全文获取类型
收费全文 | 260篇 |
免费 | 10篇 |
国内免费 | 15篇 |
专业分类
农学 | 1篇 |
1篇 | |
综合类 | 47篇 |
农作物 | 1篇 |
水产渔业 | 1篇 |
畜牧兽医 | 234篇 |
出版年
2024年 | 1篇 |
2023年 | 1篇 |
2022年 | 8篇 |
2021年 | 7篇 |
2020年 | 4篇 |
2019年 | 9篇 |
2018年 | 4篇 |
2017年 | 10篇 |
2016年 | 14篇 |
2015年 | 7篇 |
2014年 | 18篇 |
2013年 | 11篇 |
2012年 | 28篇 |
2011年 | 20篇 |
2010年 | 29篇 |
2009年 | 21篇 |
2008年 | 15篇 |
2007年 | 22篇 |
2006年 | 11篇 |
2005年 | 7篇 |
2004年 | 2篇 |
2003年 | 4篇 |
2002年 | 1篇 |
2001年 | 2篇 |
2000年 | 1篇 |
1999年 | 6篇 |
1998年 | 2篇 |
1997年 | 2篇 |
1996年 | 1篇 |
1995年 | 3篇 |
1994年 | 5篇 |
1993年 | 1篇 |
1992年 | 2篇 |
1991年 | 1篇 |
1989年 | 2篇 |
1986年 | 1篇 |
1984年 | 1篇 |
1982年 | 1篇 |
排序方式: 共有285条查询结果,搜索用时 31 毫秒
41.
42.
弓形虫棒状蛋白2研究进展 总被引:3,自引:1,他引:2
棒状蛋白2(ROP2)为弓形虫生活史各期均能分泌的抗原,具有高度的保守性和免疫反应性.综述了近年来关于ROP2分子生物学特征、免疫特性、疫苗的研究进展. 相似文献
43.
检测实验动物弓形虫感染的两种PCR方法的建立和比较 总被引:4,自引:1,他引:4
为了建立敏感、稳定、特异的PCR检测体系,用于实验动物弓形虫感染的检测。采用B1基因设计引物,建立常规PCR,用P30基因设计引物,建立巢式PCR;用两种PCR方法检测实验感染弓形虫小鼠血液和腹腔波中的DNA动态变化;用巢式PCR检测自然状态下的普通级豚鼠、教学和科研用兔的弓形虫感染率,并和常规PCR检到结果比较。结果,巢式PCR可检测到1fgDNA含量,比常规PCR敏感lOO倍;对其他微生物DNA无交叉现象,特异性强;对同一样品重复检测3次,阴、阳性结果一致,稳定性好。小鼠感染弓形虫2d后,巢式PCR对小民腹腔液的阳性检出率为83.3%,对血液的阳性检出率为33.3%;感染3d后,腹腔液阳性检出率为100%;而常规PCR在小鼠感染3d和4d后才能在腹腔液和血液中检测到,检出率各为16.7%。受检普通级豚鼠没有感染弓形虫,教学和科研用兔的弓形虫总感染率为14.3%。结论认为,巢式PCR方法可用于实验动物弓形虫早期感染的检测,具有敏感性高、特务性强、稳定性好的特点。 相似文献
44.
45.
采用PCR方法扩增弓形虫GRA3基因,将扩增产物与pMD18-T Simple载体连接,重组质粒经PCR、双酶切鉴定后测序;构建pGEX-4T-1/GRA3表达载体,经IPTG诱导表达后,进行SDS-PAGE、Western blot分析。结果显示,克隆的GRA3基因片段长687bp,含有1个669bp的开放阅读框,编码222个氨基酸,与GenBank中UK株(AF414079)的同源性为99.8%;表达的融合蛋白为50Ku,能被弓形虫阳性血清识别;表明该融合蛋白具有较好的免疫反应活性。 相似文献
46.
采用PCR技术从弓形虫RH株的基因组DNA中扩增编码MIC3的基因,克隆入pMD18-T载体,转化至E.coliDH5α感受态细胞,经抗性平板筛选、小量抽提质粒进行酶切、PCR及DNA测序鉴定后,亚克隆入真核表达载体pcDNA3.1。然后筛选含有目的基因的重组质粒,并转染IBRS-2细胞,在G418压力下进行筛选,利用SDS-PAGE、Western blot和ELISA检测表达情况。结果显示,扩增的MIC3基因与GenBank上相应基因序列(AJ132530)的一致性达99.9%,构建的真核表达质粒pcMIC3能在转染的IBRS-2细胞中表达分子量约为39.2ku的MIC3,且表达的蛋白质具有良好的免疫活性,为进一步研究该质粒的动物免疫试验奠定了基础。 相似文献
47.
