银狐生长激素成熟mRNA真核表达载体的构建

用PCR方法，从含有银狐生长激素mRNA的阳性重组质粒pMD18-T-IGH中亚克隆出生长激素基因，然后定向插入到真核表达载体pcDNA3．1( )中，通过酶切、质粒PCR和序列测定对质粒进行鉴定表明，成功构建了银狐生长激素成熟mRNA真核表达质粒pcDNA3．1-IGH．     

保护剂减轻氯嘧磺隆对玉米残留药害的作用机理

采用沙培方法,利用生理生化试验及半定量PCR方法,研究了保护剂HN对玉米ALS、GSTs活性及GSTs的mRNA表达量的影响。结果表明,保护剂对6个玉米品种的ALS、GSTs均具有诱导作用,但对不同品种的诱导增加百分率却不同。对氯嘧磺隆敏感的玉米东甜3号的GSTs诱导增加百分率达到59.18,对其ALS的诱导倍数为叶部1.29倍,根部2.30倍;对氯嘧磺隆耐性较高的玉米屯玉88GSTs诱导增加百分率为19.26,其ALS的诱导倍数为叶部1.07倍,根部2.07倍。氯嘧磺隆和保护剂均可以诱导玉米GSTsmRNA的相对表达量的增加,保护剂的诱导作用更强。     

不同来源木聚糖酶对黄羽肉鸡小肠绒毛形态结构和黏膜生长抑素mRNA表达的影响

本文旨在比较研究小麦型饲粮中添加不同来源木聚糖酶对黄羽肉鸡小肠绒毛形态结构和黏膜生长抑素(SS)mRNA表达的影响.选择22日龄、体重相近的健康黄羽肉鸡375羽,随机分成3个组,每组5个重复,每重复25羽.对照组饲喂小麦型基础饲粮,试验Ⅰ和Ⅱ组分别饲喂在基础日粮中添加250 mL/t真菌性和细菌性木聚糖酶的试验饲粮,试...     

脂联素对体外培养新生牛脂肪细胞ADPN、HSL mRNA表达的影响

取单层生长状态良好的犊牛脂肪细胞,分别添加0、2.5、5、15、30、50、100 μg/mL外源牛重组脂联素（adiponectin,ADPN）,培养12 h后提取总RNA,采用荧光定量PCR方法检测外源脂联素对脂肪细胞ADPN mRNA和HSL mRNA表达水平的影响。结果显示,随着ADPN添加量的增多,ADPN mRNA相对表达量呈下降趋势;添加ADPN 15 μg/mL时,HSL mRNA的表达量达到峰值,之后呈下降趋势。结果表明体外培养的脂肪细胞中ADPN mRNA表达量受自身的负调节,而添加适量的ADPN可刺激脂肪细胞HSL mRNA的表达。     

PrPc重组蛋白脑内接种金黄地鼠对mRNA表达的影响

为明确将牛PrPc重组蛋白接种金黄地鼠脑内是否引起异常临床表现、脑组织病理学变化及对其mRNA表达产生影响,为进一步研究PrPc蛋白与异构体PrPsc 的结构转换机制提供基础数据,将纯化的牛PrPc重组蛋白磷酸盐缓冲液制剂进行地鼠颅内接种,约3 μL/只,对照接种磷酸盐缓冲液（PBS）;102 d后取出脑组织：一部分福尔马林固定后进行常规H.E.染色观察, 另一部分提取脑组织总RNA,进行实时荧光定量RT-PCR检测.结果表明：处理未见临床异常表现;大脑、小脑、脑干组织病理学检测未见海绵状空泡变性和淀粉样斑;大脑PrPc mRNA表达水平无显著性差异.上述结果表明,用PrPc重组蛋白接种,在检测时间102 d内未引起金黄地鼠行为和脑组织的异常改变.     

梅山猪、大白猪和梅大杂交猪背最长肌中差异表达的14个表达序列标签的分离、鉴定及组织表达分析

为了揭示猪杂种优势的分子机理,利用mRNA差异显示技术研究梅山猪,大白猪和梅大杂交猪背最长肌中基因表达的差异,分离14条在杂种与纯种背最长肌中差异表达的表达序列标签(EST),并用半定量RT-PCR鉴定.核苷酸序列分析表明,这14个EST与已知的基因或表达序列标签没有明显的同源性,随后这14条EST被提交到GenBank数据库.组织表达谱分析揭示了这些EST在心、脾、肝、肾、小肠、卵巢、肺等绝大多数组织中表达,说明这些基因对生命过程很重要.这些研究结果表明梅山×大白杂交组合的杂种与纯种之间的不同基因差异表达的方向存在巨大差异,猪杂种优势可能是在一定阶段有诸多不同的必不可少的基因向各种方向差异表达共同作用的结果.     

玉米抗寒基因的克隆与表达研究

用DDRT-PCR技术研究玉米自交系承18在常温和不同低温处理下基因表达的变化,分离了10条差异表达的cDNA。序列分析结果表明:其中部分与前人克隆的抗逆cDNA同源,部分与信号传导相关基因同源,部分与功能未知的cDNA同源。用Northern杂交方法对差异片段MCI16做了进一步鉴定,同时还对玉米Cat3、拟南芥CBF1和FAD3基因在不同低温处理的玉米幼苗中的表达特性进行了研究,结果表明:MCI16、Cat3等基因受低温的诱导表达,对提高玉米的抗寒力起积极作用。     

Fat depot‐specific differences in leptin mRNA expression and its relation to adipocyte size in steers

ABSTRACT This experiment was conducted to investigate leptin mRNA expression, adipocyte size, and their relationship in several adipose tissues of fattening steers. Subcutaneous, perirenal, intermuscular and intramuscular adipose tissues were collected from three crossbred steers (Japanese Black cattle X Holstein) aged 21 months. The mRNA level and adipocyte diameter were determined in these adipose tissues. The intramuscular adipose tissue had a lower leptin mRNA level than the intermuscular and perirenal adipose tissues (P < 0.05). Leptin mRNA level was lower in the subcutaneous depot than in the intermuscular depot (P < 0.05). Adipocyte diameter was larger in the intermuscular adipose tissue than in the subcutaneous and intramuscular adipose tissues (P < 0.05). Leptin mRNA level was positively correlated with adipocyte diameter (r² = 0.81, P < 0.05). These results suggest that the cattle have fat depot‐specific differences in leptin gene expression, which are a result of a difference in adipocyte size.     

解偶联蛋白mRNA研究进展

解偶联蛋白（UCPs）是机体组织特异表达的线粒体内膜蛋白质，有阻止肥胖的作用。UCPs有5种同族体，UCP1在啮齿类动物调节动物体重、维持体温有重要作用。UCP2主要存在于成年大型动物和人类，与糖尿病有关，UCP3主要存在于骨骼肌一啮齿类动物的棕色脂肪组织中，提供非颤抖的生热作用。UCP4是小鼠和非人类的灵长目动物大脑特有的线粒体UCPs同族体，可能与控制食欲有关。UCP5存在于人和小鼠的多 , 大脑和附睾特别丰富，受寒冷和绝食的影响，在UCPs转基因或基因敲出的实验动物可改善肥胖症，UCPs同族体受到多种因子调控。食物调节影响UCPs mRNA同族体在不同组织的特异表达。高等植物线粒体UCPs同族体PUMP、stUCP也有同样的解偶联作用。