转双价抗病基因(Chi+Glu)棉苗期抗病力研究

小区试验结果表明:与受体中棉所24和常规棉赣棉11号相比,转双价抗病基因(Chi+Glu)棉从齐苗至一片真叶期抗病力无显著优势,但是在二叶一心期具有显著的抗病力优势。     

导入抗逆基因的转双抗虫基因741杨的获得

为培育更多抗非生物胁迫的转基因杨树,以转双抗虫基因741杨(P.alba×(P.davidaiana×P.sirnonii)×P.tomentosa)为材料,建立了叶片诱导的转双抗虫基因741杨的高频再生体系,并采用根癌农杆菌介导法,探索了影响其遗传转化效率的主要因子。结果表明:最佳不定芽诱导培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L IBA;继代培养基为MS+0.5 mg/L 6-BA+0.05 mg/L IBA,最佳生根培养基为1/2MS+0.05 mg/L IBA。对影响转化因子的研究结果表明,共培养时间为3 d时,不定芽诱导率最高;共培养培养基加入乙酰丁香酮、pH值调到5.2时,诱导潮霉素抗性芽效果最显著;最佳潮霉素筛选质量浓度为3 mg/L;将抗逆基因AtNDPK2通过农杆菌导入到转基因741杨中,经PCR检测,在抗性植株DNA中扩增出与目的基因大小相同的片断,初步确认目的基因已经整合到转基因741毛白杨基因组中。     

固相微萃取—气相色谱/质谱测定杨树叶片的挥发性物质

在45℃恒温下,采用固相微萃取方法萃取黑杨叶片的挥发性物质,然后采用气相色谱/质谱法分析挥发性物质的化学成分.结果表明,化学成分主要为邻羟基苯甲醛、顺-3-己烯酯、顺-3-己烯醇、水杨酸-2-乙基己基酯等.     

宁夏枸杞的转基因研究进展

宁夏枸杞的转基因研究发展已有20多年,文中通过文献整理,对其方法和应用进行了分析总结。目前,转基因枸杞的系统研究只限于中国,应用领域包括抗性研究和植物疫苗制备。文中主要对以上不同应用的研究方法和发展现状进行了综述,提出转基因枸杞应用的广阔前景和需要解决的问题,为学习研究植物工程在中药领域的应用奠定基础。     

Genome Editing in Large Animals

Genome editing in large animals has tremendous practical applications, from more accurate models for medical research through improved animal welfare and production efficiency. Although genetic modification in large animals has a 30-year history, until recently technical issues limited its utility. The original methods—pronuclear injection and integrating viruses—were plagued with problems associated with low efficiency, silencing, poor regulation of gene expression, and variability associated with random integration. With the advent of site-specific nucleases such as TAL effector-like nucleases and clustered regularly interspaced short palindromic repeat (CRISPR)/Cas9, precision editing became possible. When used on their own, these can be used to truncate or knockout genes through nonhomologous end joining with relatively high efficiency. When used with a template containing desired gene edits, these can be used to allow insertion of any desired changes to the genome through homologous recombination with substantially lower efficiency. Consideration must be given to the issues of marker sets and off-target effects. Somatic cell nuclear transfer is most commonly used to create animals from gene-edited cells, but direct zygote injection and use of spermatogonial stem cells are alternatives under development. In developing gene editing projects, priority must be given to understanding the potential for off-target or unexpected effects of planned edits, which have been common in the past. Because of the increasing technical sophistication with which it can be accomplished, genome editing is poised to revolutionize large animal genetics, but attention must be paid to the underlying biology to maximize benefit.     

