沟叶结缕草八氢番茄红素基因ZmPSY的克隆、亚细胞定位及表达分析

八氢番茄红素合成酶(phytoene synthase,PSY)是生物类胡萝卜素合成途径中的一个关键酶。本实验从沟叶结缕草中克隆得到ZmPSY基因(Genbank登录号为:KY264128)。该基因开放阅读框为1230 bp,编码409个氨基酸残基。亚细胞定位结果显示,ZmPSY定位于叶绿体中。实时荧光定量分析表明,ZmPSY基因在沟叶结缕草幼嫩的叶片中表达量最高。ZmPSY可受外施激素脱落酸(ABA)的诱导,但受外施激素水杨酸(SA)、茉莉酸甲酯(MeJA)的抑制。本实验为深入研究沟叶结缕草八氢番茄红素合成酶基因的功能奠定了基础。     

不同坪床基质物理性质变化及对兰引Ⅲ号结缕草生长的影响

运动场草坪质量主要取决于其坪床结构及其建造质量,其中坪床建造材料的选择对草坪的坪用质量、使用寿命和后期养护管理费用的影响最大。兰引Ⅲ号结缕草广泛用于我国南方运动场草坪建植。为探究不同坪床基质物理性质变化及对兰引Ⅲ号结缕草生长的影响,本实验设计了5种坪床结构:A(100%纯砂)、B(砂∶泥炭=85∶15)、C(砂∶土=85∶15)、D(砂∶土∶泥炭=85.0∶7.5∶7.5)、E(100%纯土)。实验过程中测定各坪床土壤容重、土壤总孔隙度、土壤毛管孔隙度、土壤非毛管孔隙度和土壤饱和导水率5种物理性质指标及草坪色泽、再生速度及地上生物量3种生长指标。结果表明,5种坪床基质的容重在建坪初期差异较大,至建坪后期趋于一致;砂基坪床的通气性和导水性都显著优于纯土坪床,但砂基中无论是加入15%的泥炭或15%的土,还是加入15%的泥炭和土(7.5%+7.5%)的混合物,在孔隙度和导水率上均无明显差异。纯土坪床的草坪表观质量优于砂基坪床,颜色、再生速度、地上生物量均表现较好。砂+泥炭坪床,砂+土坪床和砂+土+泥炭坪床表现相近,但略优于纯砂坪床。综合5种坪床的物理性质变化及草坪质量,认为砂基坪床通气好、排水性能强,适合建植运动场草坪,其中以砂与泥炭混合基质较好;纯土坪床通气不良,排水性能较差,不适合建植运动场草坪。     

结缕草高频再生体系的建立和优化

以结缕草叶片为外植体进行离体再生研究.结果表明:叶片愈伤组织诱导的最佳培养基是 MS+1.5 mg·L-1 2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)+0.5 mg·L-1 6-苄基腺嘌呤(6-BA)+26 g·L-1 蔗糖+5.0 g·L-1 琼脂,诱导率为 65.36%,无性世代增殖倍数高达 9.56;正交试验和方差分析筛选出不定芽分化最佳培养基为 MS+3.0 mg·L-1 6-BA + 0.5 mg · L-1 萘乙酸(NAA) +1.5 mg·L-1 AgNO3+35 g·L-1 蔗糖+6.5 g·L-1 琼脂,分化率为 67.30%,增殖系数为 8.67;生根培养基选用 1/4 MS+0.2 mg·L-1 吲哚丁酸(IBA)+0.3 mg·L-1 NAA+28 g·L-1 蔗糖+4.5 g·L-1 琼脂,生根率为 90.00%.     

外源ABA处理提高结缕草抗寒性试验

为了探讨外源ABA对结缕草在低温胁迫抗性中的作用,以盆栽结缕草叶片喷施5.0、10.0、15.0 mg/L ABA及根部浇灌相应浓度ABA后,在8℃/5℃（昼温/夜温）低温胁迫下,分别于低温胁迫0、1、2、3、4d测定叶片相关生理参数.结果表明：3种浓度ABA处理均能提高叶片蔗糖磷酸合成酶（SPS）和蔗糖合成酶（SS）酶的活性,提高叶片可溶性总糖、叶绿素含量和相对含水量,降低叶片相对电导率及丙二醛（MDA）含量,减轻低温胁迫对结缕草的伤害,其中以10 mg/L处理的效果最好.说明施用外源ABA可以提高叶片蔗糖合成酶的活性,促进蔗糖的合成,降低细胞水势,提高细胞的保水能力,从而加强结缕草对低温胁迫的抗性.     

