期和休产期皖西白鹅的下丘脑和垂体,应用免疫组织化学PV-9000二步法并结合DAB显色技术,对血管活性肠肽的免疫反应阳性分布进行定位,并用Image-Pro Plus 6.0软件分析阳性区域的累积光密度值。【结果】血管活性肠肽免疫反应阳性细胞主要分布于青春期和休产期皖西白鹅下丘脑的弓状核、室旁核、内侧核、视上核、乳头体内侧核等处及腺垂体中;休产期皖西白鹅下丘脑和垂体中的血管活性肠肽的累积光密度值显著高于青春期。【结论】血管活性肠肽可能对皖西白鹅的休产状态有一定的调控作用。     

不同蛋白原料对生长鹅生长性能及盲肠微生物的影响

选取300只健康、活泼的28日龄豁眼鹅,公母各半,体重为1 142.68(±50.64)g,随机分为3组,分别是血粉3%组、膨化血粉3%组和鱼粉3%组,每组设5次重复,每次重复20只鹅,试验时间28 d,研究在相同营养水平条件下,等比例的血粉、膨化血粉以及鱼粉对生长鹅生长性能和盲肠微生物菌群的影响和膨化血粉替代鱼粉的可行性。结果表明:平均日增重、饲料转化率以及盲肠内容物中乳酸杆菌、双歧杆菌数量的高低顺序为鱼粉组>膨化血粉组>血粉组,鱼粉组与膨化血粉组之间差异不显著,但均显著高于血粉组(P<0.05)。结果说明膨化血粉的饲喂效果显著好于血粉,在生长鹅日粮中可以3%比例等量替代鱼粉。     

膨化血粉水平对肥育鹅胴体性能的影响

选取300只健康无病、体重为2 412.85(±68.37)g的豁眼鹅,采用单因子完全随机设计,设3个处理,5次重复,分别在日粮中分别添加1.5%、3.0%、4.5%的膨化血粉,探讨不同比例膨化血粉对肥育鹅胴体性能指标的影响。结果显示:屠宰率3%组最高(90.17%),4.5%组次之(89.99%),1.5%组最低(89.69%);半净膛率3%组最高(78.39%),4.5%组次之(78.00%),1.5%组最低(77.98%);全净膛率3%组最高(69.41%),4.5%组次之(69.06%),1.5%组最低(69.01%);胸肌率3%组最高(20.35%),4.5%组次之(20.17%),1.5%组最低(20.10%);腿肌率3%组最高(18.37%),4.5%组次之(18.07%),1.5%组最低(17.99%);腹脂率3%组最高(2.24%),4.5%组次之(2.11%),1.5%组最低(2.03%)。结果表明,在日粮中添加3%的膨化血粉,能显著提高肥育鹅胴体性能。     

鹅副粘病毒M基因主要抗原位点片段的原核表达及鉴定

根据GenBank中发表的GPMV SF02株M基因核苷酸序列设计合成一对引物,通过RT-PCR扩增JS/1/97/G0株M基因主要抗原位点片段M1,将其克隆入pMD18-T载体,序列测定和分析表明,所扩增的M1基因核苷酸长为444 bp,共编码148个氨基酸.将M1同载体PGEX-6P-1连接后,转化入E.coli BL21(DE3)PlysS,经IPTG诱导表达出目标蛋白,与预计相符.对表达的M1蛋白进行Western blot鉴定,表明所表达的M1蛋白可以与GPMV SF02株阳性血清发生特异性反应.     

外源重组蛋白制备鹅免疫球蛋白轻链特异性多克隆抗体

采用RT-PCR方法扩增鹅免疫球蛋白轻链恒定区编码序列(GoIgCL),构建原核表达载体pET30a-IgCL,在RosettaTM(DE3)pLysS宿主菌中表达鹅免疫球蛋白轻链恒定区重组蛋白rGoCL,以纯化后rGoCL作为免疫原制备兔抗GoIgL多克隆抗体,对多抗进行鉴定分析.结果表明,rGoCL在大肠杆菌中获得可溶性表达,可代替天然分离的轻链作为免疫原制备轻链特异性抗体,多抗效价为1 204800.研究为鹅免疫球蛋白的蛋白结构、功能分析以及鹅免疫诊断试剂研发奠定基础.     

婴儿粪便中益生菌的分离筛选及培养

采用从婴儿粪便中提取具有益生作用的菌种,为下一步的研究开发做乳酸菌种库做积累。选取河南省洛阳市5位志愿者进行样品采集,得到5份完全由母乳喂养的婴儿(2月龄)自然排出的粪便样,并分离纯化出5株乳酸菌(RS1, RS2,RS3,RS4,RS5)和5株双歧杆菌(SQ1,SQ2,SQ3,SQ4,SQ5),经鉴定,确定RS3和SQ1具有益生作用的。结果表明,此2株菌具有较好的耐酸性、胆盐耐受力,对温度敏感,对模拟胃液和肠液具有较强的耐受力,且对大肠杆菌、沙门氏菌具有95%以上的抑菌率,可作为优良的益生菌候选菌种。     

饲喂枯草芽孢对草鱼粪便、养殖水体中芽孢数量和水质的影响

分别在饲料中添加不同含量的枯草(Bacillus subtilis)芽孢(A组实测芽孢数量为2.6×107 cfu/g,B组为4.4×106 cfu/g,空白组为0),饲喂静水水族箱中100 g左右的草鱼(Ctenopharyngodon idellus)10 d,测定饲喂枯草芽孢后草鱼粪便、养殖水体中芽孢数量和水质的变化。结果表明:(1)9 d内,水体中芽孢数量A组和B组在前6 d时不断增加,在6 d时达到稳定,其中A组和B组稳定时的含量分别为2.22×106 cfu/g和3.98×105 cfu/g。(2)10 d内,草鱼粪便干物质中的芽孢数量与饲料中的枯草芽孢含量相比,A组和B组粪便中的枯草芽孢损失率分别为89.76%～90.71%和83.83%～86.84%。(3)草鱼饲喂枯草芽孢后,A组和B组粪便中排出的枯草芽孢对水体中亚硝酸盐和氨氮有降低的趋势,但各组之间差异不显著(P>0.05),对化学需氧量(COD)没有影响。     

引进鹅种的性能及杂交利用效果

选择体质健康、体重相近的1日龄四川白鹅、莱茵、朗德鹅和莱×川杂交鹅各40只,在相同的饲养管理条件下,对多项指标进行70d连续测定。试验结果,育雏率依上述顺序穴下同雪分别为72.5%、72.5%、97.5%和65.0%;70日龄体重分别为2985.00g、3280.00g、3295.00g和3550.00g;0～70日龄增重分别为41.43g、45.62g、45.86g和49.51g鸦腿肌率均达到20%以上(26.65%～22.07%)。