关于洞庭湖区杨树发展规模与经营的几个问题

针对洞庭湖区杨树发展中发现的问题,进行了调查研究。从国家法规限制、湖区林业用地总面积、保护生物多样性与可持续发展理念等方面,认证了湖区杨树的适宜发展规模：为11．94万hm^2-12．98万hm^2。同时,还指出了杨树生产中出现的树不适地、经营不善、病虫危害严重和品种混乱问题,并提出了科学规划与合理布局、规范栽培品种、适地适树、加强抚育管理、培育无节良材、控制病虫危害等几个技术措施。     

唾液腺特异表达植酸酶转基因猪的制备及分析

猪(Sus scrofa)对饲料中植酸磷的消化利用效率很低,其粪便中排放大量未吸收的磷,对环境产生严重污染,在猪唾液腺中表达分泌植酸酶是解决猪粪磷污染的一条新途径.为了制备唾液腺特异表达植酸酶的新型减磷排放转基因猪,本研究构建了一条由猪腮腺分泌蛋白基因(parotid secretory protein,PSP)启动细菌源植酸酶基因appA(acid phosphoanhydride phosphohydrolase)表达的转基因载体,并利用体细胞核移植技术获得14头原代(F0)转基因克隆猪,经PCR鉴定,其中8头为阳性猪.PCR分析显示,appA基因在转基因猪的唾液腺组织特异表达,但在肾脏、肝脏、心脏、十二指肠等组织中不表达.营养代谢分析证明,转基因猪粪磷排放量比非转基因猪显著减少了16％(P＜0.05),而转基因猪对干物质和能量的表观消化率以及对Ca、P的消化率均高于野生型猪,但未达到显著水平.外源基因从F0转基因猪稳定遗传至F1,并且Southern blot分析显示,外源基因是以单拷贝形式整合至转基因猪基因组.F1转基因猪的appA表达模式与F0转基因猪相似,其只在唾液腺中特异表达,且以颌下腺表达最高,其次是腮腺和舌下腺,在肾脏、心脏、肝脏等组织不表达.本研究成功获得唾液腺特异表达植酸酶转基因猪,为培育新型减磷排放的环保转基因猪新品种提供了科学依据.     

白羊草BiMYB52基因的克隆及转基因拟南芥抗旱性表达分析

白羊草(Bothriochloa ischaemum)是一种耐旱的优良乡土草种。为了探索白羊草转录因子MYB的结构和功能,本研究以白羊草转录组测序中筛选出的一段对干旱胁迫响应表达量变化显著的MYB序列为基础,采用基于拓扑异构酶快速克隆法从白羊草中克隆了一个R2R3-MYB基因BiMYB52,该基因编码237个氨基酸。为了深入研究BiMYB52基因的抗旱性,利用染色体步移技术扩增出了BiMYB52启动子序列,构建了pCAMBIA1301-BiMYB52过表达载体,采用农杆菌介导的花序侵染法对拟南芥(Arabidopsis thaliana)进行遗传转化,然后对野生拟南芥和转基因拟南芥进行干旱胁迫处理。结果表明,干旱胁迫复水后,转基因拟南芥的存活率显著高于野生拟南芥,丙二醛(Malondialdehyde, MDA)含量是干旱胁迫后转基因拟南芥的显著低于对照,脯氨酸(Proline, Pro)含量则显著高于对照。由此推测BiMYB52基因可能增加了拟南芥对干旱胁迫的抵抗能力。这为白羊草抗旱育种提供候选基因和理论基础。     

桑树转基因植株的叶片蛋白质含量分析

利用蛋白质全自动测定仪，对桑树转基因植株叶片中的蛋白质含量进行了测定。不同株系间粗蛋白质含量有较大差异。已确认的两个转基因株系（230和410）粗蛋白质含量高于对照品种，而其它株系则基本相近。     

GC-MS法测定杨树叶中挥发性物质研究

采用GC-MS方法分析用水蒸气蒸馏法提取的杨树叶中的挥发性物质。结果表明:杨树叶共检测出28种挥发性化合物,包括烷烃类、烯烃类、酚类、酯类、萜类、酮类、醛类、酸类、胺类、抗氧化剂BHT。其中除一些常见的烷烃类外还有14种化合物,其中酚类有3种,分别是苯酚、对乙烯基愈疮木酚、丁香酚;酯类有3种,分别是苯甲酸叶醇酯、棕榈酸乙酯、亚麻酸乙酯;1,2-环己二酮;2-羟基苯甲醛;萜类物质叶绿醇;Nonahexacontanoic acid;1-十九烯;2,6-二叔丁基对甲酚;还有1-溴二十二烷和邻异丙基苯胺。这些挥发性物质中的丁香酚、苯酚、亚麻酸乙酯等对杨树的抗病性起一定作用。