鹅细小病毒VP1与VP3非重叠序列的克隆与原核表达

根据鹅细小病毒GPVH1株基因组核苷酸序列设计了一对引物，对其结构蛋白VP1与VP3非重叠核苷酸序列进行PCR扩增，并克隆到表达性载体pGEX-6p-1，经酶切鉴定筛选出阳性克隆，并转化到大肠杆菌BL21(ED3)plysS进行原核表达，并用SDS—PAGE鉴定，结果表明融合蛋白在表达性细菌BL21中重获得了高效表达。     

入孵鹅卵携带鹅细小病毒的比较试验

从由市场收购鹅卵入孵的孵房内采集不同胚龄期的鹅胚蛋，将蛋壳、尿囊液、羊水及胚体制成被检样品，以敏感鹅胚进行小鹅瘟病毒的分离和检测，结果表明小鹅瘟病毒可以由污染蛋壳随着胚龄的增大而侵入胚体，而免疫鹅只所产蛋在不同胚龄期的上述组织中均不能分离到病毒。因此，对种鹅实施健康监控及对种蛋、孵抱设施、市场等施以严格消毒在防治小鹅瘟上有积极意义。     

Expression of MSTN and MyoG Genes in Zi and Rhine Goose and their Correlation with Carcass Traits

The aim of this study was to investigate the effects of MSTN and MyoG genes on goose skeletal muscle growth.In this study,MSTN and MyoG genes expression were detected in breast and leg muscle of Zi and Rhine goose by Real-time PCR,and the correlations between genes expression levels and carcass traits were investigated.The results showed that the breast muscle weight and breast muscle rate of Rhine goose were extremely significant higher than Zi goose (P<0.01).MSTN and MyoG mRNA expression in breast muscle of Zi goose were significantly higher than that of Rhine goose,and the mRNA level of MSTN in leg muscle of Rhine was extremely significant higher than that of Zi goose (P<0.01),there was no significant difference of MyoG mRNA between Zi goose and Rhine goose (P>0.05).There was extremely significant difference between MSTN mRNA expression in breast muscle and leg muscle of Zi goose (P<0.01).MSTN mRNA expression in leg muscle was significantly higher than that of breast muscle of Rhine goose (P<0.05).There was extremely significant difference between MyoG mRNA expression in breast muscle and leg muscle of Zi goose and Rhine goose (P<0.01).There was a extremely significant negative correlation between MSTN mRNA expression in breast muscle with body weight,breast muscle weight and breast muscle percentage (P<0.01).There was a extremely significant positive correlation between MyoG mRNA expression in breast muscle and leg muscle with body weight (P<0.01).MSTN and MyoG gene might have positive and negative regulation effect on muscle growth.     

内质网应激标记基因Grp78参与鹅肥肝免疫/炎症状态的调控

旨在揭示内质网应激(ERS)标记基因Grp78是否参与鹅肥肝中炎症/免疫相关基因的表达调控。本试验选择健康的、体重相近的70日龄朗德鹅30只(未分公母),随机分为对照组(n=15)和填饲组(n=15)。利用荧光定量PCR测定不同填饲阶段(填饲7、14、19 d)不同组织中Grp78的相对表达量(n=4),以明晰Grp78与鹅肥肝形成的关联;在鹅原代肝细胞中过表达Grp78,并通过RNA-seq分析Grp78所影响的信号通路和基因(n=3);利用荧光定量PCR检测鹅肥肝中与炎症/免疫相关的基因表达量(n=4),以明晰这些基因与Grp78的关联。结果表明,肝和腹脂中Grp78的表达量受填饲影响(肝中下降,而腹脂中上升)。Grp78基因的过表达试验表明,ERS除了可影响已知的代谢病和细胞凋亡通路外,还影响信号转导、免疫等通路。在免疫/炎症方面,"Toll-like receptor signaling pathway"、"TNFαsignaling pathway"、"NF-kappa B signaling pathway"等通路最为突出。此外,免疫/炎症相关基因Tnfsf10、Map3k7cl在鹅原代细胞中的表达受Grp78过表达影响,在鹅肥肝中受填饲影响。总之,本研究揭示了Grp78/ERS新的生物学功能,即对细胞的免疫/炎症状态进行调控,并借此参与鹅肥肝的形成。     

