达氟沙星对施氏鲟的急性毒性及组织残留检测

将施氏鲟(Acipenser scherenscki,体重75～95g)暂养于室内玻璃水族箱内7d后进行实验。所用达氟沙星(Danofloxacin)纯度为99．5％。分别以剂量800、l040、1352、1757．60、2284．88和2970．34mg／(kg体重)对施氏鲟进行口灌,以400、440、484、532．4、585．6和644．2mg,／(kg体重)进行腹腔注射达氟沙星水溶液,给药后连续10d观察实验鱼的行为及死亡情况。用改进的寇氏法计算得出施氏鲟腹腔注射达氟沙星的LD50为429．47mg／(kg体重),LD50的95％可信限为425．22～433．66mg／(kg体重)。口灌达氟沙星LD50为l502．10mg／(kg体重),95％可信区间范围为1307．89～1738．60mg／(k体重)。对染毒死亡鱼及对照组实验鱼分别进行组织切片,并分别进行光镜及电镜观察。光镜观察结果表明,染毒死亡鱼的肝细胞的索状结构消失,肝组织呈弥漫性坏死,肝细胞肿胀,有些肝细胞失去正常的多角形形状,细胞核肿胀变形;窦状隙腔变窄,其中的红细胞形状也不同程度发生了改变。染毒死亡鱼的肝细胞的超微结构显示,肝细胞内充满脂滴,肝细胞核萎缩、消失,线粒体脊断裂,线粒体破裂,粗面内质网结构疏松有断裂,滑面内质网数量明显减少,溶酶体破裂。用高效液相色谱法测定以10mg/(k体重)剂量连续4次口灌给药后,达氟沙星在施氏鲟血浆、肝脏、肾脏、肌肉和鳃组织中的药物水平,实验结果表明,达氟沙星在施氏鲟全身组织均有分布,用药第9天后达氟沙星在施氏鲟体内消除速度很快,各组织药物水平均在最低检测限以下,其中肌肉和鳃在第6天就可降到0．005μg/(g组织)以下,肝脏和肾脏在第9天、血浆在第7天均检测不到,检测发现肝脏、肾脏中的药物水平远远高于血浆、肌肉和鳃组织中的血药水平。建议肝脏和肾脏可作为达氟沙星的残留检测的指示组织。     

达氟沙星对施氏鲟肝脏抗氧化功能和转氨酶活性的影响

分别用20、50、100mg/(kg体重)3个剂量的达氟沙星(Danofloxacin)水溶液连续口灌施氏鲟(Acipenserscherensckii)20d,并于给药后第5、10、15、20天用试剂盒测定肝脏SOD、CAT、GOT和GPT的活性及MDA和NO的含量。施氏鲟体重75～95g。结果表明,短时间内给药后(5天),100mg/(kg体重)组SOD活性与对照组相比提高显著(P<0 01)。随着实验时间的延长(第10、15天),与对照组相比各实验组SOD酶活性均保持在较高活性(P<0 01)。至第20天,各实验组SOD活性呈下降趋势,但仍明显高于对照组。给药后第5天时,各实验组CAT活性与对照组之间无差异;至第10、15天时,50、100mg/(kg体重)组均极显著高于对照组;给药后第20天,仅100mg/(kg体重)组显著低于对照组。实验第5、10、15、20天时,各实验组与对照组之间GPT和GOT活性均没有明显的差异性。仅在相同实验组内随着时间的改变有些变化。与对照组相比,在实验第5、10、15、20天各剂量组MDA含量均无显著的变化。20、50mg/(kg体重)组在第5、10、15天时有所降低,但至第20天时均恢复到对照组的水平;100mg/(kg体重)组至第15天降至最低,但实验结束时反而明显高于对照及其他实验组。从实验结果看,在实验第5、10、15、20天,各实验组施氏鲟肝脏NO含量与对照组相比较没有明显的变化。结果表明,达氟沙     

荧光分光光度法测定甲磺酸达氟沙星粉

采用荧光分光光度法测定了甲磺酸达氟沙星粉的含量。激发和发射波长分别为350nm和448 nm,平均回收率为102.5%,RSD为1.1%。在0.01~5μg/mL范围内,其荧光强度与浓度线性关系良好。     