水分和践踏胁迫对结缕草生长及生理生化指标的影响

为探讨草坪耐践踏性与草坪草含水量的关系,研究在不同水分和践踏胁迫下的生长和生理指标的变化,以大田结缕草（Zoysia grass “JD-1”）草坪（2年生）为对象,采用大田裂区设计（践踏胁迫为主区,水分胁迫为副区）布设试验样地,通过模拟践踏和称重控水处理,测定草坪草密度、株高、地上生物量等生长指标和叶片相对电导率、游离脯氨酸含量、丙二醛含量和可溶性糖含量等生理指标。结果表明,水分和践踏胁迫对结缕草生长和生理指标产生明显影响,并且在重度水分胁迫和重度践踏胁迫下的影响有叠加效应;水分胁迫能够使草坪密度下降、株高变矮,地上生物量减少,且随水分胁迫程度增加呈递减变化,各水分处理之间差异显著（P<0.05）;在轻度水分胁迫下,结缕草密度、地上生物量和叶片相对电导率、MDA含量、游离脯氨酸含量和可溶性糖含量在不同的践踏胁迫下的差异不显著（P>0.05）;在无水分胁迫和重度水分胁迫下各指标的差异显著性有所不同。至30 d恢复生长,各指标的变化与处理期变化趋势一致:践踏胁迫后的密度增加,株高生长量和地上生物量的明显增加,与CK相比差异不显著（P>0.05）;而水分胁迫后的密度、株高和地上生物量的差异显著（P<0.05）;叶片相对电导率、MDA含量、游离脯氨酸含量和可溶性糖含量等生理指标与CK相比差异不显著（P>0.05）,且都能恢复正常生长水平。表明在一定程度上轻度水分胁迫有助于提高结缕草的耐践踏性。     

结缕草属植物杂交后代杂种真实性鉴定——SRAP分子标记

SRAP标记是基于PCR技术的一种新型分子标记。本研究通过SRAP分子标记技术对结缕草属植物种间杂交的5个组合37份杂交后代进行了真假杂种的鉴定,以为育种工作进一步开展奠定基础。首先筛选出在父本中能扩增出,而在母本中没有的特征带的引物,共筛选出9对引物对后代进行真实性鉴定。把父母本和后代一起进行PCR扩增、电泳,根据后代中是否能扩增出父本特征带而进行鉴定。结果表明,37个杂交后代中有32个后代具有父本特征带,被鉴定为真杂种。同时,从杂种扩增的谱带来看,条带清晰、稳定且后代出现了丰富的变异,主要表现为新谱带的出现或某些谱带的消失。据此认为,SRAP标记可以有效地对结缕草属杂交后代进行真实性鉴定和遗传分析,为杂交育种提供了理论依据。     

NaCl胁迫对结缕草生长及光合生理的影响

为研究NaCl胁迫对结缕草(Zoysia japonica)生长及光合生理的变化规律,采用盆栽试验观测不同浓度(0, 100, 200, 300, 400和500 mmol·L^-1)NaCl溶液处理对结缕草生长及光合生理的影响。结果表明:在NaCl处理第7, 14和21 d,当NaCl浓度为300, 400和500 mmol·L^-1时,结缕草的相对生长速率、生物量和叶片相对含水量均显著低于对照;随NaCl浓度的增加,结缕草相对电导率、丙二醛含量和可溶性蛋白含量均有增加的趋势,且NaCl胁迫第21 d时,400和500 mmol·L^-1 NaCl浓度处理使结缕草相对电导率、丙二醛含量和可溶性蛋白含量均显著高于对照。结缕草的相对生长速率、生物量和叶片相对含水量均随胁迫时间的延长而显著降低,结缕草相对电导率、丙二醛含量、可溶性蛋白含量均随胁迫时间的延长而显著升高。随NaCl胁迫程度的增加结缕草的净光合速率(P_n)、气孔导度(G_s)、蒸腾速率(T_r)、叶片水分利用效率(WUE)呈逐渐降低的趋势,且500 mmol·L^-1 NaCl浓度处理比对照显著降低;分别在NaCl胁迫第14和21 d时,500 mmol·L^-1 NaCl浓度处理与对照相比,结缕草的胞间CO₂浓度(C_i)和气孔限制值(L_s)显著增加,说明盐胁迫对结缕草光合作用的影响在盐胁迫早期是由气孔限制导致的,在后期是由非气孔因素导致的。     

广东地区马尼拉草坪冬季盖播保绿技术研究

在马尼拉草坪上用多年生黑麦草品种博士和夜影进行冬季盖播保绿技术试验研究，结果表明：冬季在马尼拉草坪上进行盖播的景观效果要远好于单播草坪，完全达到了草坪冬季常绿的目的，同时播种量和草种的选择也直接影响着盖播草坪的冬季景观效果。10～15g／m2的播种量用于马尼拉草坪的冬季盖播保绿较为合适，此外，从试验所用的两个草种的冬季综合坪用性状来分析，多年生黑麦草品种夜影的盖播效果要稍优于博士。