An HPLC Method for Microanalysis and Pharmacokinetics of Marine Sulfated Polysaccharide PSS-Loaded Poly Lactic-co-Glycolic Acid (PLGA) Nanoparticles in Rat Plasma

This study was aimed at developing a sensitive and selective HPLC method with postcolumn fluorescence derivatization for the detection of propylene glycol alginate sodium sulfate (PSS) in rat plasma. Plasma samples were prepared by a simple and fast ultrafiltration method. PSS was extracted from rat plasma with d-glucuronic acid as internal standard. Isocratic chromatographic separation was performed on a TSKgel G2500 PWxL column with the mobile phase of 0.1 M sodium sulfate at a flow rate of 0.5 mL/min. Analyte detection was achieved by fluorescence detection (FLD) at 250 nm (excitation) and 435 nm (emission) using guanidine hydrochloride as postcolumn derivatizing reagent in an alkaline medium at 120 °C. The calibration curve was linear over a concentration range of 1–500 μg/mL, and the lower limit of detection (LLOD) was found to be 250 ng/mL. This validated method was applied successfully to the pharmacokinetic study of PSS and PSS-loaded poly lactic-co-glycolic acid (PLGA) nanoparticles (PSS-NP) in rat plasma after a single intravenous (PSS only) and oral administration (PSS and PSS-NP). Significant differences in the main pharmacokinetic parameters of PSS and PSS-NP were observed. The relative bioavailability of PSS-NP was 190.10% compared with PSS which shows that PSS-NP can improve oral bioavailability.     

青饲料中氨基甲酸酯类农药残留的高效液相色谱法测定

本试验建立了一种简便而准确的前处理方法——高效液相色谱法,用于检测青饲料中7种氨基甲酸酯类农药的残留.用高效液相色谱法紫外检测器测定多菌灵,用高效液相色谱柱后衍生系统荧光检测器测定克百威或3-羟基克百威、涕灭威或涕灭威砜、涕灭威亚砜及甲萘威.结果显示：青饲料中7种农药的加标回收率（n=6）在73.2％～98.3％,RSD在2.1％～6.9％,方法的检出限（以3倍信噪比计）为0.19～0.90 μg/kg.     

柱前衍生HPLC法测定草铵膦铵盐含量

建立一种经济、方便测定草铵膦铵盐的高效液相色谱检测方法。在碱性条件下草铵膦与氯甲酸-9-芴甲酯(FMOC-Cl)反应,对衍生物进行液相色谱分离和测定。以甲醇+乙腈+水=25+25+50为流动相,C18为分离柱,在波长265nm下检测。本法衍生反应快,衍生产物稳定,铵离子不影响,在0.010 18-0.203 6mg/mL范围内线性关系良好(r=0.999 9)。方法的标准偏差为0.555,变异系数为0.768%,添加回收率98.9%-100.6%,检测限为0.4μg/mL。本方法使用C18柱较耐用,检测灵敏度高,适合于草铵膦原药及制剂的测定。     

柱前衍生HPLC测定阿胶中17种水解氨基酸含量

目的:建立柱前衍生高效液相色谱法(HPLC)同时测定阿胶中17种水解氨基酸含量的方法。方法用6 mol/L盐酸溶液水解阿胶中的氨基酸,以异硫氰酸苯酯为柱前衍生试剂;用Hypersil BDS C18柱(200 mm×4.6 mm,5μm),梯度洗脱,流速为1.0 mL/min,检测波长为254 nm,柱温为30℃。结果 17种氨基酸在60 min内均可得到很好的分离,回收率为97.4%～100.1%,RSD为1.6%～3.4%。结论建立的方法可靠,可用于阿胶中17种水解氨基酸的含量测定。     

基于柱前衍生化GC-MS的炒青绿茶加工过程中初级代谢物变化规律研究

茶叶中的一些初级代谢产物前人研究较少,为了探明在炒青绿茶加工过程中这些初级代谢产物的变化规律,本研究以龙井43品种为原料制作了炒青绿茶,并采用了基于柱前衍生化的气相色谱-质谱联用法(GC-MS)对其进行测定。结果共鉴定出60种化合物,其中相对含量较高的为有机酸类、糖类、糖类衍生物。偏最小二乘法判别分析模型可成功区分炒青绿茶各个加工工序,并筛选出了关键差异化合物26种,聚类分析结果表明,这26种化合物在加工过程中的含量变化规律可分为以下3类:高→低:2-酮戊二酸、阿拉伯糖、没食子酸、吡喃葡萄糖醛酸、甘油葡萄糖苷、核糖、半乳糖、果糖、葡萄糖、磷酸、4-酮葡萄糖、核糖酸-1,4-内酯、甘露醇;高→低→高:尿黑酸、蔗糖、肌醇半乳糖苷、苏糖酸、松二糖、核糖酸、肌醇和柠檬酸;低→高→低:赤藓糖-1,4-内酯、磷酸氧丙基酯、焦谷氨酸、奎尼酸、己二酸。有机酸主要呈现先上升后下降趋势,糖类除蔗糖外主要呈现下降趋势。     

