用磁珠富集法从AFLP片段中分离鹅微卫星DNA标记

用磁珠富集法从AFLP片段中分离微卫星DNA标记，可以避免基因组文库的构建和筛选这一繁重的工作，既节省时间又节约费用。利用少量的内切酶组合建立一系列AFLP DNA，然后用生物素标记的简单重复序列（SSR）作探针与其杂交，杂交复合物固定到包被有链亲和素的磁珠上，经过一系列洗涤过程，含有SSR的AFLP片段被吸附到磁珠表面。这些片段经洗脱下来后，先用对应的AFLP引物扩增，再进行克隆和测序，根据SSR两端的保守序列设计引物，经过多态性分析后，便可得到微卫星DNA标记。用这种方法已成功地从6个中国地方品种鹅中分离到30个微卫星DNA标记。其中有11个引物表现为多态性好，特异性强且相互之间并不连锁。各品种平均多态信息含量（PIC）在0．513～0．546之间。说明这11个微卫星均为高度多态，可作为有效的遗传标记用于鹅品种间遗传多样性和系统发生关系的分析，并为建立鹅遗传图谱、重要经济性状的基因定位及标记辅助选择奠定基础。     

五种核酸提取法对猪繁殖与呼吸综合征病毒提取效率的比较

目的：研究Trizol RNA提取法、杭州博日吸附柱RNA提取法、Promega核酸提取仪磁珠RNA提取法、西安天隆核酸提取仪磁珠RNA提取法、Thermo核酸提取仪磁珠RNA提取法等五种不同核酸提取方法对不同含量猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）阳性样品的相对提取效率,为动物疫病监测诊断实验室核酸提取方式的选择提供技术参考。方法用五种不同核酸提取方法对4份10倍梯度稀释的PRRSV阳性血清、2份PRRSV阳性组织悬液及其离心后的上清液共8份样品同时进行核酸提取,用荧光RT-PCR方法进行检测,获取各样品PRRSV荧光RT-PCR结果的CP值,分析五种提取方式的相对提取效率。结果对合适的提取样品,磁珠提取法相对提取效率最高,吸附柱法其次,Trizol提取法相对效率较差;在三种磁珠提取法中,提取效率相差在2个CP值内,差异不明显,但以天隆磁珠提取法提取效率更高。结论预装试剂结合仪器自动化操作的磁珠法提取效果稳定,效率最高;国产仪器国产试剂提取效率不亚于进口仪器和试剂。     

木糖醇发酵菌株固定化细胞的改性研究

采取了3种不同的方法来改进海藻酸钙微珠的性能,即添加改性剂法、置换法和混合法,考察了改性剂添加量、置换剂浓度、钙化时间以及置换时间对微珠强度的影响.在海藻酸钠与细胞混合液中添加质量分数1.0 %的MgO,钙化4 h时固定化细胞的强度最大.该固定化细胞可进行36 d共12批次木糖醇发酵,最终木糖醇质量浓度平均值为43.2 g/L,木糖醇得率平均值为53.8 %.