牧区极端条件下绵羊饲喂秸秆应急料的研究

为研究小麦(Triticum aestivum)秸秆型及玉米(Zea mays)秸秆型全价颗粒饲料作为家畜草料空缺期的应急料,在高寒牧区特殊气候条件下对甘肃高山细毛羊育成羊生长发育的影响,本研究选择体况相近的6月龄甘肃高山细毛羊育成母羊48只,随机分为试验组Ⅰ(18只,每只仅饲喂小麦秸秆型全价颗粒饲料1.2 kg·d^–1)、试验组Ⅱ(17只,每只仅饲喂玉米秸秆型全价颗粒饲料1.2 kg·d^–1)、对照组[13只,每只饲喂玉米0.05 kg·d^–1+燕麦草(Avena sativa) 0.2 kg·d^–1],在舍饲条件下进行为期16 d的饲喂试验。结果表明:试验组Ⅱ羊只平均日增重显著高于对照组(P <0.05);试验组Ⅱ羊只血清中总蛋白、球蛋白的浓度显著高于对照组(P <0.05);试验组Ⅰ羊只血清中谷草转氨酶、乳酸脱氢酶的活性及白蛋白的浓度显著高于对照组(P <0.05),试验组Ⅱ与对照组无显著差异(P> 0.05)。由此可见,用玉米秸秆型全价颗粒饲料作为应急料优于传统的燕麦...     

褪黑素受体MT1和MT2在绵羊胃中的分布及表达

【目的】应用分子生物学技术探究绵羊不同胃室组织褪黑素(MT)特异性膜受体MT1和MT2的分布规律及表达模式,以初步探明绵羊不同胃室组织褪黑素调节胃消化的生物效应机制。【方法】采集绵羊瘤胃背囊、瘤胃腹囊、网胃、瓣胃和皱胃5个组织部位,用ELISA、实时荧光定量PCR、免疫组化和Western blotting方法检测褪黑素特异性膜受体MT1和MT2在绵羊胃组织不同部位的分布规律及表达模式。【结果】ELISA结果显示,绵羊各胃组织中均含有褪黑素,且皱胃中褪黑素含量最高,瓣胃次之,瘤胃背囊、瘤胃腹囊和网胃中均较低。实时荧光定量PCR结果显示,MT1和MT2基因mRNA在皱胃中含量均最高,其次是瘤胃腹囊,在瘤胃背囊和网胃中含量较低。免疫组化结果显示,MT1和MT2蛋白在绵羊各胃组织中均有分布,主要表达于各胃组织的黏膜层,且在皱胃腺体中的分布呈从底部到颈部逐渐增多的趋势。Western blotting结果显示,MT1和MT2蛋白在网胃中表达均最高,瓣胃次之,在瘤胃背囊、瘤胃腹囊和皱胃中表达均较低。【结论】褪黑素在绵羊各胃组织中差异化表达从而发挥多样性生理功能,可能通过与胃组织上特异性受体MT1和MT2结合,通过信号传导系统而调控前胃受食糜刺激后发生反刍生理过程。     

哈萨克羊iNOS基因多态性与布鲁氏菌病的相关性分析

试验旨在探讨哈萨克羊诱导型一氧化氮合酶（iNOS）基因多态性与布鲁氏菌病的相关性。使用虎红平板凝集试验（RBPT）方法对231只哈萨克羊血清进行布鲁氏菌病血清学检测,参考GenBank中绵羊iNOS基因序列,针对其第6、7、8外显子及其邻近内含子片段设计引物,利用PCR-SSCP技术和DNA测序技术对231只哈萨克羊的iNOS基因进行多态性检测,分析其SNPs与哈萨克羊布鲁氏菌病易感性的相关性。结果表明,67只哈萨克羊为布鲁氏菌感染阳性,阳性检出率为29.00%。在哈萨克羊iNOS基因的外显子6和8片段上未检测到多态位点,在外显子7片段上检测出F7-T18054C和F7-C18084T 2个多态位点,在F7-T18054C多态位点上检测到3种基因型（TC、TT、CC）,优势等位基因和基因型分别是C型和CT型,其等位基因频率和基因型频率分别是0.660和0.446。在F7-C18084T多态位点上检测到2种基因型（CT、CC）,优势等位基因频率和基因型分别是C和CC型,其等位基因和基因型频率分别是0.946和0.892。F7-C18084T属于低度多态（PIC<0.25）,F7-T18054C属于中度多态（0.25 < PIC < 0.5）。相关性分析表明,F7-T18054C和F7-C18084T多态位点与布鲁氏菌病易感性无显著相关性（P>0.05）。试验结果表明,哈萨克羊iNOS基因F7-T18054C和F7-C18084T多态位点与布鲁氏菌病易感性不存在相关性。     

