蓝细菌血畿飞逝基因的克隆及其向甘蓝型油菜中的转化

血红蛋白存在于动物、植物、细菌、真菌、酵母、藻类、原生动物等生物体中。利用PCR方法克隆了蓝细菌Synechocystis sp. PCC 680的血红蛋白基因SLR2097,该基因属于“truncated”血红蛋白家族,大小为375 bp,编码123个氨基酸残基。数据库搜索的结果显示所有的血红蛋白都有一个保守基序,即‘F-[L]-x(4)-[G]-G-[T]-x(2)-[Y]-x-[G]-[R]-x-[M]-x(3)-H’, “truncated”血红蛋白家族也有该结构,表明它们的进化祖先相同。将获得的SLR2097连接到双元载体pCAMBIA1300-CaMV35S上,并转化甘蓝型油菜品种宁油12。转基因油菜表型分析表明,血红蛋白基因SLR2097在油菜中的表达促进油菜的生长并缩短发育期,引起早熟,这些表型对改良油菜的农艺性状有重要的应用价值。     

含硫氨基酸基因植物表达载体的构建及对百脉根的转化

在本研究中,用限制性内切酶Nco Ⅰ和Bgl Ⅱ从中间载体pMD18zeolin和pMD18zein 上切下zeolin基因(约1 600bp)和γ-zein基因(约720 bp),将其定向连接在经相同酶切的质粒载体pCAMBIA1302上,构建成植物表达载体pCBzeolin和pCBzein.采用冻融法将pCBzeolin和pCBzein导入根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)菌株LBA4404,利用该菌株转化百脉根(Lotus corniculatus L.).经过共培养、筛选分化、再生,得到抗件植株.对抗性植株进行了PCR、RT-PCR检测表明,γ-zein和zeolin基因已经整合到百脉根基因组中,在核酸水平得到了表达.含硫氨基酸数据分析表明,转zeolin基因植株含硫氨基酸含量极显著高于转γ-zein基因植株和对照植株的含量(P＜0.01),但转γ-zein基因植株与对照植株间差异不显著.     

石蒜属植物再生体系与鳞茎花卉遗传转化体系研究进展

石蒜属是我国重要的观赏植物资源,其再生体系和遗传转化体系的建立对于解决种球繁育及种质创新难题具有重要意义.我国一些科研单位对石蒜属的组织培养进行了研究,但目前尚未建立成熟高效的再生体系,石蒜属的遗传转化也鲜有研究报道.本研究综述了我国近年来有关石蒜属植物组织培养的研究进展,主要包括外植体选择与处理、培养基激素配比与培养条件,以及再生体系建立可能遇到的问题.最后,概述了百合、水仙等鳞茎类花卉的转基因研究现状,以期为今后的石蒜遗传转化研究工作提供借鉴.     

一种改进大肠杆菌DH5α转化效率的方法

[目的]提高大肠杆菌DH5α转化效率。[方法]在其他条件一致的情况下,将5μl的质粒或连接产物加入含有100μl的感受态0．2mlPCR管和1．5ml的离心管中,0．2mlPcR管设置热休克时间梯度和1．5ml的离心管热休克时间90s,对大肠杆菌DH宴“转化效率进行了比较。[结果]0．2mlPCR管转化效率高于1．5ml的离心管,且0．2ml PCR管热休克30S时最高。[结论]采用此方法提高了大肠杆菌DH5α的转化效率。     

加速农业科技成果转化 促进广西农业增产增收

近年来,广西农业科学院以科技创新为根本,以服务"三农"为宗旨,创新科技成果转化载体,使全院的科技成果转化率高达90%以上,产生了显著的经济效益和社会效益。文章简要介绍了广西农业科学院在科技成果转化方面的成功经验,提出了进一步加快成果转化步伐的策略,即紧密结合当地农业生产实际,加大资金和技术投入,理顺成果转化机制,加强成果展示与示范等。     

农业科技成果转化途径的探讨——玉米新品种“潞玉13”成果转化剖析

文章通过剖析"潞玉13"玉米新品种成果转化的事例,探讨了农业科技成果转化率低的原因,指出了由于农业科技成果本身研制周期长、产量不稳定、比较效益低、农民科技文化素质不高等内部因素,加大了农业科技成果转化的难度,但在提高成果本身质量,加强转化过程中的各项管理,提高农业科技成果转化率等方面仍具有较大的发展空间。     

宣传是科技成果推广与转化的重要途径

加大宣传力度是加速推进科技成果推广与转化的重要途径。通过示范基地建设、舆论媒体宣传和科技专家服务,河北省农林科学院对取得的一些重要的成果进行及时、直观和富有特色的宣传报道,促进了科技成果和先进技术的转化应用,取得了巨大的社会、经济效益。     

运用知识产权 保护农业科技创新

介绍了植物新品种权、农业专利权、农产品商标权和农业著作权保护的法律依据及保护范围。     

番茄NAM基因的克隆与遗传转化

为了研究番茄NAM基因的功能,利用RT-PCR技术从番茄cDNA中分离了NAM(GenBank登录号:FJ435163.1)基因,该基因ORF全长1 053 bp,共编码351个氨基酸,N端含有NAC结构域.定量RT-PCR分析结果表明,该基因在番茄的根、茎、叶、花和果实中均有较强表达.为了进一步研究番茄NAM基因的功能,构建了NAM基因的超表达载体pLP100-35S-NAM,通过农杆菌介导法转化番茄,并获得抗性植株.经表型分析,转基因番茄植株矮小,生长受到抑制,叶片形态异常,表明NAM基因影响番茄顶端分生组织(SAM)的形成和叶片形态的发生.     

热激后冰浴时间与复苏时间对化学转化法转化效率的影响

[目的]研究化学转化过程中热激后冰浴时间和复苏时间对转化效率的影响,确定简便快速的转化方法。[方法]采用2种缓冲溶液制备感受态,以热激后冰浴时间或复苏时间为变量,研究这2个因素与转化效率的关系。[结果]冰浴2 min,复苏30或40 min达到最佳转化效率;冰浴和复苏时间为0 min时仍能获得相当数量的转化子。[结论]热激后冰浴和复苏时间对转化效率有一定影响,但不是决定性因素。因此,在一般性转化试验中可以省略这2个步骤以节省时间。