达氟沙星脂质体在蛋雏鸡体内的组织动力学及靶向性研究

将260只28日龄试验鸡(体质量215~230 g)随机分成5组:健康对照组20只,甲磺酸达氟沙星溶液静注给药组和内服给药组、甲磺酸达氟沙星脂质体静注给药组和内服给药组,每组60只。以5 mg/kg体质量剂量分别采用静脉注射和内服2种给药途径给予健康蛋雏鸡甲磺酸达氟沙星溶液和脂质体混悬液,于给药后0.167、0.333、0.5、0.75、1、1.5、2、4、6、9、12、24 h各剖杀5只鸡,取血液、肝脏、肾脏、肺脏和肌肉样品。采用反相HPLC色谱内标法测定各组织中达氟沙星浓度。应用MCPKP分析软件处理血浆药物浓度-时间数据,比较2种剂型的组织药动学参数。结果显示,与溶液组相比,甲磺酸达氟沙星脂质体组肝脏、肺脏中的药物分布明显提高,肾脏中的分布降低;通过相对摄取率、靶向效率和峰浓度比3个靶向指标的对比,脂质体组明显提高了肺部靶向性,且在肺部有一定的缓释作用。     

单诺沙星在雏鸡体内的药动学及其抗菌后效应研究

本论文以高效液相色谱(HPLC)内标法为定量手段,研究了单诺沙星经静注、口服两种途径给药后在雏鸡体内的药物代谢动力学特征;以菌落计数法测定了单诺沙星对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌(金葡球菌)的体外抗菌后效应。静注和内服给药后血药浓度-时间数据分别符合无吸收因素二室开放式模型和一级吸收一室开放式模型。静注给药的主要药动学参数为:t1/2α0.3313h、t1/2β5.9940h、Vd7.5246L/kg、AUC5.6916μg/(mL·h)、CLB0.8935/(kg·h)。内服给药后主要药动学参数为:t1/2Ka0.3029h、t1/2K6.5128h、tmax1.2100h、Cmax0.5159μg/mL、AUC5.1329μg/(mL·h),生物利用度为90.18%。抗菌后效应(PAE)结果如下,浓度分别为0.5MIC、2MIC、4.MIC的单诺沙星对大肠杆菌的PAE测定值分别为(0.6464±0.0294)h,(1.2077±0.0284)h,(1.6529±0.0496)h,对金葡球菌的PAE测定值分别为(0.5660±0.0075)h,(1.1746±0.0057)h,(1.4913±0.0257)h。     

达氟沙星对施氏鲟非特异性免疫功能的影响

采用经口灌服的方法,分别用20、50和100 mg.kg-1达氟沙星对施氏鲟连续给药20 d(每天1次),并于给药后第5、10、15和20天测定非特异性免疫指标.结果表明:达氟沙星对肝脏和血清溶菌酶含量有抑制作用;20和50 mg.kg-1组对血清中酚氧化酶活力先诱导后抑制,100 mg.kg-1组则始终表现抑制作用;该药使白细胞数量和细胞吞噬百分比降低,但对白细胞吞噬指数及肝脏和脾脏系数无显著影响(P>0.05).可见,达氟沙星使施氏鲟的非特异性免疫能力降低,但对免疫器官的生长指数没有明显的影响.     

单诺沙星在健康与支原体-大肠杆菌合并感染鸡体内的药动学研究

以高压液相色谱 (HPLC)法为定量手段研究了单诺沙星在健康和支原体与大肠杆菌合并感染鸡体内的药动学特征。 60只健康鸡和 60只合并感染鸡内服单诺沙星 (5mg/kg)后 ,血浆的药时数据均符合一级吸收二室模型。健康和合并感染鸡的主要动力学参数分别如下 :t1 /2ka为 0 2 4 2 8和 0 31 82h,t1 /2α为 0 891 7和 1 550 2h ,t1 /2 β为 8 793 6和 1 2 62 0 0h ,Tp为 0 9377和 1 1 1 0 7h ,Cmax为 0 5487和 0 51 0 6μg/mL ,每小时为3 0 52 3和 3 660 2mg/L ,Tcp为 31 1 1 5和 39 1 8h。单诺沙星在鸡体内的药动学特征是吸收迅速且完全 ,体内分布广泛 ,但消除缓慢 ,有效浓度维持时间长。合并感染使单诺沙星在感染鸡体内的吸收、分布和消除均减慢 ,达峰时间、有效浓度维持时间延长     

Population pharmacokinetics for danofloxacin in the intestinal contents of healthy and infected chickens