小鹅瘟及其防治

鹅细小病毒感染,又称小鹅瘟,是由鹅细小病毒引起雏鹅和雏番鸭的一种急性或亚急性的败血性传染病。本病主要侵害4～20日龄的雏鹅,以传播快、高发病率与高病死率、严重下痢、渗出性肠炎、肠道内形成腊肠样栓子为特征。在自然条件下成年鹅常呈隐性感染,但经排泄物和卵可传播该病。该病是危害养鹅业的主要病毒性传染病。     

狮头鹅和织金白鹅引种观察及紫花苜蓿鲜草饲喂织金白鹅效果对比试验

引进狮头鹅和织金白鹅在毕节地区饲养并进行生长性能对比,测定90日龄生长速度,结果表明:狮头鹅和织金白鹅90日龄体重与原产地差异不显著,但二者间差异极显著(P<0.01);通过紫花苜蓿鲜草饲喂织金白鹅饲养效果研究表明,饲喂紫花苜蓿鲜草比本地牧草平均每只鹅日增重相差3.58 g(P<0.05),节约精料1.25 kg。     

鹅肝细胞的高纯分离及培养

采用简单的＂胶原酶直接消化法＂分离鹅胚胎肝细胞,得到的肝细胞纯度高,活性好;HE染色显示大量双核或多核细胞,细胞具有旺盛增殖分裂能力;肝脏特异性基因白蛋白基因检测显示所分离细胞为成熟肝脏细胞。该法操作简单、高效,是获得鹅原代肝细胞的一种较好的方法,有利于以鹅原代肝细胞为模型的体外研究工作的开展。     

基于线粒体DNA D-loop区序列分析我国小型鹅种的系统进化

为了探究我国小型鹅种的系统进化,运用DNA测序技术测定了我国13个小型鹅种群体mtDNA D-loop区521 bp序列。结果显示这13个小型鹅种D-loop区的A、G、C、T含量分别为32.2%,15.0%,29.0%,23.8%。平均单倍型多样度和核苷酸多样度分别为0.2153和0.00046。13个家鹅种间变异大于种内变异,且均未出现群体扩张现象。群体聚类和系统进化树表明,伊犁鹅来源于灰雁（Anser anser）,其余12个鹅种来源于鸿雁（Ansercygnoides）     

日粮纤维源及添加水平对北方白鹅生产性能及消化道发育的影响

选取3周龄健康、体重均一的北方白鹅雏鹅360只,采用3因素3水平有对照的试验设计,随机分成10组,每组36只。对照组(D)饲喂基础日粮,试验组即3个不同纤维源组玉米秸青贮组(A)、玉米秸微贮组(B)、玉米秸干贮组(C),每个纤维源组分别设3个水平,4~7周龄饲喂粗纤维比例为4%(Ⅰ)、7%(Ⅱ)、10%(Ⅲ)的日粮,进行28 d的饲养试验,并在7周龄时进行屠宰试验。饲养试验结果表明:不同纤维比例的日粮对北方白鹅的生产性能有显著的影响,CⅡ组体重显著高于其他组(P<0.05),高纤维Ⅲ组体重最低,料重比最高。屠宰试验表明:不同纤维比例日粮对北方白鹅的肌胃重和十二指肠长度有显著的影响,纤维素组与对照组间差异显著(P<0.05),但其他指标差异不显著(P>0.05)。不同日粮显著影响十二指肠、空肠和回肠的绒毛高、肠壁厚度,对照组绒毛高度和肠壁厚与纤维素组间达到差异显著水平(P<0.05),而隐窝深度差异不显著(P>0.05)。4~7周龄7%粗纤维比例日粮有利于北方白鹅的生产性能的发挥。