用冻干精子生产ICSI小鼠

前期研究中，我们采用小鼠卵母细胞胞浆内精子注射（ICSI）技术，成功地用新鲜精子获得了生理健康的ICSI小鼠。在此基础上，本文结合细胞冻干技术，进行了冻干精子ICSI生产试管小鼠的尝试。B6D2F1成年公鼠的精子在Tris-HCl-EDTA（pH8.2）溶液中冻干4 h后解冻，将其精子头注入到KM小鼠成熟卵母细胞的胞质中。6 h后，83.0%的卵子受精。用CZB溶液体外培养发现，冻干精子生产的胚胎，体外发育至2-C (92.0% vs 99.5%)、4-C（52.7% vs 97.2%）、桑椹胚（36.6% vs 86.3%）和囊胚的比例（21.4% vs 68.7%）极显著地（p<0.01）低于新鲜精子生产的ICSI胚胎。移植2-C期冻干精子ICSI胚胎检测体内发育，结果发现，D10的着床率为63.0%（17/27）；胎鼠的出生比例为21.7%（13/60），这些ICSI小鼠成年后的生理和生殖能力正常。试验结果说明，精子冻干后，仍能生产ICSI动物，冻干技术可以用于哺乳动物精子的保存。     

Effects of Swertia japonica extract and its main compound swertiamarin on gastric emptying and gastrointestinal motility in mice

The Swertia japonica is used clinically as a remedy for gastrointestinal symptoms in Japan. We examined the effects of a S. japonica and swertiamarin on gastric emptying and gastrointestinal motility in atropine-, dopamine-, and 5-hydroxytryptamine (5-HT)-treated mice. All three preparations inhibited reductions in gastric emptying and gastrointestinal motility induced by dopamine (1 mg/kg, intraperitoneal injection, ip). Neither the powder, swertiamarin, nor itopride had any effect on the reductions in gastric emptying and gastrointestinal motility caused by 5-HT (4 mg/kg, ip). These findings suggest that the powder and swertiamarin stimulate gastric emptying and gastrointestinal motility by inhibiting the dopamine D₂ receptor.     

牛精子体外获能前后元素变化的研究

 本文应用x射线能谱技术，对获能前后精子质膜表面（头部、中段）和内部（顶体内、中段线粒体内）的元素进行了分析测试。结果表明，牛精子用肝素+咖啡因体外获能后，头部、中段质膜表面的Na、Al、S、K含量升高，Cl、Ca含量降低；顶体内Na、Mg、Si、P和Fe含量降低，而Ca、K、Cl和S含量升高；精子中段线粒体内Na、P、Si、Cl和Ca升高，而Mg、S、K和Fe却降低。获能过程中精子顶体内Na/Ca、Na/K、Cl/Ca、Cl/K和Na/Cl的浓度比分别为42.13、12.43、15.36、45.31和2.74；而摩尔比又分别为73.42、21.13、17.37、4.99和4.23。本文并对可能的获能机理进行了讨论。     

家兔精子体外获能与体外受精试验

本试验目的在于建立一种简便而有效的系统,能使家兔射出的精子完成体外获能,并获得体外受精、早期卵裂和正常产仔。精子体外获能采用三种方法:A.HIS(15min)+DM(1～2h);B.HIS(15min)+DM(11～12h);C.m-HIS(15min)+m-DM(2～4h)。经上述方法处理的精子与512枚输卵管卵母细胞进行体外受精和体外培养的结果表明,A组的受精和早期卵裂发育延迟;B组的受精卵大都停留在原核期;C组的受精和早期卵裂发育正常。将C组60枚2-4细胞移植至9只受体兔,5只妊娠,其中2只产4只试管仔兔,另外3只获得12个胎儿。     

单细胞电泳技术检测低温保存猪精子的DNA损伤

应用单细胞凝胶电泳技术(SCGE),对冷冻解冻后猪精子DNA的损伤情况进行研究.结果表明,冷冻解冻会对猪精子DNA造成损伤,其彗星率与鲜精相比差异显著(P＜0.05);各组冻精之间,甘油添加量为2%～3%(v/v)时,冷冻对猪精子DNA造成的损伤最低,彗星率均低于其余各组(P＜0.05).     

几种抗生素对波尔山羊精液低温保存的影响

研究了稀释液中庆大霉素、恩诺沙星、诺氟沙星、菌特灵新一代抗生素替代青、链霉素的添加对波尔山羊精液保存效果的影响。实验表明 ,恩诺沙星的保存效果优于其他抗生素 ,庆大霉素、诺氟沙星与青、链霉素效果相当 ,菌特灵最差。     

牛精子膜麦芽凝集素结合糖蛋白的分离与定位

牛精子膜用非离子去污剂 NP-40增溶,经固相凝集素亲和层析,初步分离了精子膜麦芽凝集素结合糖蛋白,经 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳、银染色显示出了四条蛋白质带,分子量分别为78,60.42和33 kD。用分离到的糖蛋白制备抗血清,对牛精子进行免疫细胞化学标记,结果顶体区显示为强阳性,与麦芽凝集素亲和细胞化学的染色一致。用抗血清处理精子再进行亲和细胞化学染色时,顶体区的麦芽凝集素结合糖残基多数被封闭,揭示麦芽凝集素结合糖残基是构成抗原决定簇的成分。     

热应激对小鼠精子发生及其性能的影响

摘要 取24只小鼠分为慢性热应激组(EGⅠ)、急性热应激组(EGⅡ)和空白对照组(CG)。EGⅠ组每天早上移入40℃(相对湿度为53％～56％)的热应激箱内热应激10min,连续9d,到第10d,EGⅠ和EGⅡ同上热应激15min。结果显示:在热环境下,EGⅠ、EGⅡ组动物的肛温均比CG组高,EGⅡ组又比EGⅠ组高;3组动物睾丸重量及指数无明显变化;EGⅠ、EGⅡ两组动物精子数量及活动率均比CG组明显低(P<0.01);畸形率比CG组均高,EGⅠ组的精子数量、活动率显著低于EGⅡ组,畸形率极显著地高于EGⅡ组(P<0.01);在畸形的精子中,CG组主要以头部缺失为主,而EGⅠ组却以尾部缺失为主,EGⅡ组头部、尾部缺失相近。结果表明:热应激对精子的发生过程有毒性作用,抑制精子的形成,降低精子的数量及活动性能。     

中草药复方添加剂对繁殖后期种公鸡精液品质及血浆生殖激素浓度的影响

选用80只50周龄尼克T种公鸡,随机分成Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组,每组16只。Ⅰ、Ⅱ组为对照组,分别饲喂基础日粮和基础日粮添加鸡蛋,Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组为试验组,分别饲喂添加水平为1%,2%,3%中草药复方添加剂的试验日粮,研究中草药复方添加剂对繁殖后期种公鸡精液品质及血浆生殖激素浓度的影响,以及种公鸡精液品质和血浆生殖激素浓度的关系。结果表明,日粮中添加中草药复方添加剂能显著提高种公鸡的精液量和精子活力,以及血浆中睾酮、促黄体素、促卵泡素浓度,降低精子畸形率,其中2%添加组效果最明显。说明在繁殖后期种公鸡日粮中添加一定量的中草药复方添加剂可以显著提高种公鸡的精液品质和血浆生殖激素浓度。精液量与精子活力、精子密度、精子畸形率以及血浆T,LH,FSH浓度呈显著正相关(P<0.05);精子活力与血浆T,LH,FSH浓度呈显著正相关(P<0.05);血浆T浓度与血浆LH,FSH浓度呈显著正相关(P<0.05)。