Avian pathogenic Escherichia coli could cause localized and systemic infection in the poultry, and danofloxacin is usually used to treat avian colibacillosis through oral administration. To promote prudent use of danofloxacin and reduce the emergence of drug‐resistant E. coli strains, it is necessary to understand the population pharmacokinetics (PopPK) of danofloxacin in chicken intestines. In this study, reversed‐phase high performance liquid chromatography (HPLC) with fluorescence detection was used to detect the concentrations of danofloxacin in the contents of duodenum, jejunum, and ileum of the healthy and infected chickens after single oral administration (5 mg/kg body weight). Then, the PopPK of danofloxacin in intestines were analyzed using NONMEM software. As a result, a two‐compartment PK model best described the time‐concentration profile of duodenal, jejunal, and ileal contents. Interestingly, absorption rate (K_a), distribution volume (V), and clearance (CL) for danofloxacin from duodenal, jejunal to ileal contents were sequentially decreased in the healthy chickens. However, the trend of K_a, V, and CL of danofloxacin was changed dramatically in the intestine of infected chickens. K_a and V of danofloxacin in the jejunum were higher than in the ileum and duodenum. Compared with healthy chickens, K_a and V of danofloxacin in the duodenum decreased significantly, while increased in jejunum, respectively. It has been noted that K_a decreased and V increased in the ileum of infected chickens. Besides, CL in the duodenum, jejunum, and ileum of infected chickens was, respectively, lower than those of healthy chickens. Interestingly, the relative bioavailability (F) of danofloxacin in the ileum was relatively higher in both healthy and infected chickens. In addition, F in the duodenal, jejunal, and ileal contents of infected chickens was respectively higher than healthy chickens. In summary, the PopPK for danofloxacin in infected chicken intestines was quite different from healthy chickens. The absorption, distribution, and clearance of danofloxacin in healthy chickens decreased from duodenum to jejunum and to ileum. Moreover, the pharmacokinetic characteristics in the intestine of infected chickens changed significantly, and the pharmacokinetic characteristics in the ileum can be used as a representative of all intestinal segments.     

甲磺酸达氟沙星在鲫体内药物动力学及残留研究

 【目的】研究甲磺酸达氟沙星(Danofloxacin mesylate, DFM)在鲫体内的药物动力学和残留消除规律。【方法】在试验水温20℃时，鲫以10 mg·kg-1 b.w的剂量单次经口灌服甲磺酸达氟沙星后，用液－液提取、反相高效液相色谱法（RP-HPLC）测定血浆和组织中DFM的浓度。盐酸氧氟沙星做为内标。房室模型分析表明，其药物时间数据符合有吸收二室模型，吸收、分布迅速，但消除缓慢，半衰期（T1/2 Ka 、T1/2α、T1/2β）分别为0.63、4.96、47.79 h，最大血药浓度（Cmax）为3.23 ?g·ml-1，达峰时间（TP）为2.73 h，药时曲线下面积（AUC）为154 ?g·h·ml-1。非房室模型分析表明，平均滞留时间（Mean Residence Time, MRT）为58.56 h。【结果】组织中药物浓度在测定时间里均显著高于血浆（P＜s0.05），消除快慢依次为肾脏、肝胰脏、血浆、肌肉和皮肤，其消除半衰期分别为33、44、48、51、177 h。与其它组织相比皮肤消除最慢，建议其作为DFM在鲫体内的残留靶组织。在20℃时, 皮肤以100 ?g·kg-1为最高残留限量（maximum residue limit, MRL）建议休药期不低于23 d。     

优化超高效液相色谱法对鸡蛋中氟喹诺酮类药物残留的检测

为制定畜产品中沙星类药物残留高效实用的检测标准,建立一种测定鸡蛋中4种氟喹诺酮类药物(环丙沙星、恩诺沙星、沙拉沙星、达氟沙星)残留的超高效液相色谱检测方法。结果表明:4种氟喹诺酮类药物峰面积与质量浓度呈良好的线性关系,R2均大于0.999 8。环丙沙星、恩诺沙星、沙拉沙星的线性范围为0~500μg·L-1,达氟沙星的线性范围为0~100μg·L-1。鸡蛋样品中氟喹诺酮类药物的回收率为78.9%~95.3%,相对标准偏差为5.5%~8.7%,检出限为10μg·kg-1。