两种中药成分对酵母菌淀粉酶和蛋白酶活力影响的研究

酵母菌在培养过程中添加不同浓度盐酸小檗碱和齐墩果酸对其淀粉酶及蛋白酶活力的影响。结果表明添加不同浓度盐酸小檗碱对酵母菌淀粉酶和蛋白酶活力存在明显的抑制作用,且随着其浓度的增加,抑制作用也越来越强,齐墩果酸也使淀粉酶活力下降,但对蛋白酶活力先抑制而后又增强。添加齐墩果酸对酵母菌酶活力的影响要比添加盐酸小檗碱对酶活力的影响大。     

不同饲养模式对妊娠母猪行为、唾液皮质醇和淀粉酶水平的影响

本试验利用母猪行为以及唾液皮质醇和淀粉酶含量探索空间限制对母猪生理心理状态造成的影响。试验选择大白妊娠母猪64头,随机平均分成2组,分别采用限位栏(180 cm×60 cm×110 cm)和群养模式(568 cm×448 cm×50 cm)饲养,群养模式下每圈8头母猪,共4圈。于试验1、3、5、6、8、10、11、13、15周第1、2天分别采用10 min间隔扫描取样法记录母猪行为和采集试验母猪唾液样本,检测唾液皮质醇水平和唾液淀粉酶含量。结果表明:限位栏母猪表现无食咀嚼、啃栏、啃槽行为的次数显著高于群养母猪。限位栏母猪的唾液皮质醇和淀粉酶表现出相反的分泌趋势,无食咀嚼与唾液淀粉酶含量之间存在显著的正相关关系(r=0.336,P=0.048)。群养模式下试验母猪的唾液皮质醇水平、淀粉酶含量与无食咀嚼行为之间没有显著性相关的关系。     

不同植被土壤产淀粉酶放线菌的分离与筛选

为了从土壤中获得产淀粉酶放线菌,对陕西省洛南县7种植被下不同土层土壤中的产淀粉酶放线菌进行了分离纯化,研究了化学抑制剂K2Cr2O7质量浓度和土壤稀释液浓度对放线菌分离效果的影响,并通过菌落形态特征和生理生化指标对产淀粉酶放线菌进行了综合分析。结果表明,当土壤稀释液为10-5～10-4 g/mL、K2Cr2O7质量浓度为50mg/L时,最有利于放线菌的分离;同一植被下表层土壤(5～20cm)中放线菌数量显著多于深层土壤(20～30cm);从7种不同植被下土样中共筛选出10株放线菌菌株,其中有8株是产淀粉酶放线菌菌株,从槐树下土壤中分离出的M4菌株对淀粉的水解能力最强,u0为14.27,并初步被判定为诺卡氏菌属放线菌;8株产淀粉酶放线菌均能利用葡萄糖进行糖酵解,6株能利用乳糖,7株不能利用蔗糖,6株不能利用麦芽糖,仅2株能够产生色氨酸酶,并且所有菌株均具有较强的耐碱性(pH值7.0～7.5),6株具有较强的耐盐性(10%),6株具有柠檬酸盐利用能力。     

不同水产复合酶对芙蓉鲫的应用效果研究

试验芙蓉鲫;500尾随机分成4个组,每组5个重复．每个重复放养25尾鱼。对照组为不添加复合酶制剂的基础日粮,试验组在基础日粮下添加不同公,--j水产复合酶微丸,添加量为200g／t,养殖时间为8周。结果表明：添加水产复合酶的生长性能、对肝脏蛋白酶和淀粉酶都比对照组的高。添加了溢多利公司水产复合酶试验组的终末尾均重和增重率比对照组提高5．12％、12．09％,饵料系数降低了7．14％且差异显著（P〈0．05）,肥满度提高7．55％,差异不显著（P〉0．05）;溢多利水产复合酶对淀粉酶活性提高,分别较公司1复合酶、对照组、公司2的复合酶三组提高1．29％、3．49％、4．73％;蛋白酶的活性提高6．46％、1．77％、0．44％。由此可见,添加200g／t的溢多利水产复合酶对芙蓉鲫的生长性能和内源酶活性提高的效果是最好的。     

新疆冰川冰缘冻土低温淀粉酶部菌株分子生物学鉴定及酶学特性研究

[目的]对新疆冰川冰缘地区冻土中筛选出的具有良好产低温淀粉酶能力的菌株进行分子生物学鉴定,分析其酶学特性.[方法]用种子培养液活化菌株提取基因组DNA进行PCR扩增,将扩增成功菌株的PCR产物测序结果通过NCBI数据库比对,对冻土中产低温淀粉酶菌株的16S rDNA序列用MegAlign Fasta软件进行系统发育分析.利用Yoo改良法测低温淀粉酶酶活力.[结果]菌株A-2,A-3,A-4经16S rDNA序列分析获得的序列与数据库中解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens strain NBRC 15535 16S ribosomal RNA,partial sequence(NR_04145))比对相似率达到99;.该菌株产生的低温淀粉酶的最适作用温度为30℃,最适pH为6.[结论]菌株A-2,A-3,A-4均属解淀粉芽孢杆菌.     