Effect of water restriction on milk yield and quality in Lacaune breed ewes

The effect of water restriction on body weight, body condition score, milk yield, and milk composition and rheological characteristics in intensively reared Lacaune ewes was evaluated. After 7 days of adaptation, the trial lasted 28 days. Thirty lactating ewes (48 ± 5 months of age; mean value ± standard deviation) at the beginning of third lactation month were divided into three groups (n = 10), corresponding to the following water restriction treatment: a group control received no drinking water restriction (W100), and two groups received water to the extent of 80% and 60% of W100 daily consumption (W80 and W60 group respectively). The effects of water restriction were assessed at the beginning of experiment (D0), at D14 and D28. The W60 group resulted in a significant decrease in body weight, body condition score, milk yield and feed consumption of hay due to the experimental treatment; whereas a marked increase in both W60 and W80 groups of milk lactose, urea, sodium, sodium chloride content and titratable acidity was observed. Rheological parameters of milk, rennet coagulation time and curd‐firming time were positively affected by water restriction treatments, with a decrease in both experimental groups of the time required for the formation of a stable and firm curd. Results highlight the importance of water consumption in dairy sheep. The scarce availability of water, significantly affecting ewes milk production, is worthy of particular attention in arid area where water stress‐resistant breeds should be considered. This study underlines that milk yield, being closely linked to the availability of water of the breeding habitat due to its high water content (about 81%), could be reached in area where water is not a limiting factor without reducing the genetic expression of the animals. Less severe water restrictions, such as 20% of daily voluntary water intake, produce no detrimental effect on milk yield.     

乌骨绵羊和黑色素的研究进展

黑色素在生物体内起着重要的作用,本文从黑色素的分类、生物合成机制、分析方法、结构、理化性质和功能、分布、沉积等方面进行了阐述,并对新近在云南发现的乌骨绵羊乌质性状形成相关的黑色素的生成的基因进行了描述。     

中国美利奴羊TLR2基因多态性及其与布鲁氏菌病的相关性分析

试验旨在研究Toll样受体2（Toll-like receptor,TLR2）基因的多态性及其与中国美利奴羊布鲁氏菌病易感性的相关性。利用生物信息学方法对NCBI上公布的绵羊TLR2基因序列进行比对,选出多态位点丰富的片段进行扩增,运用PCR-SSCP的方法对206个中国美利奴布鲁氏菌病阴性样本和80个中国美利奴羊布鲁氏菌病阳性样本进行TLR2基因的多态性检测,然后对不同等位基因的PCR产物进行测序,确定该基因的多态性位点,经卡方检验分析每个SNP位点的等位基因频率、基因型频率及其多态性与布鲁氏菌病易感性的相关性,利用生物信息学软件分析RNA二级结构及蛋白质的二级结构。结果表明,在279 bp的序列中共检测到3个SNPs,分别为：C1731T、G1737C和G1749T,均未引起对应氨基酸的改变,属于无义突变。这些位点在病例组和对照组之间的等位基因频率及基因型频率均不存在显著差异（P>0.05）。各突变位点均能引起RNA二级结构和最小自由能的改变,而蛋白质的二级结构均未改变。由此得出,中国美利奴羊TLR2基因的3个SNPs位点（C1731T、G1737C和G1749T）与中国美利奴羊布鲁氏菌病易感性无相关性。     