北京地区犬猫弓形虫病血清学调查 总被引:9,自引:1,他引:9
比较了酶联免疫吸附试验(ELISA)和乳胶凝集试验对犬猫进行龚地弓形虫(Toxoplasma gondii)抗体检测的结果.在66只犬猫的血清中,ELISA方法检测的阳性率为24.0%,乳胶凝集试验阳性率为21.0%,二者的检测结果差异不显著(P>0.05).后采用ELISA方法对北京地区家养的159只犬和128只猫进行了弓形虫IGg抗体的检测,共有21只犬(13.21%)和18只猫(14.06%)检测结果为阳性.1岁以下犬(3.70%)、猫(4.35%)低于1至3岁犬(11.29%)和猫(6.98%)的感染率.3~6岁犬猫的感染率分别是27.27%和16.22%,6岁以上犬(30.0%)、猫(32.0%)的感染率最高.不同性别之间感染无明显差异(P>0.05). 相似文献
48.
北京地区犬猫弓形虫病流行病学调查 总被引:1,自引:0,他引:1
为初步调查北京地区犬猫弓形虫感染的流病学特征,用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测2010年5月至2011年4月采集的家养犬猫、流浪猫血清样本.其中,家养犬血清样本1876份,家养猫血清样本561份,检测发现,家养犬动物弓形虫IgG抗体阳性率24.9%;家养猫弓形虫IgG阳性率21.2%;同时检测流浪猫样本201份,阳性率30.3%.家养犬弓形虫血清抗体阳性率不同季节间差异显著(P<0.05),夏季最高,为30.0%,家养猫弓形虫血清抗体阳性率不同季节间无显著差异(P>0.05).不同性别犬猫弓形虫血清抗体阳性率无显著差异(P>0.05).随着年龄增长,犬猫弓形虫抗体阳性率均有明显增长.对25例弓形虫抗体阳性家养犬病例和37例弓形虫抗体阳性家养猫病例进行了回访调查,结果发现,该62例动物主人的弓形虫检测结果均为阴性. 相似文献
49.
本研究旨在构建弓形虫(Toxoplasma gondii)Ⅰ型RH虫株的膜占位与识别联结蛋白2(membrane occupation and recognition nexus protein,MORN2)基因敲除株,探究MORN2基因的表型功能。利用CRISPR/Cas9技术在sgRNA设计网站筛选出以MORN2基因为靶标的sgRNA并设计引物,以pSAG1∷CAS9-U6∷sgUPRT质粒为模板,在Q5酶作用下构建出MORN2靶向CRISPR的质粒;在MORN2靶点两翼约500 bp设计同源臂引物,以pUPRT∷DHFR-D质粒为模板构建含有乙胺嘧啶药物抗性基因(DHFR)的同源片段;将CRISPR质粒与同源片段电转染到弓形虫速殖子中,进行乙胺嘧啶药物筛选、96孔板单克隆筛选及PCR鉴定。结果显示,试验成功获得MORN2基因敲除株,在体外噬斑试验中,该敲除株的生长速度与野生型RH虫株基本一致;在体内感染试验中,分别以100和1 000个敲除株的速殖子腹腔注射小鼠,小鼠的死亡时间与对照组基本一致,说明MORN2基因的缺失几乎不影响RH虫株在体外培养时的生长速度和感染小鼠的毒力。本研究证明了MORN2基因在RH虫株中无表型功能,为进一步探究弓形虫的功能基因奠定了基础。 相似文献
50.
研究弓形虫感染对小鼠妊娠的影响。用免疫组织化学方法测定子宫部分免疫细胞,用酶联免疫吸附法测定子宫匀浆中肿瘤坏死因子 α(TNF α)和白介素 10(IL 10)的含量。发现孕0天和孕6天接种弓形虫,小鼠全部流产。感染组子宫内膜中仅见少量CD8+T淋巴细胞。对照组未见阳性细胞。F4/80+巨噬细胞在感染组小鼠子宫内膜中大量存在。对照组仅见少量F4/80+细胞。细胞因子测定结果表明,TNF α弓形虫感染组子宫匀浆中含量高达76 862±30 354pg/mg蛋白,显著高于正常妊娠7天时小鼠子宫中TNF α的含量(P<0 01)。结果提示,已妊娠母鼠感染弓形虫可引发流产,并与子宫胎儿界面的TNF α分泌增多有关。孕0天感染,孕鼠子宫匀浆上清液中IL 10含量平均值为19 696±9 811pg/mg蛋白,显著低于对照组(48 856±16 518pg/mg,P<0 05)。孕6天感染,子宫匀浆IL 10含量与对照组比较差异不显著(P>0 05)。 相似文献