饲料大豆蛋白对鲤鱼消化酶活力和血液主要生化指标的影响

【目的】探讨大豆蛋白对鲤鱼消化性能和健康状况的影响。【方法】以初始体质量(50.13±0.41)g的健康鲤鱼(Cyprinus carpio)为试验对象,在室内单循环控温养殖系统中,以去皮豆粕分别替代质量分数0%(CK),15%,30%,45%和60%的鱼粉蛋白,配制成5种等蛋白(360 g/kg)等能(15.2 MJ/kg)的半精制饲料,研究大豆蛋白对鲤鱼消化酶活力和血液主要生化指标的影响。【结果】随着大豆蛋白替代鱼粉蛋白比例的增加,鲤鱼肝胰脏和肠道的蛋白酶活力下降,当大豆蛋白替代45%鱼粉蛋白时,鲤鱼后肠和肝胰脏的蛋白酶活力极显著低于对照组(P<0.01);大豆蛋白60%替代组鲤鱼后肠的淀粉酶活力极显著低于对照组(P<0.01);而大豆蛋白对鲤鱼肝胰脏和肠道的脂肪酶活力影响不显著(P>0.05)。当大豆蛋白替代45%鱼粉蛋白时,鲤鱼血糖和总胆固醇浓度及谷草转氨酶活性显著低于对照组(P<0.05),甘油三酯浓度显著高于对照组(P<0.05),而尿素氮浓度、谷丙转氨酶活性及总蛋白、球蛋白和白蛋白的含量与对照差异不显著(P>0.05)。【结论】在本试验条件下,当大豆蛋白替代45%鱼粉蛋白时,虽然对鲤鱼的生长状况没有显著影响,但对鲤鱼后肠和肝胰脏蛋白酶的活力及部分血液主要生化指标产生了影响。     

Construction of a Food-Grade Expression Vector Based on pMG36e by Using an α-Galactosidase Gene as a Selectable Marker

Construction of a food-grade expression vector for application to lactic acid bacteria（LAB） is of importance for dairy fermentation system. An α-galactosidase（aga） gene encoding an enzyme degrading melibiose was amplified by PCR from the plasmid p RAF800 of Lactococcus lactis NZ9000. The aga gene was introduced into pMG36 e to substitute the p rimary antibiotic selectable marker of pMG36 e, resulting in construction of a new food-grade expression vector pMG36-aga. To testify the expression efficiency of exogenous gene in pMG36-aga, a 1.5 kb long α-amylase（amy） gene from Ba cillus li cheniformis was cloned by PCR and introduced into the plasmid pMG36-aga. The resultant plasimd pMG36-aga-amy was transformed into L. lactis ML23 by electroporation. The positive clones were selected with the medium containing melibiose as the sole carbon source. Th e selection efficiency of aga was 8.71×103 CFU with a standard deviation of 9.1×102 CFU ？g-1 DNA of pMG36-aga. Furthermore, the SDS-PAGE analysis showed that the pMG36-aga-amy expressed a 56.4 kDa protein which was the same as the putati ve molecular weight of α-amylase. The starch plate assay also indicated that L. lactis ML23 displayed high activity of α-amylase by expressing of amy gene of pMG36-aga-amy.     

Pigment deposition and in vitro screening of natural pigment sources for enhancing pigmentation in male Siamese fighting fish (Betta splendens Regan, 1910)

Distribution in pigment deposition was studied in male Siamese fighting fish (Betta splendens Regan, 1910) of solid Blue and solid Red phenotypes. Growths were similar, and also indicated by similar activity ratio of trypsin to chymotrypsin. Growth strategy was different at maturing stage, whereas trypsin expression decreased in solid Blue while chymotrypsin expression decreased in solid Red (P ≤ 0.05). Ranking of total pigment contents was muscle > skin > caudal fin > anal fin > dorsal fin > pelvic fin > pectoral fin. Immature fish had similar total contents and concentrations of pigments, except solid Blue had higher total contents in dorsal fin than solid Red. At maturing stage, solid Blue showed higher total pigment contents than solid Red due to higher contents in the fins. Solid blue had higher concentration in pelvic fin, while solid Red had higher in pectoral and dorsal fins. Age, phenotype and their interaction influenced pigment deposition. Determinations of pigment levels, high temperature tolerant of pigments and in vitro digestibilities of pigments, protein and carbohydrate from twenty natural sources indicated that fermented red rice was the most suitable pigment source, following with Chlorococcum sp.     

不同贮存条件下野坝子蜜淀粉酶活性随时间的变化规律研究

 采集封盖野坝子蜜,分装后分设阳光照射、室温见光、室温避光、冷藏和冷冻等5种条件下贮存,并分别于第1、5、10、15、20、30、60和90 d ,采用分光光度法测定蜂蜜中淀粉酶活性。结果显示,新鲜的封盖野坝子蜜淀粉酶活性为（20.848±1.121） U/g,在不同的贮存条件下贮存三个月,,阳光照射组、室温见光组、室温避光组和冷藏组的淀粉酶活性显示出相似的变化规律,即先上升后下降;冷冻组淀粉酶活性下降不显著（P>0.05）。五种贮存条件对淀粉酶活性的影响由小到大依次为冷冻、冷藏、室温避光、室温见光和阳光照射,表明蜂蜜的最佳贮存条件为冷冻保存,冷藏保存应控制在3个月以内为宜.     

产胞外淀粉酶枯草芽孢杆菌的分离筛选及其紫外诱变育种

为提高枯草芽孢杆菌产生淀粉酶能力,从养虾池、混养池及污染河流的底质活性污泥中分离到12株枯草芽孢杆菌,通过淀粉降解试验筛选到产酶能力较高的菌株H4和H5,菌株淀粉酶活性分别为38.66,37.10 U/mL.以筛选到H4和H5为原始菌株,采用紫外诱变的方法对H4和H5进行连续诱变筛选产淀粉酶高的突变株.结果发现,第一次诱变后突变株的酶活分别为原始菌株的107%和111%;经过第二次诱变后,H4的突变株H4 Ⅱa,H5的突变株H5Ⅱa和H5Ⅱb的产酶能力有很大程度的提高,分别为原始菌株的147%,136%和135%,酶活达56.95,50.47和50.02 U/mL,说明紫外连续诱变有利于突变株产酶能力的提高.