藻红蛋白衍生比率荧光法检测消毒液中邻苯二甲醛

基于R-藻红蛋白(R-PE)与邻苯二甲醛(OPA)的衍生化反应,构建一种新型检测邻苯二甲醛的荧光比率型探针。R-藻红蛋白经十二烷基硫酸钠(SDS)去折叠后裸露出伯氨基团,之后在β巯基乙醇存在的碱性环境中,与邻苯二甲醛相互反应衍生出一种蓝色荧光的异吲哚类化合物。在该体系中,随着邻苯二甲醛浓度的增加,R-藻红蛋白本身的荧光信号逐渐减弱,衍生产物的蓝色荧光信号逐渐增强,从而构成了比率型荧光探针。结果表明:在pH 10.5的碳酸盐缓冲条件下,探针的最佳检测时间为3～6 min,线性检测范围为5～100μg/mL,相关系数R~2为0.992,最低检测限为1.7μg/mL。该探针应用于市售洗手液样品测定,加标回收结果满意。     

茶枝柑皮中多糖组成成分的分析

[目的]研究测定茶枝柑皮中多糖的组成成分。[方法]以1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮（PMP）进行柱前衍生化,采用反相高效液相色谱法,测定茶枝柑皮多糖中单糖衍生物。色谱条件为：色谱柱为Phenomenex Luna C18（4.6 mm×250 mm,5μm）;流动相为浓度0.05mol/L混合磷酸盐溶液-乙腈（80∶20,V/V,pH=7.1）;检测波长为245 nm。[结果]茶枝柑皮多糖由甘露糖、核糖、鼠李糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、木糖、阿拉伯糖组成,其摩尔比为0.08∶0.002∶0.05∶4.80∶1∶1.52∶0.11∶3.82。[结论]该方法具有操作简单、快速、重复性好、回收率高等特点,可用于柑橘果胶多糖中单糖组成及含量的测定。     

浙贝母花的氨基酸成分分析

[目的]测定浙贝母花中氨基酸的种类和含量,为浙贝母花的资源开发提供科学依据。[方法]以采摘后自然阴干,冷冻干燥的和流化床干燥的浙贝母花作为研究对象,采用茚三酮柱后衍生-氨基酸分析法,测定3种处理下的浙贝母花的氨基酸含量。[结果]共测出17种氨基酸,并且氨基酸的总量在3种处理的浙贝母花中均高达200g/kg,其中谷氨酸含量最高,7种人体必需氨基酸均占所测氨基酸总量30.0%以上。[结论]浙贝母花及其相关产物具有较高的药用价值和保健价值,值得进一步开发。     

超高效液相色谱荧光法检测贝类中三种高毒性麻痹性贝毒

建立灵敏可靠的麻痹性贝类毒素(PSP)检测技术是保障我国贝类水产品质量安全的有力手段。本研究选取3-(2-呋喃甲酰基)-喹啉-2-羰醛(FQ)为荧光衍生试剂,利用超高效液相色谱(UPLC)和柱前衍生荧光检测技术,建立了贝类中3种高毒性PSP毒素成分(STX、GTX1及NEO)的检测方法,对影响荧光衍生效率和色谱分离效果的各主要实验因素分别进行了优化。结果表明,在优化后的最佳实验条件下,3种PSP毒素成分线性方程的相关系数(r)均大于0.998,保留时间(tm)及峰面积(PA)的日内及日间精密度RSD值分别小于3.1%和5.6%,当信噪比(S/N)等于3时,检测限范围为7～14μg.kg-1,样品加标回收率为82%～92%,RSD值小于5.2%。该方法灵敏、稳定且可靠,可用于贝类中三种高毒性PSP毒素成分的日常分析检测。     

黄精多糖的柱前衍生化HPLC指纹图谱研究

为了建立黄精多糖组成糖的指纹图谱,采用柱前衍生化HPLC法测定黄精多糖的组成,并建立其组成糖的指纹图谱。色谱柱为Agilent ZORBAX XDB C_(18)色谱柱(5μm,250 mm×4.6 mm),以0.025 mol/L磷酸盐缓冲液(KH_2PO_4-Na OH,p H 6.8)-乙腈为流动相进行梯度洗脱,流速为0.8 m L/min,柱温为40℃,检测波长为250 nm。结果显示,黄精多糖有4个共有峰,分别为甘露糖、葡萄糖、半乳糖和木糖,对10批样品进行相似度分析,其相似度大于0.98。采用HPLC法建立多糖的指纹图谱操作简便、选择性高、分析速度快,可有效检测黄精多糖。