中国地方绵羊群体TYRP1基因遗传变异研究

本研究旨在了解酪氨酸酶相关蛋白1（tyrosinase related protein 1,TYRP1）基因在中国地方绵羊群体内的遗传变异,以及TYRP1基因突变与不同毛色表型绵羊群体的相关性。通过直接测序法和PCR-RFLP技术对10个中国地方绵羊群体进行单核苷酸多态性（SNP）检测,利用Beagle、PLINK和POPGENE等软件对突变位点数据进行单倍型构建、连锁不平衡分析和遗传变异研究。突变位点检测结果表明,在绵羊TYRP1基因内识别了13个SNPs,其中位于TYRP1基因外显子上的10个SNPs位点,除个别位点在大尾寒羊、中国美利奴羊和岷县黑裘皮羊中没有发生突变外,其他突变位点在所有绵羊品种中均出现不同程度变异,说明中国地方绵羊群体具有较高的遗传多样性。单倍型分析结果表明,所有样本中共有42个单倍型,优势单倍型0000000000（245/918）、0100000001（91/918）在所有绵羊群体中均存在,除单倍型0101100000（93/918）在中国美利奴羊中没有出现,单倍型0001000001（69/918）在岷县黑裘皮羊、哈萨克羊群体中没有出现外,在其他群体中均存在。连锁分析结果表明,10个SNPs在所有样本中均存在2个连锁模块。群体遗传变异分析表明,中国地方绵羊群体具有较高水平的群体内遗传变异,各绵羊品种间存在明显的遗传分化模式,且各品种遗传关系与其品种传统分类结果基本一致。本研究为进一步研究TYRP1基因对绵羊毛色遗传性状的影响提供了参考依据。     

杜泊、萨福克、无角陶塞特与小尾寒羊杂交肥羔肉质特性的研究

选在相同条件下饲养的杜泊、萨福克、无角陶塞特与小尾寒羊杂交一代及小尾寒羊(公羔、5～6 月龄、体重46～48.5 kg)共16只,每个处理4只.经屠宰取背最长肌和股二头肌各半制备样品,测定肌肉中化学成分、氨基酸、矿物质和微量元素含量.结果表明:粗蛋白质含量,萨寒F1 20.8%,陶寒F1 20.5%,杜寒F1 20.1%,均高于小尾寒羊(19.6%).每百克肉中17种氨基酸总量也分别高于小尾寒羊,依次为萨寒F1(20.09g),陶寒F1(19.78g);杜寒F1(19.13g);小尾寒羊(18.42g).人体营养所需要的必需氨基酸总量分别比小尾寒羊提高8.86%;8.54%和2.16%,其中组氨酸的含量显著高于小尾寒羊(P＜0.05);杜寒F1和陶寒F1的蛋氨酸含量也显著高于小尾寒羊(P＜0.05).与风味(鲜味)有直接关系的天冬氨酸和谷氨酸含量也分别比小尾寒羊高.萨寒F1和陶寒F1粗脂肪含量高于小尾寒羊(P＜0.05).杂交肥羔钙极显著高于小尾寒羊(P＜0.01),铁、锰、硒含量也显著高于小尾寒羊(P＜0.05);而小尾寒羊肥羔肉含锌量(34mg)高于杂交羊;有毒有害元素均未检出,综合评定杂交肥羔肉的营养价值和肉质品质均优于小尾寒羊.     

实时荧光定量PCR构建绵羊PrP基因标准品质粒和标准曲线

羊痒病是一种传染性的致死性神经退行性疾病,常引起绵羊和山羊发病,该病在欧洲流行了大约250年,但是它的流行病学和传播机制还不是很清楚.正常的朊蛋白（PrPc）不能引起神经退行性病变,虽然目前已经对许多组织的PrP mRNA进行了检测,但是对它的生物学功能还知之甚少,对PrP基因表达的机制尚不清楚.研究显示,不同组织来源的细胞中朊蛋白的表达程度差异很大,主要出现于神经细胞中.PrPc在细胞中的高水平表达可促使PrPc向PrPsc转变,目前的研究中,对绵羊PrP mRNA的转录机制尚未阐释清楚.因此,对绵羊外周和中枢系统PrP mRNA的表达进行定量,有助于探讨各组织器官中的PrP在羊痒病的发生过程中的作用.     

灌注果寡糖对生长绵羊瘤胃发酵功能的影响

采用营养灌注技术研究了果寡糖对生长绵羊瘤胃发酵功能的影响。试验选取6只安装有永久性瘤胃瘘管的内蒙古半细毛羯羊，随机分为两组，试验组一灌注1．00％果寡糖，试验组二灌注2．00％果寡糖。结果表明：灌注果寡糖可以显著（P〈0．05）降低试羊的瘤胃液相pH和瘤胃内的NH3-N浓度，显著提高（P〈0．05）瘤胃内的VFA含量和MCP含量。两个灌注水平都可以提高生长绵羊的瘤胃发酵功能。但2．00％的灌注水平仅在瘤胃NH3-N浓度的降幅方面比1．00％的灌注水平显著增大（P〈0．05），在对瘤胃液相pH值、VFA含量和MCP含量的影响方面两个灌注水平没有显著差异（P〉0．05）。