落叶松体细胞胚萌发能力研究

[目的]研究落叶松体细胞胚萌发能力,为落叶松在应用方面规模化繁殖提供理论依据。[方法]以落叶松体胚性细胞系S287的成熟体细胞胚为材料,区分了落叶松体细胞胚的不同子叶形态;进行树脂切片及显微观察后,对其萌发能力进行了统计;并利用外源施用激素的方法研究了影响落叶松体胚再生成苗的重要因子。[结果]成熟的落叶松体细胞胚主要以四种形态存在,分别是正常子叶胚(NC≥4),裂生子叶胚(2NC4),杯状胚(NC=1)以及畸形胚。纵切结构观察显示前三种体胚都能发育出完整的SAM和RAM,萌发率依次为17.2%,12.4%和5.7%,而畸形胚不具有完整的SAM和RAM,在萌发培养基上不能生根,并很快死亡。针对萌发率低的现状,进一步施用不同浓度的GA3和IAA发现,只有2 mg·L-1IAA对落叶松体胚生根具有明显的促进作用,其萌发率达到了56%,且在后期存活率仍能保持较高水平。[结论]IAA在落叶松体细胞胚萌发中发挥重要的调控作用。     

水曲柳体细胞胚与合子胚发生的细胞学研究

水曲柳(Fraxinus mandshurica)属木犀科(Oleaceae)白蜡树属,是我国东北重要珍贵硬阔树种之一,主要分布于小兴安岭、长白山、辽宁东部山地等地区, 以材质优良而著称.由于长期不合理的采伐利用,目前可利用的资源急剧减少,已被列为国家三级保护植物(傅立国,1992).进行水曲柳体细胞胚胎发生的研究,在资源保护、树种快繁和基因工程育种上有其重要的现实意义.     

体细胞胚胎发生及其基因表达的研究进展

在合适的培养条件下,植物体细胞会模仿胚胎发育过程产生体细胞胚胎。体细胞胚胎发生提供一个实验系统,便于研究植物形态建成的分子和细胞机制等方面。文中主要对体细胞胚胎发生的影响因素(激素、胁迫因素和Ca2 等)和该过程中的基因表达与调控方面论述了国内外研究进展。     

地被菊间接体细胞胚发生途径的转基因受体体系的研究

采用三步培养法建立了地被菊花品种‘玉人面'间接体细胞胚发生途径的转基因受体体系.试验以地被菊花品种‘玉人面'茎段(节间)为外植体,研究了生长调节剂、光照强度等因子对其间接体细胞胚诱导和分化的影响,同时进行了抗生素敏感性试验.结果表明:胚性愈伤组织诱导培养基为MS KT 2.0 mg·L-1 2,4-D 2.0 mg·L-1 NAA 0.5 mg·L-1,诱导15 d后,将获得的黄绿色致密颗粒状胚性愈伤组织转入胚性愈伤组织分化培养基MS KT 2.0 mg·L-1 2,4-D 1.0 mg·L-1 NAA 0.5 mg·L-1中,诱导15 d后再转入MS KT 2.0 mg·L-1 NAA 0.5 mg·L-1的分化培养基中培养20 d,光照强度为1 000～2 000 lx,胚性愈伤组织诱导率、分化率分别为95.3%、92.7%,平均每个外植体分化的芽数为17.8个,获得的再生芽的稳定性为99.5%.抗生素敏感性试验表明:地被菊花品种‘玉人面'间接体细胞胚发生途径的转基因受体体系中,卡那霉素选择压为20 mg·L-1;头孢霉素在胚性愈伤组织诱导时的选择压为300 mg·L-1,在胚性愈伤组织分化培养时选择压为100 mg·L-1.     

大白菜游离小孢子培养技术研究

游离小孢子培养技术是获得大白菜单倍体植株的有效途径之一。通过对影响大白菜游离小孢子胚胎发生的主要因素一材料基因型、供体母株生长状态、小孢子发育时期、培养方法、培养条件和影响植株再生频率的因素以及小孢子植株的加倍方法等进行了综述。     

新陆早33号体细胞植株再生技术研究

以模式品种Coker 312为对照研究新疆主栽陆地棉品种新陆早33号的体细胞胚胎发生和植株再生。研究表明,2个品种的下胚轴均能在0.05mg·L-1 2,4-D+0.1mg·L-1 KT的激素组合诱导下获得初生愈伤组织,然后在无激素诱导条件下获得胚性愈伤和体细胞胚。新陆早33号与Coker 312在MSB3培养基上最早体细胞胚胎发生时间分别为60d和87d,胚胎分化率分别为67.2%和61.4%。新陆早33号在180d获得根系发育良好的再生幼苗,而Coker 312需要210d。应用此法,成功获得新陆早33号的体细胞胚和再生植株,且其胚胎发生能力和再生效率均优于对照材料。